沈昭君，胡曉麗，朱雪瓊

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，浙江 溫州 325027）

·綜 述·

他汀類(lèi)藥物在婦科腫瘤中的應(yīng)用研究進(jìn)展

沈昭君，胡曉麗，朱雪瓊

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，浙江 溫州 325027）

目的：他汀類(lèi)藥物具有調(diào)節(jié)血脂、降低內(nèi)源性膽固醇的作用。近年研究發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物在調(diào)節(jié)血脂的同時(shí)有抗腫瘤的作用。本文就他汀類(lèi)藥物對(duì)婦科腫瘤如子宮肌瘤、宮頸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的影響以及預(yù)防這些婦科腫瘤的發(fā)生發(fā)展、提高化療藥物的療效和改善預(yù)后等方面的研究進(jìn)行綜述。

他汀類(lèi)藥物；婦科腫瘤；綜述文獻(xiàn)

他汀類(lèi)藥物，即羥甲基戊二酰輔酶A（3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A，HMG-CoA）還原酶抑制劑，主要包括阿托伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀等，因其具有調(diào)節(jié)血脂、降低內(nèi)源性膽固醇的作用而被廣泛應(yīng)用于臨床抗動(dòng)脈硬化、降血脂等治療。他汀類(lèi)藥物不僅在心血管領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，近年來(lái)研究[1]表明，他汀類(lèi)藥物在抗腫瘤方面也有獨(dú)特的作用，如食管癌、肝癌、胃癌等。

目前研究發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物對(duì)多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有抑制作用，主要因他汀類(lèi)靶目標(biāo)HMG-CoA還原酶是甲羥戊酸途徑的限速酶，該途徑為類(lèi)異戊二烯化合物包括膽固醇、多萜醇、輔酶Q10等的合 成，類(lèi)異戊二烯、異戊烯基團(tuán)為許多細(xì)胞蛋白質(zhì)（包括Ras和Rho家族成員）翻譯后修飾所必需，故而他汀類(lèi)藥物通過(guò)抑制HMG-CoA還原酶影響Rho家族成員中的Rac和Cdc42的異戊烯化，從而影響其生物學(xué)功能[2]。

此外，他汀類(lèi)藥物作用于HMG-CoA還原酶阻止HMG-CoA轉(zhuǎn)化為甲羥戊酸，阻斷了對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)以及細(xì)胞增殖分化具有重要作用的類(lèi)異戊二烯產(chǎn)物的產(chǎn)生：焦磷酸法尼酯（arnesyl pyrophosphate，F(xiàn)PP）和焦磷酸香葉基香葉酯（geranygeranyl pyrophosphate，GGPP），在抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的同時(shí)，能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，而達(dá)到治療腫瘤的作用[3-4]。目前關(guān)于他汀類(lèi)藥物在婦科腫瘤中應(yīng)用的研究報(bào)道不多，本文就他汀類(lèi)對(duì)婦科腫瘤如子宮肌瘤、宮頸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的影響以及預(yù)防這些婦科腫瘤的發(fā)生發(fā)展、提高化療藥物的療效和改善預(yù)后等方面的進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 抑制婦科腫瘤細(xì)胞增殖

1.1 抑制宮頸癌細(xì)胞增殖 Crescencio等[3]將HPV陽(yáng)性的宮頸癌細(xì)胞Caski、Hela和HPV陰性的宮頸癌細(xì)胞ViBo分別用0、10、20、40、80、160 μmol/L的阿托伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀作用24、48、72 h 后，通過(guò)結(jié)晶紫染色法分析細(xì)胞增殖能力，發(fā)現(xiàn)藥物作用后細(xì)胞增殖能力明顯減弱，并呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴(lài)性。對(duì)各組的細(xì)胞周期進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)：3種細(xì)胞處于G1期和S期的細(xì)胞數(shù)都下降，但未發(fā)現(xiàn)G2/M 期細(xì)胞數(shù)有上升趨勢(shì)。預(yù)先用甲羥戊酸、GGPP或FPP處理3種細(xì)胞2 h后，再經(jīng)他汀類(lèi)藥物作用48 h，細(xì)胞增殖力與單用他汀類(lèi)藥物相比，ViBo細(xì)胞增殖能力完全恢復(fù)，另2種細(xì)胞的增殖力恢復(fù)33.0%。表明他汀類(lèi)藥物抑制宮頸癌細(xì)胞增殖與細(xì)胞內(nèi)甲羥戊酸代謝途徑相關(guān)，3種細(xì)胞處理后增殖能力的差異，可能與他汀類(lèi)藥物對(duì)HPV陰性和陽(yáng)性細(xì)胞的作用途徑不同有關(guān)。

