付祖權(quán)，黃紹宋，姚　嬌，劉　波，夏浩坤，劉曉麗，張萬(wàn)坡，谷長(zhǎng)勤，程國(guó)富，胡薛英

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430070）

犬外耳道耵聹腺腺瘤的病理學(xué)診斷

付祖權(quán)，黃紹宋，姚嬌，劉波，夏浩坤，劉曉麗，張萬(wàn)坡，谷長(zhǎng)勤，程國(guó)富，胡薛英

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430070）

通過(guò)臨床觀察、組織學(xué)診斷結(jié)合免疫組織化學(xué)染色對(duì)一例犬外耳道腫瘤進(jìn)行病理學(xué)診斷。本病例為13歲雄性蘇格蘭牧羊犬，腫瘤發(fā)生于左側(cè)外耳道，眼觀腫物呈灰白色，形成乳頭狀結(jié)節(jié)，與周圍組織界限清晰。組織學(xué)觀察可見(jiàn)結(jié)締組織將實(shí)質(zhì)分成小的囊狀結(jié)構(gòu)；實(shí)質(zhì)細(xì)胞增生，呈典型的頂漿分泌性腺體結(jié)構(gòu)，核大而圓，異型性小，形成乳頭狀突起；間質(zhì)中有多量的血管，并伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。免疫組織化學(xué)中的CK染色發(fā)現(xiàn)增生的實(shí)質(zhì)細(xì)胞為上皮細(xì)胞，而通過(guò)SMA染色可見(jiàn)腺上皮被覆一層完整的肌上皮細(xì)胞。通過(guò)以上診斷方法確定該犬患為外耳道耵聹腺腺瘤。

犬；組織病理學(xué)；免疫組織化學(xué)；耵聹腺腺瘤。

耵聹腺是來(lái)自于耳道結(jié)締組織層的一種頂漿分泌型汗腺，在外耳道分泌黃色黏稠液體，對(duì)外耳道起保護(hù)、濕潤(rùn)作用［1］。2010年P(guān)ark J K等報(bào)道稱，在所有犬腫瘤中，僅2%～6%為外耳道腫瘤［2］，犬的耵聹腺腺瘤在臨床上極為少見(jiàn)，所以根據(jù)外耳道腫瘤分類，犬外耳道常見(jiàn)腫瘤有耵聹腺腺瘤、炎性息肉、乳頭狀瘤、基底細(xì)胞瘤、耵聹腺腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、未知起源的癌［3］，而犬常見(jiàn)的耵聹腺腫瘤則包括耵聹腺腺瘤、混合型耵聹腺腺瘤、耵聹腺腺癌、混合型耵聹腺腺癌［4］。犬的外耳道腫瘤在臨床上極為少見(jiàn)，對(duì)于犬外耳道耵聹腺腺瘤的報(bào)道亦極少。本試驗(yàn)將一例疑似犬耵聹腺腫瘤組織進(jìn)行病理組織學(xué)觀察，并通過(guò)SMA、CK兩個(gè)指標(biāo)進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，結(jié)合臨床癥狀對(duì)該腫瘤進(jìn)行病理學(xué)診斷，從而豐富犬外耳道耵聹腺腫瘤的臨床資料。

1　材料與方法

1.1材料本病例由犬主人送往深圳市福華寵物醫(yī)院就診的蘇格蘭牧羊犬。切下的腫瘤送往華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院病理實(shí)驗(yàn)室制作蠟塊并保存。

1.2試劑鼠抗CK抗體（1∶200），鼠抗SMA抗體（1∶200），DAB顯色液（固體），SABC試劑盒，5% BSA封閉液，以上試劑都購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司；H.E.染色相關(guān)試劑（蘇木素-伊紅），自行配制。

1.3方法

1.3.1臨床診斷通過(guò)對(duì)該犬左側(cè)外耳道腫瘤的視診及觸診確定其位置、大小以及對(duì)機(jī)體的影響。切除腫瘤后觀察腫瘤特征。

1.3.2腫瘤組織的病理學(xué)檢查將切除的腫塊放在10%福爾馬林溶液中固定3 d后取材、脫水、浸蠟、包埋。并將組織切成3 μm厚度的切片。一部分進(jìn)行H.E.染色，觀察病理變化；另一部分進(jìn)行免疫組織化學(xué)法（SABC）染色，對(duì)腫瘤進(jìn)行更準(zhǔn)確的診斷。H.E.染色采用常規(guī)的染色方法；SABC法參考武漢博士德生物工程有限公司的即用型SABC免疫組化試劑盒內(nèi)說(shuō)明書。

1.3.3采圖與觀察將H.E.染色切片和免疫組化切片在顯微鏡下觀察，并通過(guò)NIS-Elements高清晰度彩色圖文分析系統(tǒng)配合Nikon80i生物光學(xué)顯微鏡對(duì)典型病變進(jìn)行顯微采圖。

2　結(jié)果

2.1臨床癥狀患犬為蘇格蘭牧羊犬、雄性、13歲。眼觀腫物位于左側(cè)外耳道，幾乎占據(jù)了整個(gè)外耳道。切除后觀察腫物呈灰白色、質(zhì)地硬，表面凹凸不平，形成乳頭狀結(jié)節(jié)，與周圍組織界限清晰，無(wú)包膜，但易于剝離，無(wú)向周圍組織浸潤(rùn)的現(xiàn)象（見(jiàn)中插彩版圖1A）。

