陳長(zhǎng)春，柴妍楠，閆燕，王琪，張曉媛，尹曉娟

(安徽醫(yī)科大學(xué)北京軍區(qū)總醫(yī)院臨床學(xué)院附屬八一兒童醫(yī)院，北京100700)

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缺氧缺血性腦病足月新生兒腦脊液中GFAP水平變化及意義

陳長(zhǎng)春，柴妍楠，閆燕，王琪，張曉媛，尹曉娟

(安徽醫(yī)科大學(xué)北京軍區(qū)總醫(yī)院臨床學(xué)院附屬八一兒童醫(yī)院，北京100700)

摘要：目的觀察缺氧缺血性腦病(HIE)足月新生兒腦脊液中神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP)水平變化，探討其臨床意義。方法 60例HIE足月新生兒根據(jù)病情嚴(yán)重程度分為輕、中、重度組各20例，經(jīng)治療后第21天隨訪，痊愈42例、好轉(zhuǎn)17例、死亡1例。以發(fā)病第1、7、14、21天為研究時(shí)點(diǎn)，用ELISA夾心法測(cè)定各時(shí)點(diǎn)腦脊液中GFAP水平。結(jié)果發(fā)病第1天腦脊液GFAP水平輕度組>中度組>重度組(P均<0.05)，發(fā)病第7、14天腦脊液GFAP水平輕度組<中度組<重度組(P均<0.05)，發(fā)病第21天3組腦脊液GFAP水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。不同預(yù)后患兒發(fā)病第1天腦脊液GFAP水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 足月新生兒HIE發(fā)病后不同時(shí)間及不同嚴(yán)重程度間腦脊液GFAP水平均存在差異，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)可預(yù)測(cè)患兒病情變化及預(yù)后。

關(guān)鍵詞：缺氧缺血性腦病；新生兒；神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)在足月兒的發(fā)病率為1‰～3‰[1]，部分存活患兒可遺留遠(yuǎn)期神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[2，3]。雖然MRI檢查是診斷該病的金標(biāo)準(zhǔn)，但對(duì)HIE早期預(yù)測(cè)的靈敏度有局限性，且不宜早期床邊監(jiān)測(cè)[4]。因不能確定缺氧缺血發(fā)生的準(zhǔn)確時(shí)間、損傷程度和修復(fù)時(shí)相點(diǎn)，迄今為止，尚無有效的治療方法可使腦組織免受損傷。神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP)在星形膠質(zhì)細(xì)胞死亡后釋放到血液中，與神經(jīng)系統(tǒng)損傷及修復(fù)有關(guān)[5，6]。為此，本研究測(cè)定HIE足月新生兒不同時(shí)點(diǎn)腦脊液中GFAP水平變化，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料 選擇2013年1月~2015年1月在本院NICU住院的HIE患兒60例，均符合《實(shí)用新生兒學(xué)》第4版中HIE的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，均足月出生。其中男38例、女22例，胎齡37~42周，出生體質(zhì)量2 520~4 200 g，順產(chǎn)24例、剖宮產(chǎn)36例。根據(jù)文獻(xiàn)[3]分為輕度組、中度組、重度組各20例，3組性別、胎齡等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；純喝朐汉蠼o予相應(yīng)治療，第21天隨訪，痊愈(臨床癥狀消失，體格生長(zhǎng)、體質(zhì)量增長(zhǎng)，新生兒神經(jīng)行為評(píng)分≥35分，振幅整合腦電圖正常，MRI 21時(shí)點(diǎn)正常)42例、好轉(zhuǎn)(臨床癥狀消失，體格生長(zhǎng)、體質(zhì)量增長(zhǎng)，新生兒神經(jīng)行為評(píng)分<35分，振幅整合腦電圖正常，MRI 21時(shí)相點(diǎn)異常)17例、死亡1例(重度組)。本研究經(jīng)北京軍區(qū)總醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象家屬知曉研究目的和實(shí)施過程，并簽署知情同意書。

1.2腦脊液中GFAP檢測(cè)分別于HIE發(fā)病第1(治療前)、7、14、21天參照文獻(xiàn)[7]腦脊液收集與保存方法，常規(guī)消毒鋪巾行腰椎穿刺術(shù)，留取腦脊液1.5 mL，室溫2 000 r/min離心10 min，取上清，以每管50 μL分裝于0.1 mL EP管中，于-80 ℃冰箱中保存。ELISA夾心法測(cè)定腦脊液GFAP。