1.2 抑制卵巢癌細(xì)胞增殖 Matsuura等[5]發(fā)現(xiàn)當(dāng)用不同濃度的辛伐他汀（1～10 μmol/L）處理卵巢癌細(xì)胞RMG-1和TOV-21G 48 h后，能明顯抑制細(xì)胞增殖，并呈劑量依賴(lài)性。在10 μmol/L辛伐他汀作用下2種細(xì)胞的增殖率分別降為62.5%和50.7%。在構(gòu)建卵巢癌皮下移植瘤小鼠模型后，對(duì)其腹腔注射辛伐他汀15 mg/（kg·d），發(fā)現(xiàn)對(duì)照組（腹腔注射0.9%氯化鈉溶液）從細(xì)胞接種開(kāi)始至肉眼觀(guān)察到移植瘤約需15 d，而藥物處理組則需25 d；藥物處理組小鼠的90 d生存率達(dá)66.7%，而對(duì)照組生存天數(shù)則都在80 d以?xún)?nèi)，提示辛伐他汀能抑制卵巢癌細(xì)胞增殖生長(zhǎng)并延長(zhǎng)患卵巢癌小鼠的壽命。Scoles等[6]的研究驗(yàn)證了氟伐他汀能抑制卵巢癌細(xì)胞CAOV3和SKOV3的增殖。同時(shí)，氟伐他汀能抑制氧化性低密度脂蛋白促進(jìn)的卵巢癌細(xì)胞的增殖現(xiàn)象。

Kobayashi等[7]通過(guò)構(gòu)建自發(fā)卵巢癌的轉(zhuǎn)基因小鼠模型（Mogp-Tag小鼠）以及卵巢癌移植瘤模型（將SKOV3-IP和OVCAR5卵巢癌細(xì)胞接種于免疫缺陷的小鼠），前者自發(fā)形成卵巢癌后分別喂以50 mg/kg 和100 mg/kg的洛伐他汀5周，后者在接種卵巢癌細(xì)胞的同時(shí)每周腹腔注射12.5 mg/kg洛伐他汀2次，共7周，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中的腫瘤經(jīng)洛伐他汀處理后重量明顯減輕，腫瘤細(xì)胞形態(tài)學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)與正常卵巢細(xì)胞更接近；移植瘤模型的腫瘤組織在用藥7周后，通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Ki-67以及有絲分裂標(biāo)記物，發(fā)現(xiàn)洛伐他汀處理后細(xì)胞增殖分裂能力明顯減弱。提示洛伐他汀組具有抑制卵巢癌細(xì)胞發(fā)生發(fā)展的作用。此外，通過(guò)基因組學(xué)與蛋白質(zhì)組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的卵巢癌細(xì)胞經(jīng)10 μmol/L洛伐他汀處理48 h后，微型染色體修復(fù)蛋白（minichromosome maintenance，MCM）2、7和10的表達(dá)量明顯下降，與甲羥戊酸途徑相關(guān)的HMGCS1和HMGCR基因及其蛋白的表達(dá)均上調(diào)。將甲羥戊酸途徑代謝產(chǎn)物（GGPP、FPP、CoQ10等）單獨(dú)或與洛伐他汀聯(lián)合作用于卵巢癌細(xì)胞，GGPP能逆轉(zhuǎn)洛伐他汀的抑制腫瘤增殖的作用，表明洛伐他汀抗增殖作用與甲羥戊酸途徑相關(guān)。

