張海華，周　寧，王士勇，南韋肖，張鐵濤，李光玉*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)重點實驗室，長春 130112；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長春 130118)

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不同錳水平對雄性水貂生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響

張海華1，周寧1，王士勇1，南韋肖2，張鐵濤1，李光玉1*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)重點實驗室，長春 130112；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長春 130118)

摘要：本試驗旨在探討飼糧錳水平對雄性水貂生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及臟器系數(shù)的影響。選取120日齡健康、體重相近的雄性水貂75只，隨機分為5組，每組15個重復(fù)，每個重復(fù)1只水貂，分別飼喂基礎(chǔ)飼糧中添加0 mg·kg-1(I)、50 mg·kg-1(Ⅱ)、100 mg·kg-1(Ⅲ)、300 mg·kg-1(IV)、600 mg·kg-1(V)錳的試驗飼糧。試驗期75 d，分別測定水貂生產(chǎn)性能指標(biāo)，計算臟器系數(shù)，測定血清中蛋白質(zhì)指標(biāo)、氮代謝指標(biāo)及相關(guān)酶活性。結(jié)果表明，試驗結(jié)束時水貂體重、體長、皮長第Ⅲ組均最高，與IV組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于I組、Ⅱ組和V組(P<0.05)，毛皮品質(zhì)各組間差異不顯著(P>0.05)；飼糧錳水平對水貂腎臟、肝臟和心臟指數(shù)無顯著影響(P>0.05)；V組和IV組脾臟指數(shù)顯著高于I組、Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05)。Ⅲ組水貂血清中白蛋白(ALB)和總蛋白(TP)顯著高于I組和Ⅱ組(P<0.05)，血清中球蛋白(GLOB)含量IV組和V組顯著高于I、 Ⅱ和 Ⅲ組(P<0.05)，V組最高；Ⅱ組和Ⅲ組血清中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性顯著高于I組(P<0.05)，各組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性差異不顯著(P>0.05)；Ⅱ組水貂血清乳酸脫氫酶(LDH)活性顯著低于I組、IV組和V組(P<0.05)，Ⅲ組水貂血清中ALP的活性顯著高于其他各組(P<0.05)，而肌酸激酶(CK)各組之間差異不顯著(P>0.05)。由此可見，在本試驗條件下飼糧中添加100 mg·kg-1的錳能夠提高雄性水貂生產(chǎn)性能，同時提高血清中蛋白含量，以及氮代謝相關(guān)酶活性，有利于動物的生長發(fā)育，同時對脾沒有損害。

關(guān)鍵詞：錳；水貂；生產(chǎn)性能；血清生化指標(biāo)；臟器指數(shù)

錳是動物生長發(fā)育所必需的元素，其參與動物體內(nèi)多種酶和激活劑的組成、體內(nèi)脂肪代謝、促進(jìn)性腺發(fā)育和內(nèi)分泌功能，提高機體免疫力，對維持動物骨骼正常生長發(fā)育具有重要作用。孟軻音等[1]研究表明，日糧錳能夠顯著提高獺兔生產(chǎn)性能和飼料轉(zhuǎn)化率，并且血清中Mn-SOD水平顯著提高。任海英等[2]發(fā)現(xiàn)，飼糧90 mg·kg-1的錳元素能夠提高鴨血清葡萄糖、總膽固醇含量，降低尿素氮、肌酐、尿酸、甘油三酯。馬元山等[3]研究表明，雞飼糧中添加100 mg·kg-1MnAA和MnSO4后血清中堿性磷酸酶(ALP)活性分別較對照組高35.7%和21.0%。目前國內(nèi)外尚未明確給出水貂獲得最佳生產(chǎn)性能時飼糧中錳的添加水平，主要參考NRC(1982)推薦量，隨著多年來水貂品種的不斷優(yōu)化和國內(nèi)外水貂的飼養(yǎng)環(huán)境差異，該推薦量已經(jīng)不能滿足水貂的實際需求。

本試驗通過研究飼糧不同錳水平對冬毛期水貂生產(chǎn)性能指標(biāo)、血清中蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)、相關(guān)酶類及臟器指數(shù)的影響，為明確冬毛期水貂飼糧錳的適宜添加水平提供參考，為錳元素在水貂生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，同時為探究錳元素對水貂的營養(yǎng)作用機制奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗動物與試驗方法