2結(jié)果

2.1各組不同時(shí)點(diǎn)腦脊液GFAP水平比較發(fā)病第1天腦脊液GFAP水平輕度組>中度組>重度組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；發(fā)病第7、14天，腦脊液GFAP水平輕度組<中度組<重度組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；發(fā)病第21天，3組腦脊液GFAP水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2不同預(yù)后患兒不同時(shí)相點(diǎn)腦脊液GFAP水平比較痊愈、好轉(zhuǎn)的患兒腦脊液GFAP水平均先升高后降低，見表1。發(fā)病第1天,死亡患兒腦脊液GFAP水平為774.58 ng，痊愈、好轉(zhuǎn)患兒腦脊液GFAP水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1　各組不同時(shí)點(diǎn)腦脊液GFAP水平比較

表2　痊愈、好轉(zhuǎn)患兒不同時(shí)相點(diǎn)腦脊液GFAP

注：與好轉(zhuǎn)同時(shí)點(diǎn)比較，*P<0.05；與同組同時(shí)點(diǎn)比較，#P<0.05。

3討論

GFAP在星形膠質(zhì)細(xì)胞死亡后，通過腦脊液循環(huán)于腦室系統(tǒng)與脊髓中，當(dāng)出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病時(shí)，可透過血-腦脊液屏障進(jìn)入循環(huán)中，其作為生化指標(biāo)較為敏感，易于測(cè)量[8]。因此，選擇測(cè)量腦脊液中的GFAP來反映神經(jīng)元的損傷程度以及監(jiān)測(cè)病程變化具有可行性，尤其值得一提的是，由腦損傷誘導(dǎo)表達(dá)的GFAP在神經(jīng)再生和膠質(zhì)細(xì)胞增生功能中也起到了重要作用。已有研究證明，HIE患兒血清GFAP水平相較于無HIE病變的對(duì)照組明顯升高，且GFAP水平越高，新生兒神經(jīng)行為評(píng)分得分越低，因此檢測(cè)血清GFAP可用于判斷HIE患兒的病情程度和預(yù)后[9]。

本研究結(jié)果表明，同一嚴(yán)重程度不同時(shí)相點(diǎn)測(cè)定的GFAP水平不同， GFAP水平呈先上升后下降趨勢(shì)。同一時(shí)相點(diǎn)不同嚴(yán)重程度HIE測(cè)定的腦脊液GFAP水平也不同，發(fā)病第1天為輕度組>中度組>重度組，第7、14天為輕度組<中度組<重度組，第21天，3組之間無顯著性差異。這與不同程度患兒血-腦脊液屏障破壞程度及恢復(fù)時(shí)間不同有關(guān)，即程度越輕血-腦脊液屏障破壞越輕，恢復(fù)時(shí)間越短，因此發(fā)病第1天重度組患兒腦脊液GFAP通過血-腦脊液屏障釋放入血液中，腦脊液GFAP水平降低；第7天輕度組患兒基本痊愈，腦脊液GFAP水平接近正常水平；第14天中度組部分患兒好轉(zhuǎn)，腦脊液GFAP水平較輕度組高，重度組患兒腦脊液GFAP水平恢復(fù)至正常的時(shí)間較長(zhǎng)，腦脊液GFAP水平最高；第21天，三組患兒基本痊愈，GFAP水平接近正常水平。不同預(yù)后患兒腦損傷程度及血-腦脊液屏障破壞程度不同，因此不同預(yù)后患兒發(fā)病第1天GFAP水平存在差異[10]。3組腦脊液GFAP水平在發(fā)病第1~21天均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，中、重度組相較于輕度組更具有規(guī)律性；由于缺氧造成的神經(jīng)元以及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷為細(xì)胞凋亡或遲發(fā)性神經(jīng)元死亡，故此過程持續(xù)且緩慢[11]。即在HIE發(fā)生后，缺氧缺血造成的神經(jīng)細(xì)胞損傷持續(xù)存在一段時(shí)間，這與HIE損傷分為早期損傷、中間潛伏期以及再損傷三個(gè)階段以及“窗口期”治療的理論相符合[12]。在發(fā)病第7~21天，3組腦脊液GFAP水平變化趨勢(shì)相對(duì)穩(wěn)定。發(fā)病第1天腦脊液GFAP水平與HIE預(yù)后有關(guān)，即早期檢測(cè)GFAP既可以對(duì)HIE患兒嚴(yán)重程度進(jìn)行分層，判斷預(yù)后，也對(duì)HIE患兒早期針對(duì)性治療方案的制定具有重要意義。且GFAP為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的特異性蛋白，相較于外周血清，檢測(cè)腦脊液中GFAP的水平能更加準(zhǔn)確地反映神經(jīng)系統(tǒng)在缺氧缺血后的變化特點(diǎn)，因此GFAP可作為HIE早期診治、預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo)。

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(收稿日期：2015-11-23)

中圖分類號(hào)：R722.12

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：1002-266X(2016)09-0060-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.023

通信作者：尹曉娟(E-mail:yyinxiaojuan@163.com)

基金項(xiàng)目：中國博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目(20070410505)。