Knight等[8]通過(guò)基于ATP的生物熒光抗癌藥物敏感性檢測(cè)方法檢測(cè)單用氟伐他汀或與唑來(lái)膦酸（均為甲羥戊酸途徑抑制劑，唑來(lái)膦酸為下游FPP合成酶抑制劑）聯(lián)合作用于22例化療后的卵巢癌細(xì)胞，兩者都有顯著地抗卵巢癌細(xì)胞的作用，聯(lián)合抑制組中50.0%（11/22）的細(xì)胞的抑制率達(dá)到95.0%以上，明顯高于單用氟伐他汀組。將甲羥戊酸途徑代謝產(chǎn)物（甲羥戊酸、FPP、GGPP等）與氟伐他汀一起作用于細(xì)胞，可明顯逆轉(zhuǎn)氟伐他汀對(duì)細(xì)胞的抑制作用，而這一現(xiàn)象在唑來(lái)膦酸組不明顯。提示氟伐他汀通過(guò)甲羥戊酸途徑抑制細(xì)胞增殖。

1.3 抑制子宮肌瘤細(xì)胞增殖 Borahay等[9]將子宮肌瘤細(xì)胞ELT-3分別用不同濃度的辛伐他汀（0.1、1、2、5、10 μmol/L）處理48 h后，發(fā)現(xiàn)10 μmol/L辛伐他汀對(duì)細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。通過(guò)將子宮肌瘤細(xì)胞接種于免疫缺陷小鼠皮下構(gòu)建動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)組小鼠每天喂以辛伐他汀20 μg/kg，在喂養(yǎng)3周和4周時(shí)，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組的移植瘤大小比對(duì)照組（DMSO組）要小37.9%和49.1%，同時(shí)腫瘤中增殖標(biāo)記物Ki-67的表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組。

將不同濃度的辛伐他?。?.1～10 μmol/L）分別處理永生化與原代培養(yǎng)的子宮肌瘤細(xì)胞24、48、72 h，細(xì)胞增殖均被抑制。較低濃度（0.1 μmol/L）的辛伐他汀處理48 h即開(kāi)始抑制細(xì)胞的增殖，而1 μmol/L的辛伐他汀抑制細(xì)胞增殖同時(shí)促進(jìn)了細(xì)胞死亡，該現(xiàn)象在72 h更為明顯，具有劑量和時(shí)間依賴(lài)性。細(xì)胞內(nèi)增殖細(xì)胞核抗原蛋白的表達(dá)也隨辛伐他汀濃度增加而減少。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，辛伐他汀處理細(xì)胞經(jīng)48 h后，雖然細(xì)胞內(nèi)總ERK蛋白保持不變，但磷酸化的ERK蛋白隨辛伐他汀濃度增加而減少，提示辛伐他汀抑制子宮肌瘤細(xì)胞增殖可能與MAPK/ ERK信號(hào)通路相關(guān)[10]。

1.4 抑制乳腺癌細(xì)胞增殖 Kanugula等[11]用不同濃度（0、10、20 μmol/L）的氟伐他汀處理三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231不同時(shí)間（0、6、12、24、36、48 h），發(fā)現(xiàn)氟伐他汀可以抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，并呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性。進(jìn)一步將HMG-CoA途徑中的代謝產(chǎn)物甲羥戊酸與氟伐他汀一同作用于細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)甲羥戊酸能逆轉(zhuǎn)氟伐他汀抑制細(xì)胞增殖的作用。同時(shí)，將GGPP抑制劑單獨(dú)作用于該細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)能產(chǎn)生與氟伐他汀類(lèi)似的抑制細(xì)胞增殖的效果，說(shuō)明氟伐他汀通過(guò)抑制甲羥戊酸途徑來(lái)抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖。

