吉林省臨江市朝鮮淫羊藿中淫羊藿苷積累規(guī)律研究

吉林省臨江市朝鮮淫羊藿中淫羊藿苷積累規(guī)律研究

邱野1,劉知源1,江歆美1,李楊1,趙君強1,胡全德2,李宜平1*

(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117;2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長春 130118)

摘要：目的研究朝鮮淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷的積累規(guī)律，為其合理采收種提供依據(jù)。方法在同一地點，采集朝鮮淫羊藿不同生長時間的葉，測定其中淫羊藿苷的含量。結(jié)果進(jìn)入秋季朝鮮淫羊藿中淫羊藿苷積累速度加快,9月中旬左右達(dá)最高。結(jié)論進(jìn)入秋季，朝鮮淫羊藿葉中淫羊藿苷積累速度加快，在農(nóng)歷的白露前后，朝淫羊藿苷的含量達(dá)到最高,因此鮮淫羊藿的最佳采收期應(yīng)在9月中旬。

關(guān)鍵詞：淫羊藿；淫羊藿苷；臨江市

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.05.021

中圖分類號：R282文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1003-5699(2015)05-0502-03

基金項目:中醫(yī)藥行業(yè)科研專項“我國代表性區(qū)域特色中藥資源保護(hù)利用”(201207002)；吉林省代表區(qū)域中藥資源保護(hù)利用(201007002-05)；國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201310199034)。

作者簡介:邱野(1989-)，男，碩士研究生，主要從事中藥資源及開發(fā)利用的研究。

收稿日期:(責(zé)任編輯：張瑞彬2015-03-10)

*通信作者:李宜平，電話-(0431)86172201，電子信箱-czdliyiping@163.com

Accumulation of Icariin in Epimedium koreanum Nakai in Linjiang from Jilin Province

QIU Ye1,LIU Zhiyuan1,JIANG Xinmei1,LI Yang1,ZHAO Junqiang1,HU Quande2,LI Yiping1*

(1.Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China;

2.Jilin Agriculture University,Changchun 130118,China)

Abstract:ObjectiveTo provide basis for harvesting by studying the accumulation regularity of icariin in Epimedium koreanum Nakai.MethodsTo collect on a same piece of land,accumulate leaves of Epimedium koreanum Nakai at different times of its growing process for determination of icariin content.ResultsThe accumulative process of icariin accelerates in autumn,during which the content of icariin reaches the highest level in mid-September.Conclusion The best harvest time of Epimedium koreanum Nakai is mid-September.

Keywords:Epimedium koreanum Nakai;Icariin;Linjiang

朝鮮淫羊藿(EpimediumkoreanumNakai)為多年生宿根草本植物，植株纖細(xì)、根系淺，分布天然雜木林下，以柞木下分布較多，是淫羊藿藥材的主要來源[1-2]。我省長白山區(qū)朝鮮淫羊藿分布較廣、資源豐富，目前基本靠野生資源供藥用，尚無人工栽培[3]。近年來由于不合理采收，臨江市朝鮮淫羊藿遭到破壞，資源量急劇下降,目前的年收購量較前10年減少了60%以上;由于采收期不合理造成藥材質(zhì)量下降嚴(yán)重[4-5]。通過對朝鮮淫羊藿不同生長期葉中的淫羊藿苷含量進(jìn)行比較研究，尋找淫羊藿藥材有效成分積累的規(guī)律，確定朝鮮淫羊藿的最佳采收期，為市場提供優(yōu)質(zhì)藥材。

1實驗材料

1.1材料采自吉林省臨江市吊打水庫附近雜木林下，東經(jīng)：126°56′37.1″；北緯：41°54′26.1″；海拔629.1 m，周邊1 km2范圍內(nèi)，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)胡全德教授鑒定為EpimediumkoreanumNakai。分別于2013年5月3日、2013年6月7日，2013年7月13日、2013年8月20日、2013年9月2日、2013年9月15日、2013年9月21日、2013年10月6日采集地上部分，陰干，取葉，作為含量測定用樣品。

