殷長江，董保忠，杜曉光，張榮偉

(1山東省交通醫(yī)院，濟南250031；2濟南軍區(qū)總醫(yī)院)

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腦膠質(zhì)瘤患者圍術(shù)期腦脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平變化及意義

殷長江1，董保忠1，杜曉光1，張榮偉2

(1山東省交通醫(yī)院，濟南250031；2濟南軍區(qū)總醫(yī)院)

摘要：目的觀察腦膠質(zhì)瘤患者圍術(shù)期腦脊液中肝細胞生長因子(HGF)、肝瘤壞死因子(TNF)α、白細胞介素(IL)17水平變化，探討其臨床意義。方法 選擇腦膠質(zhì)瘤患者42例(觀察組)、體檢健康者19例(對照組)，觀察組分別于術(shù)前1天及術(shù)后第1、3、5天，對照組于體檢時取腦脊液采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測HGF，采用化學發(fā)光免疫分析儀檢測TNF-α、IL-17，分析腫瘤病理分級與三者的關(guān)系。結(jié)果術(shù)前1 d及術(shù)后第1、3、5天觀察組HGF、TNF-α IL-17水平高于對照組(P均<0.05)。觀察組腫瘤病理分級Ⅲ、Ⅳ級患者腦脊液中HGF、IL-17水平高于Ⅰ、Ⅱ級， TNF-α水平低于Ⅰ、Ⅱ級,比較差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。結(jié)論腦膠質(zhì)瘤患者圍術(shù)期腦脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平明顯升高，且腫瘤病理分級越高三者水平越高。

關(guān)鍵詞：腦膠質(zhì)瘤；肝細胞生長因子；腫瘤壞死因子α；白細胞介素17

腦膠質(zhì)瘤是成人中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的惡性腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的45%[1]，其顯著特征是腫瘤細胞的惡性增殖及侵襲性生長，復發(fā)率高、預后差，患者生存期短。目前腦膠質(zhì)瘤的診斷仍靠術(shù)前影像學檢查和術(shù)后的病理檢查。隨著對腦膠質(zhì)瘤生物分子學的深入研究，逐漸認識到細胞因子與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系極為密切。本研究觀察腦膠質(zhì)瘤患者圍術(shù)期腦脊液中肝細胞生長因子(HGF)、腫瘤壞死因子(TNF)α、白細胞介素(IL)17水平變化，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料選取山東省交通醫(yī)院神經(jīng)外科和濟南軍區(qū)總醫(yī)院神經(jīng)外科2013年10月～2015年5月收治的腦膠質(zhì)瘤患者42例(觀察組)，均行顯微鏡下腦膠質(zhì)瘤切除手術(shù),術(shù)后病理檢查確診。其中，男24例、女18例，年齡(43±1.3)歲。術(shù)后腫瘤病理分級：Ⅰ、Ⅱ級22例，Ⅲ、Ⅳ級20例。同期選取體檢健康者19例(對照組)，男11例、女8例，年齡(39±1.6)歲。研究對象均排除年齡>75歲；合并某些系統(tǒng)疾病而無法耐受手術(shù)者；有腰穿禁忌證或不配合行腰穿者。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義。

1.2腦脊液中HGF、TNF-α、IL-17檢測觀察組分別于術(shù)前1 d及術(shù)后第1、3、5天，對照組于體檢時行腰椎穿刺取腦脊液10～15 mL。取5 mL采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測HGF，嚴格按照試劑盒(由深圳晶美生物工程有限公司提供)說明書進行操作。另取5 mL離心(3 000 r/min,15 min)分離后提取上清液，置于-80 ℃下待測。取凍融的腦脊液標本，采用化學發(fā)光免疫分析儀(西門子ADVIA Centaur)檢測TNF-α、IL-17。