2 促進(jìn)婦科腫瘤細(xì)胞死亡

2.1 促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡壞死 Crescencio等[3]將阿托伐他汀、辛伐他汀或氟伐他汀處理HPV陽(yáng)性的Caski、Hela細(xì)胞和HPV陰性的ViBo細(xì)胞后，通過(guò)流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)，3種細(xì)胞經(jīng)阿托伐他汀與辛伐他汀處理后都有20%～25%的細(xì)胞死亡，而氟伐他汀只對(duì)HPV陰性的ViBo細(xì)胞起作用，細(xì)胞死亡率高達(dá)42%。該細(xì)胞死亡主要以細(xì)胞病理性死亡為主，凋亡次之。進(jìn)一步檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧和亞硝酸鹽的量，發(fā)現(xiàn)經(jīng)他汀處理過(guò)后細(xì)胞內(nèi)這2種物質(zhì)的含量都明顯增加，HPV陰性的ViBo細(xì)胞中活性氧的含量增高較HPV陽(yáng)性細(xì)胞明顯。他汀類(lèi)藥物可以促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞死亡，該作用與提高細(xì)胞氧化應(yīng)激有關(guān)，尤其是對(duì)HPV陰性的癌細(xì)胞。

2.2 促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞凋亡 Liu等[2]通過(guò)構(gòu)建體外卵巢癌三維模型發(fā)現(xiàn)，洛伐他汀對(duì)卵巢癌細(xì)胞具有促進(jìn)凋亡作用。通過(guò)功能蛋白質(zhì)組學(xué)和結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)，發(fā)現(xiàn)多種凋亡相關(guān)蛋白，如Rac、Cdc42、Bim和Caspase-3等蛋白表達(dá)有明顯的變化，其中Rac、Cdc42表達(dá)下調(diào)，而B(niǎo)im、Caspase-3的表達(dá)上調(diào)。將他汀類(lèi)與GGPP聯(lián)合作用，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡率較單用洛伐他汀時(shí)明顯下降，而FPP卻沒(méi)有逆轉(zhuǎn)他汀促凋亡作用，說(shuō)明洛伐他汀導(dǎo)致細(xì)胞凋亡與其阻斷了細(xì)胞的香葉酰香葉酰化作用有關(guān)，而與FPP無(wú)關(guān)。

Martirosyan等[12]經(jīng)3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴鹽試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，20 μmol/L的洛伐他汀處理卵巢癌細(xì)胞（A2780、HOC7、OVCA432等）48 h后，處于G1前期的細(xì)胞數(shù)明顯增多，與細(xì)胞凋亡相關(guān)的腺苷二磷酸核糖聚合酶裂解產(chǎn)物在洛伐他汀組有所增加，提示洛伐他汀有促使卵巢癌細(xì)胞凋亡的作用。細(xì)胞經(jīng)洛伐他汀聯(lián)合甲羥戊酸或GGPP或FPP處理后，細(xì)胞凋亡數(shù)較單用洛伐他汀組明顯下降，提示洛伐他汀抑制卵巢癌細(xì)胞凋亡與甲羥戊酸途徑有關(guān)。Kobayashi等[7]在SKOV3-IP和OVCAR5 2種卵巢癌細(xì)胞中同樣發(fā)現(xiàn)，10 μmol/L的洛伐他汀作用細(xì)胞36 h后，Caspase-3和聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶-1均明顯增加，提示洛伐他汀可以促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的凋亡。

Robinson等[13]發(fā)現(xiàn)卵巢癌細(xì)胞A2780、Ovacr-5、 Ovcar-8在辛伐他汀處理72 h后均表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞凋亡，細(xì)胞內(nèi)Caspase-3和Caspase-7含量均明顯增加，為未加藥物組的2～3倍。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，甲羥戊酸可以逆轉(zhuǎn)辛伐他汀促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，Caspase-3和Caspase-7在甲羥戊酸聯(lián)合辛伐他汀組與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異，表明辛伐他汀促使細(xì)胞凋亡和洛伐他汀一樣是通過(guò)抑制HMG-CoA還原酶。

