施杏芬，朱聰英

（浙江省獸藥飼料監(jiān)察所，浙江杭州311000）

復(fù)合預(yù)混合飼料是配合飼料的核心，其混合均勻度的好壞直接影響配合飼料的品質(zhì)。飼料混合均勻度測定的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)有GB/T 5918和GB/T 10649，然而這兩種標(biāo)準(zhǔn)均不適用于復(fù)合預(yù)混合飼料和維生素預(yù)混合飼料。本實(shí)驗(yàn)旨在選擇合適的方法開展預(yù)混合飼料中混合均勻度的測定?？紤]到脂溶性維生素相對不穩(wěn)定，而維生素B2不僅比較穩(wěn)定，而且在預(yù)混合飼料產(chǎn)品中添加量比較適中，因此依據(jù)GB/T 14701-2002標(biāo)準(zhǔn)，采用高效液相色譜法測定維生素B2含量，用其含量的變異系數(shù)來衡量復(fù)合預(yù)混合飼料的混合均勻度。方法簡便易行，企業(yè)可以結(jié)合定期檢驗(yàn)同時進(jìn)行混合均勻度驗(yàn)證。

1 采樣和試樣制備

從同一批產(chǎn)品中抽取10個有代表性的原始樣品，每個樣品在一點(diǎn)集中采集，每個樣品的采樣量為50～100 g，試樣制備按GB/T 20195執(zhí)行。

2 試劑與材料

2.1 試劑與溶液 乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）、庚烷磺酸鈉（優(yōu)級純）、冰乙酸（優(yōu)級純）、三乙胺（色譜純）、甲醇（色譜純）。提取液：稱取50 mg EDTA于1000 mL容量瓶，加純水溶解后，加入25 mL冰乙酸和5 mL三乙胺，并用純水定容至刻度搖勻。流動相：稱取50 mg EDTA和1.1 g庚烷磺酸鈉于1000 mL容量瓶，加純水溶解，加入25 mL冰乙酸和5 mL三乙胺，并用純水定容至刻度搖勻，再用冰乙酸或三乙胺調(diào)pH至3.40±0.02，過0.45 μm濾膜。取該溶液860 mL與甲醇140 mL混合，超聲脫氣，待用。

2.2 主要儀器 高液相色譜儀（配紫外檢測器）、超聲波清洗器、pH計(jì)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確稱取維生素B2標(biāo)準(zhǔn)品（含量≥98.0%）0.0100 g于200 mL棕色容量瓶，加1 mL冰乙酸和100 mL純水，置50℃超聲波清洗器中超聲溶解，冷卻至室溫后用純水定容至刻度，搖勻，此溶液濃度為50 μg/mL，4℃冰箱避光保存6個月。準(zhǔn)確吸取該溶液3.0 mL于10 mL棕色容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻。該標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為 15 μg/mL，過 0.45 μm 濾膜，上機(jī)測定。

3 測定

3.1 試樣提取 稱取試樣0.25～3 g（視維生素B2標(biāo)示值稱量，精確至0.0001 g）于100 mL棕色容量瓶，加入80 mL左右的提取液，置于50℃超聲波清洗器中超聲30 min溶解，期間搖動若干次，冷卻至室溫加入14 mL甲醇，用提取液定容至刻度，搖勻，維生素預(yù)混合飼料可用提取液適當(dāng)進(jìn)行稀釋。過0.45 μm濾膜，上機(jī)測定。

3.2 色譜條件 NoVa-pak色譜柱：150mm×3.9mm，粒度4 μm的C18柱或相當(dāng)者；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：10 μL；柱溫：30 ℃；檢測波長 280 nm。

4 結(jié)果計(jì)算

4.1 各試樣中維生素B2含量計(jì)算公式

式中：X為試樣中維生素B2的含量，mg/kg；m為試樣質(zhì)量，g；Vi為試樣溶液進(jìn)樣體積，μL；Pi為試樣溶液峰面積值；V為試樣定容體積，mL；ci為標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，μg/mL；Vst為標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積，μL；Psti為標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積值。

4.2 混合均勻度變異系數(shù)計(jì)算 通過10個維生素B2試樣含量的平均值（X-）和標(biāo)準(zhǔn)差（S）計(jì)算得到混合均勻度變異系數(shù)，結(jié)果見表1。

維生素B2含量的平均值按下式計(jì)算：

5 結(jié)果與討論

隨機(jī)抽取5個不同預(yù)混合飼料產(chǎn)品，用上述方法測定了混合均勻度變異系數(shù)，結(jié)果見表1。結(jié)果顯示這5種預(yù)混合飼料產(chǎn)品的混合均勻度均小于5%，符合《飼料生產(chǎn)企業(yè)許可條件》中規(guī)定的設(shè)備混合均勻度變異系數(shù)的要求。

表1 5種不同預(yù)混合飼料產(chǎn)品混合均勻度變異系數(shù)測定結(jié)果

該方法可以為預(yù)混合飼料生產(chǎn)企業(yè)提供混合機(jī)的混合性能驗(yàn)證、最佳混合時間確定的方法依據(jù)。對于配合飼料生產(chǎn)企業(yè)，也可以用該方法考察、驗(yàn)證小料混合機(jī)的混合性能、確定最佳混合時間.