選取75只體重相近((1.58±0.04)kg)的健康雄性水貂，隨機分為5組，每組15個重復(fù)，每個重復(fù)1只，單籠飼養(yǎng)。參考NRC(1982)[4]水貂的相關(guān)營養(yǎng)推薦量配制飼糧，選用硫酸錳作為錳源。飼糧中添加的錳水平分別為0 mg·kg-1(Ⅰ組)、50 mg·kg-1(Ⅱ組)、100 mg·kg-1(Ⅲ組)、300 mg·kg-1(IV組)、600 mg·kg-1(V組)，預(yù)試期7 d，正式期75 d，水貂均無不良反應(yīng)。每日08：00和16：00各喂食1次，自由飲水。試驗結(jié)束時記錄水貂體重、體長、皮長和毛皮品質(zhì)。飼糧組成和營養(yǎng)水平見表1。

1.2血清樣品制備

飼養(yǎng)試驗結(jié)束時，每組分別選取8只水貂，稱重后每只心采血5 mL，置于促凝固管中，靜置待血清析出后3 500 r·min-1、4 ℃離心10 min，將分離出的血清分裝在1.5 mL的Eppendorf管中，置于-80 ℃保存，備用。

1.3血清生化指標(biāo)測定

血清中的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、白蛋白、總蛋白、乳糖脫氫酶、肌酸激酶的測定用試劑盒(購自中生北控有限公司)，分別按照試劑盒說明書操作，使用VITALIB-E全自動生化分析儀測定，球蛋白通過總蛋白和白蛋白差值計算獲得。

1.4水貂臟器指數(shù)測定

上述各組水貂心采血后立即處死，迅速取出心、脾、肝和腎，用濾紙吸干臟器表面血液后準(zhǔn)確稱重，然后計算各臟器指數(shù)(器官重量/體重×100)。

表1基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

Table 1Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)

*預(yù)混料為每千克飼糧提供：VA 940 IU；VD3250 IU；VB10.2 mg；VB20.5 mg；VB60.3 mg；葉酸 0.8 mg；D-泛酸 1.0 mg；生物素1 600 mg；鈣 Ca 4.4 g；P 3.2 g;鐵82.0 mg；銅 6.4 mg；碘0.5 mg；鋅100.0 mg；鈷25 mg

* The premix provided the following per kg of diets：VA 940 IU；VD3250 IU；VB10.2 mg；VB20.5 mg；VB60.3 mg；folic acid 0.8 mg；D-pantothenic acid acid 1.0 mg；biotin 1 600 mg；Ca 4.4 g；P 3.2 g；Fe (as ferrous sulfate) 82.0 mg；Cu (as copper sulfate) 6.4 mg；I (as potassium iodide) 0.5 mg；Zn (as zinc sulfate) 100.0 mg；Co (as cobalt oxide) 25 mg

1.5生長性能指標(biāo)測定

水貂體重為試驗結(jié)束時水貂活體稱重，水貂體長測定為鼻尖至尾根的距離，皮長為皮張烘干后鼻尖至尾根的距離，毛皮品質(zhì)參考《中國毛皮獸飼養(yǎng)技術(shù)大全》[5]將水貂毛皮品質(zhì)劃分為1～5分進(jìn)行評定并記錄。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計

數(shù)據(jù)采用Excel進(jìn)行整理，并用SAS 9.2軟件中的GLM程序進(jìn)行方差分析，平均數(shù)之間的多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著，數(shù)據(jù)表示均為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。

2結(jié)果

2.1飼糧錳水平對水貂生產(chǎn)性能的影響

如表2所示，飼糧錳水平對水貂體重、體長和皮長有顯著影響，其中Ⅲ組水貂試驗結(jié)束時體重、體長和皮長顯著高于I組、Ⅱ組和V組(P<0.05)，Ⅲ組水貂體重、體長和皮長與IV組差異不顯著(P>0.05)。水貂毛皮品質(zhì)各組間差異不顯著(P>0.05)，但第IV最高。

2.2飼糧錳水平對血清中蛋白類指標(biāo)的影響

如表3所示，飼糧不同錳水平各組血清中ALB、GLOB和TP差異顯著(P<0.05)，血清中ALB的含量最高為Ⅲ組，顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ組(P<0.05)，Ⅲ組和Ⅳ組血清中ALB差異不顯著(P>0.05)。GLOB隨著錳的添加水平提高有先降低后升高的趨勢，Ⅴ組最高，顯著高于Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05)，與Ⅳ組差異不顯著(P>0.05)。Ⅳ組水貂血清中TP的含量最高且顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，但與Ⅲ組和Ⅴ組差異不顯著(P>0.05)。