Kato等[14]發(fā)現(xiàn)卵巢癌細(xì)胞A2780在辛伐他汀與洛伐他汀處理后，通過(guò)免疫印跡法檢測(cè)聚腺苷二磷酸-核糖聚合糖以及流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡作用，隨后通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)凋亡的通路發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)的FLIP蛋白和Caspase-8前體下調(diào)，而活性Caspase-8、活性Caspase-9、胞漿內(nèi)的Bad和細(xì)胞色素C的表達(dá)明顯增加，當(dāng)加入非選擇性的Caspase抑制劑ZVAD-fmk，細(xì)胞活力明顯上升，說(shuō)明他汀類(lèi)促進(jìn)細(xì)胞死亡與凋亡通路的激活相關(guān)。

2.3 促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡 Schointuch等[15]用1～25 μmol/L辛伐他汀處理2種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞ECC-1和Ishikawa，發(fā)現(xiàn)ECC-1細(xì)胞出現(xiàn)早期凋亡，呈劑量依賴(lài)性。隨后，經(jīng)免疫印跡法檢測(cè)Caspase-3、 Bcl-2等與凋亡相關(guān)的蛋白，發(fā)現(xiàn)在2種細(xì)胞系中Caspase-3表達(dá)均明顯上調(diào)，而B(niǎo)cl-2明顯下調(diào)。說(shuō)明辛伐他汀具有促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡的作用。

2.4 促進(jìn)子宮肌瘤細(xì)胞凋亡 Borahay等[9]將子宮肌瘤細(xì)胞ELT-3經(jīng)0.1～10 μmol/L的辛伐他汀處里48 h，接著用Caspase-3與細(xì)胞裂解產(chǎn)物反應(yīng)產(chǎn)生的熒光進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)5 μmol/L和10 μmol/L的辛伐他汀促細(xì)胞凋亡，該作用是通過(guò)阻止細(xì)胞內(nèi)Akt通路上磷酸化蛋白的表達(dá)從而使Bim蛋白表達(dá)增加進(jìn)而啟動(dòng)細(xì)胞凋亡程序，提示辛伐他汀促進(jìn)子宮肌瘤細(xì)胞凋亡與Akt通路有關(guān)。

Borahay等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，即使最低0.1 μmol/L 濃度的辛伐他汀，也可明顯增加子宮肌瘤細(xì)胞內(nèi)Caspase-3的活性，促使細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡與辛伐他汀的劑量成正相關(guān)。辛伐他汀促進(jìn)子宮肌瘤細(xì)胞凋亡與MAPK/ERK信號(hào)通路活性的下調(diào)有關(guān)。此外，通過(guò)檢測(cè)不同濃度辛伐他汀處理子宮肌瘤細(xì)胞5 h，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)鈣離子隨辛伐他汀濃度增加而增加，同時(shí)細(xì)胞凋亡數(shù)也隨之增加，而當(dāng)用鈣離子螯合劑（BAPTA-AM）阻斷鈣通道后發(fā)現(xiàn)線(xiàn)粒體的形態(tài)功能恢復(fù)，Caspase-3活性下降以及細(xì)胞凋亡數(shù)減少。表明辛伐他汀還可通過(guò)上調(diào)鈣通道活性來(lái)促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

2.5 促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞凋亡 Kanugula等[11]用不同濃度（0、2.5、5、10、20 μmol/L）的氟伐他汀分別作用乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231不同時(shí)間（0、6、12、24、 36 h），發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的Caspase-3和Caspase-8酶活性均明顯提高，且呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性，通過(guò)Western blot發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)Caspase-3和Caspase-8蛋白含量也明顯增加，而當(dāng)MDA-MB-231細(xì)胞在甲羥戊酸與氟伐他汀聯(lián)合作用時(shí)細(xì)胞內(nèi)Caspase-3和Caspase-8蛋白卻明顯下降，說(shuō)明氟伐他汀促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞凋亡與甲羥戊酸途徑相關(guān)。沈園園等[16]通過(guò)免疫印跡法分析辛伐他?。?、2、4和8 μmol/L）處理乳腺癌細(xì)胞MCF-7細(xì)胞72 h后細(xì)胞內(nèi)Bcl-2和Bax蛋白水平的變化。免疫印跡結(jié)果顯示，辛伐他汀處理組的Bcl-2蛋白表達(dá)水平低于對(duì)照組，Bax蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，且隨辛伐他汀濃度的增高，Bcl-2蛋白水平逐漸降低，Bax蛋白水平逐漸升高。說(shuō)明辛伐他汀具有促進(jìn)MCF-7細(xì)胞凋亡的作用，且具有濃度依賴(lài)性，其抗腫瘤機(jī)制可能與下調(diào)Bcl-2蛋白和上調(diào)Bax蛋白有關(guān)。

