3種不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在涂陰肺結(jié)核診斷中的對(duì)比分析

楊睿

3種不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在涂陰肺結(jié)核診斷中的對(duì)比分析

楊睿

目的通過(guò)對(duì)比3種不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在涂陰肺結(jié)核診斷中的結(jié)果,分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法200例涂陰肺結(jié)核患者作為涂陰肺結(jié)核組,再選取同期45例非肺結(jié)核體檢者作為非肺結(jié)核組。分別采取涂片、結(jié)核菌培養(yǎng)以及熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法進(jìn)行檢測(cè)。觀察并對(duì)比3種檢測(cè)方法的結(jié)果,分析不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果涂陰肺結(jié)核組涂片法檢測(cè)的陽(yáng)性率為21.5%,培養(yǎng)法檢測(cè)的陽(yáng)性率為34.0%,熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率為60.5%。涂陰肺結(jié)核組患者的涂片法、培養(yǎng)法以及熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率與非肺結(jié)核組(2.2%、0、2.2%)比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論涂片法檢測(cè)快速方便,熒光定量PCR檢測(cè)法敏感度高,假陽(yáng)性低,培養(yǎng)法仍是診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn),3種檢測(cè)方法相結(jié)合可提高涂陰肺結(jié)核的診斷率。

涂片法；培養(yǎng)法；熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；涂陰肺結(jié)核診斷

最近幾年隨著生活方式與生活環(huán)境的改變,我國(guó)肺結(jié)核疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。肺結(jié)核作為第二大傳染疾病不僅嚴(yán)重危害了患者的身體健康,也為患病人群的生活與工作帶來(lái)嚴(yán)重困擾［1,2］。根據(jù)相關(guān)調(diào)查,肺結(jié)核疾病的發(fā)病可能與艾滋病和糖尿病的高發(fā)相關(guān),由于艾滋病和糖尿病發(fā)病后使用的免疫抑制劑會(huì)對(duì)自身的免疫機(jī)制造成損傷,因此更容易感染病菌形成肺結(jié)核。同時(shí)人口的高流動(dòng)性也為疾病的傳播產(chǎn)生不良影響［3］。本院為了研究不同的支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在涂陰肺結(jié)核診斷中的結(jié)果,選取了部分涂陰肺結(jié)核患者和非肺結(jié)核體檢者分別進(jìn)行不同的檢測(cè)方法診斷,現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年3月～2015年6月本院涂陰肺結(jié)核患者200例作為研究對(duì)象,為涂陰肺結(jié)核組,其中男119例,女81例,年齡23～48歲,平均年齡(34.7±5.8)歲。再選取同期的非肺結(jié)核體檢者45例作為非肺結(jié)核組,其中大葉性肺炎患者19例,間質(zhì)性肺炎患者15例,支氣管擴(kuò)張患者11例；其中男25例,女20例,年齡25～45歲,平均年齡(34.2±5.4)歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2方法 首先對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行標(biāo)本的采集與處理,方法如下：使用日本產(chǎn)的PENTAX EB-1570K型電子支氣管鏡進(jìn)行標(biāo)本采集,術(shù)前按照電子支氣管鏡常規(guī)操作進(jìn)行準(zhǔn)備。所有研究對(duì)象按照病變部位選擇灌洗肺段,將電子支氣管鏡頂端嚴(yán)密插入肺段或肺亞段支氣管開(kāi)口處,將2 ml 2%的利多卡因經(jīng)活檢孔注入灌洗肺段進(jìn)行局部麻醉,然后注入5～10 ml的生理鹽水,立即用專用的回收裝置吸引回收肺泡灌洗液,可重復(fù)灌洗3次,回收15 ml即可。對(duì)于回收的肺泡灌洗液分別進(jìn)行涂片法、培養(yǎng)法以及熒光定量PCR法檢測(cè)。涂片找抗酸桿菌按照中國(guó)防癆協(xié)會(huì)“結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程”操作,每300視野達(dá)到3條抗酸桿菌為陽(yáng)性；結(jié)核菌培養(yǎng)法利用BacT全自動(dòng)分枝桿菌快速培養(yǎng)儀器系統(tǒng)進(jìn)行臨床標(biāo)本的分離與培養(yǎng)；熒光定量PCR檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液結(jié)核分枝桿菌DNA,每毫升DNA基因拷貝數(shù)量＞1×103為陽(yáng)性。

1.3指標(biāo)觀察 觀察并對(duì)比3種不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在涂陰肺結(jié)核及非肺結(jié)核患者診斷中的結(jié)果,分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