表2飼糧錳水平對水貂生產(chǎn)性能的影響

Table 2Effect of diet with different Mn levels on production performance of mink

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母肩標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05)。下表同

In the same row，values with different letter superscripts mean significant difference(P<0.05)，while with the same or no letter superscripts mean no significant difference(P>0.05).The same as below

表3飼糧錳水平對血清蛋白類指標(biāo)的影響

Table 3Effect of diet with different Mn levels on proteins indices in serum

2.3飼糧錳水平對血清中氮代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

由表4已知，飼糧中的錳水平對水貂血清中ALT的活性無顯著影響(P>0.05)。各組間AST存在顯著差異(P<0.05)，其中Ⅱ組最高，顯著高于Ⅰ組、Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.05)，Ⅱ組與Ⅲ組血清AST水平差異不顯著(P>0.05)。

表4飼糧錳水平對血清中氮代謝指標(biāo)的影響

Table 4Effect of diets with different Mn levels on nitrogen metabolism indices in serum

2.4飼糧中錳水平對血清中相關(guān)酶的影響

如表5所示，飼糧中錳水平對水貂血清中CK無顯著影響(P>0.05)。Ⅲ組水貂血清中ALP的活性顯著高于其他各組(P<0.05)，其他組間ALP差異不顯著(P>0.05)，其中對照組血清中ALP活性最低。血清中LDH的活性呈先降低后升高趨勢，其中最低組為Ⅱ組，顯著低于Ⅰ組、Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.05)，Ⅱ組與Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)。

表5飼糧錳水平對血清中相關(guān)酶的影響

Table 5Effect of diets with different Mn levels on enzymes activity in serum

2.5飼糧錳水平對臟器指數(shù)的影響

從表6可以看出，飼糧錳水平對各組水貂心臟、肝臟、腎臟指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，其中心臟和肝臟指數(shù)Ⅲ組最高，腎臟指數(shù)Ⅳ組最高。脾臟指數(shù)各組間存在顯著差異(P<0.05)，Ⅴ組和Ⅳ組的脾臟指數(shù)顯著高于Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05)，Ⅳ組最高，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)。

表6飼糧錳水平對臟器指數(shù)的影響

Table 6Effect of diets with different Mn levels on organ index

3討論

3.1飼糧錳水平對水貂生產(chǎn)性能的影響

水貂體重、體長和皮長等生產(chǎn)性能指標(biāo)受多種因素影響，如水貂品種、飼養(yǎng)環(huán)境和營養(yǎng)水平等。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中錳元素在一定范圍內(nèi)可以顯著的提高水貂體重、體長和皮長指標(biāo)，這表明存在一個水貂發(fā)揮最佳生產(chǎn)性能的日糧錳添加量。在綿羊上的試驗結(jié)果得出，飼糧中錳含量可能通過影響羊的采食量進(jìn)而影響體重和日增重[6]，也有相反的結(jié)論得出高錳飼糧對綿羊的采食量和體增重?zé)o顯著影響[7]。水貂打皮前1個月主要通過增加體脂來增加體重，大量現(xiàn)場飼養(yǎng)實踐表明，相同體長的水貂，體重越大皮張長度越大，本試驗結(jié)果中，水貂試驗初始體重相同，皮長可能主要受試驗水貂體重的影響，而日糧中的錳元素可能與水貂體內(nèi)脂肪代謝有關(guān)。大量試驗表明，飼糧中錳元素不僅是參與骨形成的重要元素，而且與脂類代謝也相關(guān)[8-10]。水貂的毛皮品質(zhì)同樣主要受品種、營養(yǎng)和環(huán)境等因素影響，在本試驗條件下，不同錳添加水平飼糧對水貂毛皮品質(zhì)影響不顯著。飼糧中錳水平主要是通過影響水貂體重、體長和皮長來影響水貂生產(chǎn)性能的。