3 抑制婦科腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移

3.1 抑制卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移 Wagner等[17]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)辛伐他汀處理卵巢癌細(xì)胞SKOV-3與原代腹膜間皮細(xì)胞后，與卵巢癌腹腔轉(zhuǎn)移相關(guān)的間皮細(xì)胞上的血管細(xì)胞黏附分子1（vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1）及腫瘤細(xì)胞間的黏附分子（intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1）的表達(dá)較對(duì)照組（DMSO組）明顯下降，提示辛伐他汀可能通過(guò)抑制VCAM-1和ICAM-1的表達(dá)從而減弱卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力及黏附到腹腔間皮細(xì)胞的能力，來(lái)達(dá)到抑制卵巢癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移的作用。

Matsuura等[5]將2種卵巢透明細(xì)胞癌RMG-1和TOV-21G細(xì)胞接種于免疫缺陷小鼠形成移植瘤，與對(duì)照組（0.9%氯化鈉溶液）相比較，辛伐他汀處理組中2種細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的骨橋蛋白的mRNA含量及其在胞膜和胞質(zhì)的熒光強(qiáng)度均明顯下降，提示辛伐他汀可能通過(guò)降低細(xì)胞內(nèi)骨橋蛋白來(lái)減弱卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力。Horiuchi等[18]將轉(zhuǎn)染RhoA的卵巢癌細(xì)胞注入裸鼠腹腔形成卵巢癌移植瘤，再經(jīng)4周洛伐他汀灌胃處理，與對(duì)照組的轉(zhuǎn)移灶個(gè)數(shù)相比，洛伐他汀組的轉(zhuǎn)移灶個(gè)數(shù)明顯減少，表明洛伐他汀能明顯抑制卵巢癌的腹腔轉(zhuǎn)移。

3.2 抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞侵襲 Schointuch等[15]用不同濃度的辛伐他?。?、10、25 μmol/L）處理2種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞ECC-1和Ishikawa 2 h和24 h，經(jīng)層粘連蛋白黏附實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，3種濃度的辛伐他汀處理細(xì)胞2 h后癌細(xì)胞的黏附能力均開(kāi)始明顯下降，處理24 h后癌細(xì)胞的侵襲能力也開(kāi)始明顯減弱，提示辛伐他汀可明顯抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的侵襲能力。

3.3 抑制乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移 Vintonenko等[19]構(gòu)建裸鼠乳腺癌模型，分為腹腔注射15 mg/（kg·d）的氟伐他汀3周的實(shí)驗(yàn)組和注射磷酸鹽緩沖液的對(duì)照組，采用動(dòng)物活體成像技術(shù)，發(fā)現(xiàn)氟伐他汀組裸鼠的熒光強(qiáng)度相比對(duì)照組減少近80%，并且有43%裸鼠體內(nèi)的腫瘤轉(zhuǎn)移灶數(shù)量明顯減少，說(shuō)明氟伐他汀能抑制乳腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