1.2儀器美國安捷倫公司的高效液相色譜儀，UV IS-201紫外檢測器,Column Heater Model 631柱溫箱，HPLC Pump Model 626泵，紫外分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司),KQ-250DB、KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，萬分之一天平(常熟市衡器廠)等。

1.3試劑乙腈(進(jìn)口，色譜純)，純水，乙醇(分析純)，甲醇(色譜純)，淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號110737-200413)。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(30∶70)為流動相；檢測波長為270 nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計算應(yīng)不低于1 500。

2.2對照品溶液的制備取淫羊藿苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20 mL，稱定重量，超聲處理1 h，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計算,含淫羊藿苷(C33H40O15)不得少于0.50%。

2.5淫羊藿苷含量測定結(jié)果在上述色譜條件下，分別進(jìn)樣測定淫羊藿藥材中淫羊藿苷的含量，進(jìn)樣量20 μL。結(jié)果見表1，色譜圖見圖1～圖2。

表1　不同采集時間朝鮮淫羊藿葉中淫羊藿甘含量

2.6方法學(xué)考察

2.6.1線性關(guān)系的考察分別精密吸取淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液1、2、4、6、8、10 μL，注入液相色譜儀中，按上述色譜條件測定色譜峰面積，測定結(jié)果以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為：Y=105 6.5X+7.847 8,R2=0.999 7。表明在0.1～1.0 mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6.2精密度試驗精密吸取淫羊藿苷對照品溶液(0.10 mg/mL)10 mL，重復(fù)進(jìn)樣6次，測定淫羊藿苷峰面積，得其RSD為0.36%。

圖1　對照品溶液色譜圖

圖2　供試品溶液色譜圖

2.6.3穩(wěn)定性試驗取淫羊藿供試品溶液進(jìn)樣10 μL，每隔2 h測定1次，結(jié)果表明樣品在8 h內(nèi)穩(wěn)定，樣品淫羊藿苷峰面積的RSD為0.10%(n=6)。

2.6.4重復(fù)性試驗取淫羊藿樣品，平行6次取樣，制備供試品溶液，進(jìn)樣測定，結(jié)果淫羊藿苷峰面積的RSD為0.94%(n=6)。

2.6.5回收率實驗采取加樣回收法。取淫羊藿樣品約0.2 g，精密加入淫羊藿苷對照品溶液(0.50 mg/mL)10 mL，制備供試品溶液，按上述色譜條件測定，計算回收率，結(jié)果平均回收率為98.54%，RSD為0.13%(n=6)。

3小結(jié)

不同采收期朝鮮淫羊藿葉中的淫羊藿苷的含量差異較大。進(jìn)入秋季，朝鮮淫羊藿葉中淫羊藿苷積累速度加快，9月21日淫羊藿苷的含量達(dá)到最高,此時在農(nóng)歷的白露前后，與當(dāng)?shù)孛耖g淫羊藿應(yīng)在白露時采摘的說法相符。9月末已有初霜，朝鮮淫羊藿地上部分逐步枯萎,其中淫羊藿苷可能由于發(fā)生了水解(酶解)作用導(dǎo)致其含量下降[6]。因此,以中國藥典規(guī)定的淫羊藿苷含量為指標(biāo)，在當(dāng)?shù)兀?朝鮮淫羊藿的最佳采收期為9月中旬。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會.中國藥典:1部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].上海:上海人民出版社,1977:1650.

[3]國腳藥典編委會.中國藥典:1部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000.

[4]劉桂榮,朝鮮淫羊藿的研究進(jìn)展[J].特產(chǎn)研究,1998(3):57-60.

[5]童一中.作物育種常用統(tǒng)計分析方法[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1979.

[6]李建東.吉林植物[M].長春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社,2001.