3.2飼糧錳水平對血清蛋白類指標(biāo)的影響

蛋白質(zhì)是是機體所必須的有機組成成分，其合成和分解決定了機體的蛋白質(zhì)沉積。而錳作為多種酶類的激活劑，能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成。任海英[11]的研究表明，飼糧錳能夠顯著提高蛋雛鴨的血清總蛋白和白蛋白，其中補充60 mg·kg-1的錳效果最佳。喬富強等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加錳元素極顯著提高了7周齡末肉雞血清總蛋白的含量，同時隨著飼喂時間的延長其血清總蛋白呈先升高后降低的趨勢。本試驗表明，添加100 mg·kg-1的錳元素能夠顯著提高血清中ALB和GLOB含量，添加100 mg·kg-1以上錳元素血清TP含量均顯著高于對照組。因此，添加100 mg·kg-1的錳元素能夠有效提高冬毛期水貂蛋白質(zhì)合成效率，在一定程度上提高蛋白質(zhì)的積累，有利于動物生長和提高毛皮品質(zhì)，并且蛋白質(zhì)在一定條件下能夠轉(zhuǎn)化為脂肪，也有利于冬毛期水貂對脂肪的積累。

3.3飼糧錳水平對血清氮代謝指標(biāo)的影響

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶與丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶主要分布在肝細(xì)胞內(nèi)，其中谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶主要分布在肝細(xì)胞質(zhì)中，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶主要分布在肝細(xì)胞漿和肝細(xì)胞線粒體中，可以反映機體中肝合成蛋白的能力和肝的功能狀況[13-14]。王夕國[15]研究發(fā)現(xiàn)，配種準(zhǔn)備期雌性水貂飼糧中添加100和500 mg·kg-1的錳能夠顯著提高血清中的LDH和ALP。孫昱等[16]研究表明，飼糧添加60 mg·kg-1的錳能夠顯著提高絨山羊谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量。而王淑梅[17]報道，仔雞的飼糧中添加錳元素不影響血清天門冬氨酸和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量，與本試驗果不同。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加錳元素能夠提高冬毛期水貂血清中天門冬氨酸的含量，說明飼糧中添加50和100 mg·kg-1的錳元素有利于冬毛期水貂機體氮的合成與代謝，這對水貂肝具有較好的保護和促進(jìn)功能。

3.4飼糧錳水平對血清中相關(guān)酶的影響

錳可以作為ALP的激活劑，骨中含有大量的堿性磷酸酶。由于它存在于成骨細(xì)胞的周圍及其表面而極易釋入血中。而錳作為一種體內(nèi)必需的微量元素對乳酸脫氫酶的活性是必需的，但這種需要是有限度的，具有積累效應(yīng)。本研究表明，飼糧中添加50和100 mg·kg-1的錳后水貂血清中LDH的活性顯著降低。這與曹盛豐等[18]報道中日糧錳缺乏或過多引起血清、肝和睪丸 LDH 活性同步下降的結(jié)果不一致，可能是因為動物品種差異造成。王夕國[15]研究發(fā)現(xiàn)，雌性水貂隨著飼糧錳水平的增加，ALP的活性呈先增加后降低的趨勢，其最大組添加錳量為50 mg·kg-1。任海英[11]發(fā)現(xiàn)，蛋雛鴨的血清和骨ALP活性隨著飼糧錳水平升高而增大。本試驗中，添加100 mg·kg-1的錳后水貂血清中ALP活性顯著高于其他各組，說明添加100 mg·kg-1的錳有利于提高水貂的生長效率，但是錳對生長性能的影響是一個復(fù)雜的過程，可能與器官發(fā)育[19]及腸道吸收[20]等相關(guān)，有待于進(jìn)一步研究。同時，本研究中，飼糧中添加錳50和100 mg·kg-1的水貂血清中LDH偏低，由于LDH是糖異生作用的重要酶，因此錳的攝入可能影響了水貂機體糖代謝的作用。