2.2病理組織學(xué)特征鏡下觀察可以外側(cè)為表皮層，表皮下有大量的結(jié)締組織，將實(shí)質(zhì)分成小的囊狀結(jié)構(gòu)，囊內(nèi)實(shí)質(zhì)細(xì)胞增生，向內(nèi)凹陷，呈乳頭狀結(jié)構(gòu)（見(jiàn)中插彩版圖1B）。實(shí)質(zhì)細(xì)胞外側(cè)間質(zhì)結(jié)締組織中有多量的血管（見(jiàn)中插彩版圖1C）。高倍鏡下可見(jiàn)實(shí)質(zhì)細(xì)胞有典型的頂漿分泌性腺特點(diǎn)，即內(nèi)層為一層腺上皮，排列整齊，為立方上皮細(xì)胞。腺上皮細(xì)胞核大而圓，細(xì)胞質(zhì)嗜酸性，并且向胞外分泌嗜酸性物質(zhì)。細(xì)胞大小一致，異型性?。缓朔至严嗌伲ㄒ?jiàn)中插彩版圖1D）。在腺上皮的外側(cè)被覆一層肌上皮。肌上皮外側(cè)充滿了結(jié)締組織及血管、紅細(xì)胞；同時(shí)，在結(jié)締組織中有大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)?？梢?jiàn)在腫瘤的同時(shí)伴有外耳炎的發(fā)生。

免疫組織化學(xué)染色（IHC）可見(jiàn)，對(duì)腫瘤組織的CK染色可見(jiàn)，乳頭狀凸起外側(cè)均被著上棕黃色，著色部位為細(xì)胞質(zhì)，說(shuō)明該腫瘤的增生細(xì)胞含有CK抗原，而內(nèi)側(cè)的結(jié)締組織即血管則沒(méi)有被著色（見(jiàn)中插彩版圖圖1E）；SMA染色可見(jiàn)，在結(jié)締組織外側(cè)與外層的立方上皮之間的一層細(xì)胞著色，著色部位為細(xì)胞質(zhì)（見(jiàn)中插彩版圖圖1F）。

3　討論

犬外耳道表面襯有皮膚，是體表皮膚的延生，其內(nèi)含有毛、皮脂腺和管狀的耵聹腺。其外側(cè)部分由軟骨支撐，其他部分由骨支撐［5］。耵聹腺為頂漿分泌性腺，是一種變異的大汗腺，所以具有頂漿分泌性腺的特點(diǎn)。

對(duì)于犬腫瘤的確診，主要是依據(jù)組織學(xué)診斷結(jié)合免疫組織化學(xué)的方法。耵聹腺腺瘤在組織學(xué)上主要表現(xiàn)出耵聹腺的囊性增生，乳頭狀排列［6］。形成與正常耵聹腺或者頂漿分泌性腺相似的結(jié)構(gòu)，并且具有腺上皮以及被覆的肌上皮的雙層結(jié)構(gòu)，腺上皮細(xì)胞中含有分泌的嗜酸性物質(zhì)。這種腫瘤常伴有外耳道炎，通過(guò)這種慢性刺激，使腫瘤有惡化的傾向［7］。本試驗(yàn)通過(guò)H.E.染色可以發(fā)現(xiàn)腫瘤的增生組織與耵聹腺腺瘤相似，同時(shí)外側(cè)細(xì)胞的特征，可以判定為頂漿分泌性腺。而在免疫組織化學(xué)染色中，CK染色可判斷增生的實(shí)質(zhì)細(xì)胞來(lái)源于上皮組織；SMA染色結(jié)果可知腺上皮下被覆一層較完整的肌上皮。

通過(guò)組織學(xué)與免疫組織化學(xué)染色結(jié)果，可以確定本犬所患為外耳道耵聹腺腺瘤。

同時(shí)，有文獻(xiàn)報(bào)道，大多數(shù)的耵聹腺腺瘤會(huì)伴有炎癥的發(fā)生，且老年犬多發(fā)［8］。問(wèn)診可知患病犬為13歲雄性犬，而在組織學(xué)觀察中可見(jiàn)多量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。即為伴發(fā)炎癥的老年犬，符合犬耵聹腺腫瘤的一般特性。對(duì)于耵聹腺腺癌，癌細(xì)胞會(huì)以不同的方式排列，并且細(xì)胞核的異形性大等特點(diǎn)，同時(shí)具有向腮腺侵襲的可能［9］；而對(duì)于混合性耵聹腺腺癌中在耵聹腺腺癌的基礎(chǔ)上伴隨有軟骨和骨的增生，混合型耵聹腺腺瘤伴隨有肌上皮的增生［10］。

志謝：深圳福華寵物醫(yī)院黃平華院長(zhǎng)為本試驗(yàn)提供腫瘤病例。

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A caseof ceruminous gland adenoma in dog for pathology diagnose

FU Zu-quan，HUANG Shao-song，YAO Jiao，LIU Bo，XIA Hao-kun，LIU Xiao-li，ZHANG Wan-po，GU Chang-qin，CHEN Guo-fu，HU Xue-ying
（College of Veterinary Medicine，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）

We diagnosed an ear tumor in a dog through clinic observation，histology examination and immunochemistry.In a 13-years-old Rough Collie，the tumor in the left external auditory canal formed papillary nodules in hoary，but boundaries were clear with the surrounding tissue.In histology examination，substantive tissues in apocrine glands structure was divided in small ones by connective tissue，and the cell nucleus was big，circle and small pleomorphic.The blood vessel and inflammatory cells were observed in mesenchyme.Immunochemistry staining with CK and SMA showed that the proliferation happened in ceruminous gland.The result indicated that the tumor in external auditory canal was ceruminous gland adenoma.

canine；histology pathology；immunochemistry；ceruminous gland adenoma.

HU Xue-ying

S858.292

A

0529-6005（2016）09-0075-02

2015-09-28

付祖權(quán)（1991-），男，碩士生，從事動(dòng)物病理學(xué)研究，E-mail：1051496317@qq.com

胡薛英，E-mail：hxying@mail.hzau.edu.cn