4 對(duì)婦科腫瘤細(xì)胞自噬的影響

Parikh等[20]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)他汀類(lèi)藥物通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)LC3-I I來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。Robinson等[13]表明卵巢癌細(xì)胞經(jīng)辛伐他汀處理后細(xì)胞內(nèi)LC3-I I與p62（衡量反自噬的能力的指標(biāo)）含量都增加，并且在加入抑制自噬作用的菌絲霉素后再加入辛伐他汀，仍能觀(guān)察到自噬現(xiàn)象，提示他汀類(lèi)藥物在啟動(dòng)自噬同時(shí)也有反自噬現(xiàn)象產(chǎn)生。自噬與反自噬現(xiàn)象均在加入甲羥戊酸或GGPP后消失，同時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)與自噬相關(guān)的總Rab7蛋白含量減少，說(shuō)明辛伐他汀所致的卵巢癌細(xì)胞的自噬現(xiàn)象與甲羥戊酸途徑及Rab7蛋白相關(guān)。

結(jié)合體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，Kobayashi等[7]發(fā)現(xiàn)10 μmol/L洛伐他汀作用卵巢癌細(xì)胞OVCAR5和SKOV3-IP 不同時(shí)間（0、6、12、24、36、48 h）后，細(xì)胞內(nèi)LC3的蛋白表達(dá)量均明顯增高。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，在小鼠的卵巢移植瘤用洛伐他汀處理后，LC3A-I I、LC3B-I I、 LC3A、LC3B的mRNA表達(dá)量均較對(duì)照組（0.9%氯化鈉溶液）明顯增加，說(shuō)明他汀類(lèi)藥物能提高卵巢癌細(xì)胞自噬能力。

5 預(yù)防和治療婦科惡性腫瘤

5.1 他汀類(lèi)藥物預(yù)防婦科惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展 Yu 等[21]對(duì)年齡在45～89歲的婦女進(jìn)行隊(duì)列研究，通過(guò)隨訪(fǎng)14年，發(fā)現(xiàn)納入研究的73 336人中568人患子宮內(nèi)膜癌，另外一組納入研究的93 619人中326人患卵巢癌，2組人群中服用一種或多種他汀類(lèi)藥物的平均年限分別為5.6年和5.8年，服用他汀類(lèi)至少1年的人數(shù)為6%和7%。經(jīng)過(guò)多變量分析發(fā)現(xiàn)，服用他汀類(lèi)藥物的人群患子宮內(nèi)膜癌（HR=0.67，95%CI：0.39～1.17）和卵巢癌（HR=0.69，95%CI：0.32～1.49） 的風(fēng)險(xiǎn)均較未服用他汀類(lèi)藥物者低。

Lavie等[22]對(duì)卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌進(jìn)行病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)：患者在未被診斷出患有這2種癌癥之前已服用他汀類(lèi)藥物1年以上的，卵巢癌（OR=0.56）和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生率（OR=0.59）均降低。對(duì)于確診卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌后開(kāi)始服用他汀類(lèi)藥物的患者，卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)（經(jīng)年齡矯正后HR分別為0.47、0.45）也降低。表明了他汀類(lèi)藥物可以預(yù)防卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生，同時(shí)防止卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的復(fù)發(fā)。

Kubatka等[23]通過(guò)腹腔注射50 mg/kg的N-甲基亞硝基脲（從兔子出生第1天到第42天）構(gòu)建兔子乳腺癌模型成功，在兔子出生第35天時(shí)開(kāi)始給予10 mg/（kg·d）的普伐他汀，共15周。發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，普伐他汀組腫瘤平均體積減少58%并且腫瘤的發(fā)生延遲8 d，所誘導(dǎo)腫瘤數(shù)量也減少23%。免疫組織化學(xué)法發(fā)現(xiàn)普伐他汀組的腫瘤細(xì)胞中Caspase-3的表達(dá)量較對(duì)照組升高114%，而ki-67的表達(dá)量減少達(dá)30%以上，提示普伐他汀具有抑制乳腺癌發(fā)生發(fā)展的效應(yīng)。