涂陰肺結(jié)核組涂片法檢測(cè)的陽(yáng)性率為21.5%,培養(yǎng)法檢測(cè)的陽(yáng)性率為34.0%,熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率為60.5%。涂陰肺結(jié)核組患者的涂片法、培養(yǎng)法以及熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率與非肺結(jié)核組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其中熒光定量PCR檢測(cè)法敏感度高,且假陽(yáng)性低,培養(yǎng)法檢測(cè)的假陽(yáng)性率為0,仍是診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)表1。

表1 兩組應(yīng)用不同檢測(cè)方法結(jié)果比較［n(%)］

3 討論

根據(jù)國(guó)際性的研究數(shù)據(jù)顯示,在全世界范圍內(nèi),結(jié)核是由單一感染性疾病導(dǎo)致死亡的首要原因。因此,為了降低結(jié)核感染導(dǎo)致的死亡率,臨床上應(yīng)該給出肺結(jié)核疾病早期診斷的有效方法。臨床上常用的也是最廣泛應(yīng)用的診斷方法是細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。結(jié)核菌分離培養(yǎng)是確診結(jié)核的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是由于多種因素會(huì)影響痰菌檢查結(jié)果而出現(xiàn)誤差,所以細(xì)菌學(xué)檢測(cè)針對(duì)早期活動(dòng)性肺結(jié)核患者的陽(yáng)性檢出率并不高。本次研究中支氣管肺泡灌洗液直接取材于病灶處支氣管肺泡內(nèi),相對(duì)濃度較高,污染率較低,即使無(wú)痰的患者也可以檢測(cè)［4］。本研究結(jié)果顯示,涂陰肺結(jié)核組涂片法檢測(cè)的陽(yáng)性率為21.5%,培養(yǎng)法檢測(cè)的陽(yáng)性率為34.0%,熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率為60.5%。涂陰肺結(jié)核組患者的涂片法、培養(yǎng)法以及熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率與非肺結(jié)核組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。培養(yǎng)法檢測(cè)的陽(yáng)性率明顯高于涂片法,說(shuō)明培養(yǎng)法這種傳統(tǒng)的檢測(cè)涂陰肺結(jié)核的方法檢出率高于涂片法。熒光定量PCR檢測(cè)的陽(yáng)性率明顯高于培養(yǎng)法,表明熒光定量PCR檢測(cè)的敏感性是3種檢測(cè)方法中最高的,且根據(jù)非肺結(jié)核的檢測(cè)結(jié)果顯示,假陽(yáng)性較低［5］。涂片法、培養(yǎng)法以及熒光定量PCR 3種不同的檢測(cè)方法在臨床應(yīng)用過(guò)程中各具優(yōu)缺點(diǎn)。涂片法的優(yōu)勢(shì)是簡(jiǎn)單、快速和廉價(jià),缺點(diǎn)是敏感性和特異性較低,無(wú)法辨別活菌和死菌。培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)是可鑒別活菌和死菌,靈敏度高于涂片法,為結(jié)核病診斷的金標(biāo)準(zhǔn),缺點(diǎn)是檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)［6］。熒光定量PCR檢測(cè)主要結(jié)合核酸擴(kuò)增、雜交以及廣譜技術(shù),封閉狀態(tài)下檢測(cè),避免了常規(guī)PCR因污染而導(dǎo)致的假陽(yáng)性,靈敏度最高。

綜上所述,涂片法檢測(cè)快速方便,熒光定量PCR檢測(cè)法敏感度高,假陽(yáng)性低,培養(yǎng)法仍是診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn),3種檢測(cè)方法相結(jié)合可提高涂陰肺結(jié)核的診斷率。

［1］晉梅.結(jié)核分枝桿菌快速培養(yǎng)對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值.基層醫(yī)學(xué)論壇,2012,16(5):548-549.

［2］鄭曉靜,張宗德.結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研發(fā)進(jìn)展.臨床肺科雜志,2010,15(11):1607-1609.

［3］龐玉林.灌洗液多種檢測(cè)方法對(duì)菌陰肺結(jié)核的診斷價(jià)值分析.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2013,17(1):60-61.

［4］吳國(guó)蘭,陳曉紅,李學(xué)玲,等.4種不同支氣管肺泡灌洗液結(jié)核桿菌檢測(cè)方法在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用研究.中國(guó)臨床醫(yī)生,2013,41(3):39-41.

［5］李艷英.56份結(jié)核桿菌涂片與培養(yǎng)的對(duì)比分析.臨床肺科雜志,2012,17(5):941-942.

［6］康怡.不同方法檢測(cè)痰和肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌的分析.臨床肺科雜志,2014,19(12):2253-2254.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.06.025

2015-11-17］

519000 珠海市慢性病防治中心