3.5飼糧錳水平對臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是試驗動物的重要生物學(xué)指標(biāo)之一，其大小在一定程度上能夠反映動物器官的功能強弱及受損情況。尤其肝和脾是動物體內(nèi)重要的代謝和免疫中心，其功能的完整性與血液中的代謝酶和免疫細(xì)胞具有密切關(guān)系[21]。鄧曉輝等[22]發(fā)現(xiàn)，錳能夠增大小鼠脾的臟器指數(shù)，這與本試驗結(jié)果相同。本研究發(fā)現(xiàn)，不同錳水平除了對心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)無明顯影響外，飼糧錳水平在300和600 mg·kg-1時能夠顯著提高脾臟指數(shù)。這可能與過量錳對淋巴細(xì)胞增殖抑制[23]及免疫器官的毒害作用[24]有關(guān)。結(jié)合蛋白及相關(guān)酶指標(biāo)分析，飼糧添加300和600 mg·kg-1的錳并未對機體產(chǎn)生明顯不良影響，但蛋白及酶活性指標(biāo)均有所下降。造成這一結(jié)果的原因可能與錳在脾的過多積累對脾功能有一定傷害，不利于動物機體的正常免疫功能。同時，這一結(jié)果表明，水貂脾對錳元素耐受程度較低，在實際生產(chǎn)中添加過高的錳元素不利于水貂健康。

4結(jié)論

綜合水貂生產(chǎn)性能指標(biāo)、血清中含氮物質(zhì)、氮代謝相關(guān)指標(biāo)、相關(guān)酶活性和臟器指數(shù)的結(jié)果，得出在本試驗條件下，當(dāng)飼糧中添加100 mg·kg-1的錳時能夠提高水貂生產(chǎn)性能、血清蛋白含量和相關(guān)酶活性，并有利于冬毛期水貂生長及氮合成與代謝，同時降低了對脾產(chǎn)生的不利影響和毒害作用。

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(編輯郭云雁)

Effects of Diet with Different Manganese Levels on Production Performance，Blood Serum Biochemical Parameters and Organ Index of Male Mink

ZHANG Hai-hua1，ZHOU Ning1，WANG Shi-yong1，NAN Wei-xiao2，ZHANG Tie-tao1，LI Guang-yu1*

(1.StateKeyLaboratoryforMolecularBiologyofSpecialEconomicAnimals，InstituteofSpecialAnimalandPlantSciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Changchun130112，China；2.AnimalScienceandTechnologyCollege，JilinAgriculturalUniversity，Changchun130118，China)

Key words:Mn；mink；growth performance；serum biochemical indices；organ index

Abstract:The experiment was conducted to study the effect of the different dietary Manganese (Mn) levels on production performance，blood serum biochemical parameters and organ index in male mink.Seventy-five healthy male minks with samilar weight were randomly divided into 5 groups with 15 replicates per group and 1 mink per replicate.0 mg·kg-1(I)，50 mg·kg-1(Ⅱ)，100 mg·kg-1(Ⅲ)，300 mg·kg-1(IV)and 600 mg·kg-1(V)of Mn levels were added in basic diet.The trial lasted for 75 d.Production performance was examined，organ index was calculated and proteins indices，nitrogen metabolism indices，enzymes activity of serum were determined.The results showed that，body weigh,body length and pelt length were highest in group Ⅲ，and they were similar between group Ⅲ and IV (P>0.05)，but significantly higher in group Ⅲ than that in group I，Ⅱ and V(P<0.05).Liver index，heart index and kidney index were not significantly affected by dietary Mn levels (P>0.05)，spleen index of group IV and V were significant higher than that of group I，Ⅱ and Ⅲ (P<0.05).The content of albumin (ALB) and serum total protein (TP) in group Ⅲ were significantly higher than that in group I and Ⅱ (P<0.05)，the content of serum globulin in IV and V groups were significantly higher than that in group I，Ⅱ and Ⅲ (P<0.05)，and the highest one was in V group.The activity of serum AST in group Ⅱ and Ⅲ were significantly higher than that in group I (P<0.05)，the activity of LDH in group I，IV and V were significantly higher than that in group Ⅱ (P<0.05)，the activity of ALP in group Ⅲ was significantly higher than that in other groups (P<0.05 )，CK was similar among all groups (P>0.05).In conclusion，under this experimental conditions，when the diet supplementation with 100 mg·kg-1Mn，the minks had the best production performance and relatively higher protein synthesis rate，enzyme activity and it also could improve the growth performance and no damagement on the spleen of male mink.

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.01.016

收稿日期：2015-03-20

基金項目：吉林省特種經(jīng)濟動物營養(yǎng)與生理研究創(chuàng)新團隊(20121810)

作者簡介：張海華(1984-)，女，河北承德人，博士，主要從事特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)研究，E-mail：zhh83@126.com *通信作者：李光玉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail：tcslgy@126.com

中圖分類號：S816.32

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號:0366-6964(2016)01-0120-08