5.2 他汀類(lèi)藥物提高婦科惡性腫瘤化療的療效

Kato等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，他汀類(lèi)藥物對(duì)體外培養(yǎng)的卵巢癌細(xì)胞系及原代卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)均有抑制作用。聯(lián)合他汀類(lèi)（洛伐他汀或辛伐他汀）與阿霉素、順鉑或紫杉醇共同作用于卵巢癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)原本對(duì)這些化療藥物耐藥的癌細(xì)胞的生長(zhǎng)被明顯抑制，表明他汀類(lèi)藥物與化療藥物聯(lián)合作用，可使化療藥物在較低濃度下即表現(xiàn)出對(duì)細(xì)胞的抑制，還能逆轉(zhuǎn)化療藥物的耐藥性。

Taylor-Harding等[24]發(fā)現(xiàn)，氟伐他汀與順鉑聯(lián)合作用卵巢癌CAOV3細(xì)胞，具有協(xié)同抑制細(xì)胞增殖的作用；兩者聯(lián)合作用引起的早期細(xì)胞凋亡數(shù)分別是兩者單獨(dú)作用時(shí)的1.6倍和2.2倍；停滯于G2/M期癌細(xì)胞數(shù)量增為對(duì)照組的9倍。表明氟伐他汀和順鉑有協(xié)同抗卵巢癌細(xì)胞的作用。

Martirosyan等[12]采用一系列濃度的洛伐他汀與阿霉素聯(lián)合作用多重耐藥的A2780卵巢癌細(xì)胞（A2780ADR），通過(guò)熒光流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)阿霉素含量明顯增加，且呈劑量依賴(lài)性。洛伐他汀與阿霉素聯(lián)合用藥的細(xì)胞凋亡數(shù)是單獨(dú)使用阿霉素的10倍，且在細(xì)胞生長(zhǎng)各個(gè)時(shí)期都可發(fā)現(xiàn)凋亡細(xì)胞，推測(cè)洛伐他汀可能通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)P-gp蛋白抑制細(xì)胞內(nèi)的阿霉素排出細(xì)胞，增加了細(xì)胞內(nèi)阿霉素的含量，同時(shí)增加細(xì)胞凋亡來(lái)提高對(duì)化療藥物阿霉素的敏感性。

Robinson等[13]將辛伐他汀與化療藥物卡鉑或紫杉醇聯(lián)合作用于卵巢癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)將辛伐他汀作用后再將卡鉑作用于癌細(xì)胞所導(dǎo)致的協(xié)同作用最強(qiáng)，抑癌效果最明顯，這也解釋了因高脂血癥之前服用過(guò)他汀類(lèi)藥物的卵巢癌患者化療療效更好的現(xiàn)象。

5.3 他汀類(lèi)藥物改善婦科惡性腫瘤預(yù)后并提高生存率 Elmore等[25]對(duì)患有I I I期及以上級(jí)別的卵巢上皮細(xì)胞癌而采用細(xì)胞減滅術(shù)的卵巢癌患者126例進(jìn)行隨訪(fǎng)，發(fā)現(xiàn)手術(shù)后服用他汀類(lèi)藥物的患者中位腫瘤無(wú)進(jìn)展生存期為24個(gè)月，明顯高于術(shù)后未服用他汀類(lèi)藥物的患者（16個(gè)月）。服用他汀類(lèi)藥物的患者總的生存期為62個(gè)月，也較未服用者的46個(gè)月明顯延長(zhǎng)。因?yàn)榉盟☆?lèi)藥物的患者的年齡、糖尿病發(fā)生率比不服用組要高，因此，采用多變量分析排除年齡、卵巢癌級(jí)別等因素后，仍然發(fā)現(xiàn)他汀類(lèi)藥物的使用是一個(gè)獨(dú)立的預(yù)測(cè)卵巢癌生存期（即預(yù)后）的指標(biāo)。

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（本文編輯：趙翠翠）

R711.74；R711.75

C

10.3969/j.issn.2095-9400.2016.10.018

2016-01-04

溫州市公益性社會(huì)發(fā)展（醫(yī)療衛(wèi)生）科技計(jì)劃項(xiàng)目（2015 Y0551）。

沈昭君（1991-），女，浙江義烏人，碩士生。

朱雪瓊，教授，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，Email：zjwzzxq@ 163.com。