2結(jié)果

2.1兩組腦脊液HGF、TNF-α、IL-17水平比較詳見表1。

表1　兩組腦脊液HGF、TNF-α、IL-17水平

注：與對照組比較，*P<0.05。

2.2腦膠質(zhì)瘤不同病理分級患者術(shù)前1天腦脊液HGF、TNF-α、IL-17水平比較腦膠質(zhì)瘤病理分級Ⅰ、Ⅱ 級患者HGF、TNF-α、IL-17水平分別為(1 823.4±331.3)、(15.6±2.4)、(1 096.9±101.2)pg/mL，Ⅲ、Ⅳ級分別為(2 361.7±297.1)、(11.2±2.3)、(1 201.9±91.5)pg/mL；Ⅲ、Ⅳ級患者腦脊液中HGF、IL-17水平高于Ⅰ、Ⅱ級患者，TNF-α水平低于Ⅰ、Ⅱ級患者,比較差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。

3討論

研究證實,HGF通過刺激、激活血管內(nèi)皮細胞從而促進血管的生長[2，3]；通過增加細胞有絲分裂次數(shù)、縮短細胞周期來實現(xiàn)腫瘤細胞的惡性增殖[4]；通過誘導酪氨酸磷酸化和激活整合素以促進腫瘤細胞轉(zhuǎn)移擴散；通過與c-Met特異性結(jié)合激活HGF/c-Met途徑發(fā)揮其他生物學特性，可以上調(diào)尿激酶型纖溶酶原激活物及受體的表達；通過水解細胞外基質(zhì)促進新生血管形成，促進腫瘤的浸潤及擴散。以上表明HGF在腫瘤的生長、侵襲、增殖、轉(zhuǎn)移中起重要作用。研究[5，6]證實，HGF在腦膠質(zhì)瘤中的重要作用及其高表達與膠質(zhì)瘤級別呈正相關(guān)性。本研究結(jié)果與以上理論相符。

TNF-α通過結(jié)合細胞膜調(diào)節(jié)打破細胞酸堿平衡能抑制腫瘤細胞,通過活化磷脂酶而切斷DNA序列，殺死腫瘤細胞[7]；TNF-α還可通過損傷血管內(nèi)皮細胞[8]，從而導致血管損傷，最終引起腫瘤出血壞死；TNF-α作為炎癥因子之一，能夠使白細胞的吞噬能力增強。在機體正常情況下TNF-α的來源主要是免疫細胞，也可來源于腫瘤細胞。TNF-α在人體分布很廣泛，主要存在于外周血循環(huán)系統(tǒng)，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)的小膠質(zhì)細胞、星形細胞也可產(chǎn)生，在腦組織和腦脊液中也能微量表達，在腦膠質(zhì)瘤發(fā)生后需要機體產(chǎn)生免疫應答時，可促進TNF-α大量分泌。研究[9]證實TNF-α通過調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細胞內(nèi)的凋亡基因與抑癌基因的比例，發(fā)揮抗腫瘤作用。本研究結(jié)果與以上結(jié)論相符，觀察組TNF-α水平高于對照組，說明隨著腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生，其水平明顯增高。也有研究[10]指出，過量的TNF-α可以降低人機體的免疫力，減少免疫應答，反而有促腫瘤作用，從而表現(xiàn)為負反饋性的TNF-α降低。本研究中Ⅰ、Ⅱ級膠質(zhì)瘤患者腦脊液中TNF-α水平高于Ⅲ、Ⅳ級，證實荷瘤狀態(tài)的高級別腦膠質(zhì)瘤對TNF-α的抑制。

IL-17為促炎癥因子，表達于胸腺細胞、上皮細胞及血管內(nèi)皮細胞[11]。IL-17可調(diào)節(jié)炎癥反應，作用機制為細胞趨化作用[12~14]。研究發(fā)現(xiàn)[15]，IL-17具有促膠質(zhì)瘤和抗腫瘤免疫的雙重作用。正常人腦膠質(zhì)細胞僅有極微量的IL-17表達，相比血液中高表達，由于腦膠質(zhì)瘤的血-腦脊液屏障的破壞，在IL-17也可滲透到腫瘤中，在正常腦組織、低級別和高級別腦膠質(zhì)瘤中表達依次升高。原因可能為Th17在腦膠質(zhì)瘤中的直接浸潤，促進了IL-17分泌。與本研究結(jié)果相符。

本研究結(jié)果顯示，圍術(shù)期觀察組腦脊液HGF、TNF-α、IL-17水平未發(fā)現(xiàn)明顯規(guī)律性變化，其原因可能是腫瘤切除后仍有大量細胞因子殘留在瘤周組織及腦脊液中；另外術(shù)后炎癥刺激、術(shù)區(qū)水腫也是影響HGF、TNF-α、IL-17分泌的因素，有待于進一步研究證實。

綜上所述，腦膠質(zhì)瘤患者腦脊液中HGF、TNF-α、IL-17水平明顯增高，推測三種細胞因子在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用；對三種細胞因子進行檢測有助于對不同病理級別的膠質(zhì)瘤進行初步診斷。

參考文獻：

[1] 王忠誠.王忠誠神經(jīng)外科學[M].武漢：湖北科學技術(shù)出版社,2004:497-512.

[2] Yong WM, Rha SY, Zhang X, et al. Increments of alpha-dystroglycan expression in liver metastasis correlate with poor survival in gastric cancer[J]. J Surg Oncol, 2009,100(6):459-465.

[3] Furge KA, Zhang YW, Vande Woude GF. Met receptor tyrosine kinase: enhanced signaling through adapter proteins[J]. Oncogene, 2000,19(49):5582-5589.

[4] 楚勝華,馬延斌,馮東福,等.腦膠質(zhì)瘤患者血清中肝細胞生長因子定量測定的臨床意義[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志(電子版), 2010,4(8):1218-1220.

[5] Yun S, Koh JM, Lee KS, et al. Expression of c-MET in Invasive Meningioma[J]. J Pathol Transl Med, 2015,49(1):44-51.

[6] 秦麗娟,薛一雪,谷艷婷,等.腫瘤壞死因子-α在緩激肽開放血腫瘤屏障過程中的作用[J].實用醫(yī)學雜志,2012,28(6):899-902.

[7] 林勇,韓宗超,薛德麟.跨膜型和跨膜穩(wěn)定型腫瘤壞死因子-α對腦膠質(zhì)瘤生長的影響[J].中國臨床神經(jīng)外科雜志,2001,6(3):173-175.

[8] 陳波,陳謙學.顯微鏡下全切或次全切術(shù)治療腦膠質(zhì)瘤的綜合療效及預后影響因素分析[J].疑難病雜志,2015,14(8):793-796,799.

[9] 林勇，張燕，張智峰，等.腫瘤壞死因子-α 的基因表達促進腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡的實驗研究[J].華中科技大學學報(醫(yī)學版)，2002,31(6)：640-643.

[10] 陳進宏，蔡端，張群華.腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體對裸鼠胃癌移植瘤的生長抑制作用與死亡相關(guān)蛋白3的關(guān)系[J].中華實驗外科雜志，2010,23(10)：1215-1217.

[11] 宋偉正,毛伯鏞,毛慶,等.IL-17及IL-17R在人腦膠質(zhì)瘤中的表達[J].中國微侵襲神經(jīng)外科雜志,2010,15(11):515-518.

[12] 鄭鯤鵬,宋輝,樊明德,等.Th17細胞相關(guān)因子在人腦膠質(zhì)瘤中的測定[J].山東大學學報(醫(yī)學版),2012,50(6):87-91.

[13] Thornburg NJ, Shepherd B, Crowe JE. Transforming growth factor beta is a major regulator of human neonatal immune responses following respiratory syncytial virus infection[J]. J Virol, 2010,84(24):12895-12902.

[14] Jie Z, Liang Y, Hou L, et al. Intrahepatic innate lymphoid cells secrete IL-17A and IL-17F that are crucial for T cell priming in viral infection[J]. J Immunol, 2014,192(7):3289-3300.

[15] 蔣偉峰，劉窗溪，高方友.白細胞介素-17及其受體在腦膠質(zhì)瘤中的表達研究進展 [J].臨床神經(jīng)外科雜志，2014，11(3)：156-158.

(收稿日期：2015-11-03)

中圖分類號：R739.41

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)09-0051-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.019