袁向星　房　芳　杜京霖　李帆飛

1.浙江省糧油產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)中心　杭州　310012 2.杭州師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院　杭州　310018

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脫氧雪腐鐮刀菌烯醇污染面粉的水洗去毒

袁向星1房芳1杜京霖1李帆飛2

1.浙江省糧油產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)中心杭州310012 2.杭州師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院杭州310018

摘要脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（嘔吐毒素）多見(jiàn)于我國(guó)長(zhǎng)江中下游地區(qū)生產(chǎn)的小麥籽粒中，累積超標(biāo)后無(wú)法食用，造成經(jīng)濟(jì)損失。本研究旨在通過(guò)簡(jiǎn)單工藝處理使嘔吐毒素超標(biāo)面粉（或小麥），降低嘔吐毒素含量，以期合理的再利用。實(shí)驗(yàn)中將嘔吐毒素含量超標(biāo)面粉經(jīng)揉面、水洗處理后分離成濕面筋和水淀粉，分別脫水、低溫烘干后，用高效液相色譜儀測(cè)其嘔吐毒素含量，勻在1000 μg/kg以下。本方法為被嘔吐毒素污染超標(biāo)的面粉或小麥的重新利用提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞小麥面粉嘔吐毒素谷朊粉淀粉

嘔吐毒素是由小麥赤霉病菌禾谷鐮刀菌復(fù)合群產(chǎn)生的單端孢霉烯族毒素，毒素在小麥籽粒中累積。由于小麥赤霉病的流行，尤其在我國(guó)長(zhǎng)江中下游小麥生產(chǎn)區(qū)以及黃淮部分小麥產(chǎn)區(qū)，導(dǎo)致部分小麥中嘔吐毒素嚴(yán)重超標(biāo)，從而引發(fā)了食品安全問(wèn)題[1]。嘔吐毒素嚴(yán)重超標(biāo)的糧食，只能在監(jiān)督下用作燃料乙醇的生產(chǎn)原料，大大降低了實(shí)用價(jià)值[2]。由于嘔吐毒素對(duì)小麥的污染居鐮刀菌毒素之首，因此我國(guó)制定了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定谷物及制品中嘔吐毒素的含量不得超過(guò)1000 μg/kg[3]。

嘔吐毒素污染小麥后對(duì)人畜具有較大的毒害作用，可以引起厭食、嘔吐、拒食、腹瀉、發(fā)熱、反應(yīng)遲鈍等急性中毒現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)會(huì)破壞造血系統(tǒng)造成死亡[4]。鑒于嘔吐毒素在糧食、飼料和食品中污染的普遍性及其對(duì)人畜健康危害的嚴(yán)重性，如何降低或者去除其含量，減少嘔吐毒素進(jìn)入食物鏈的程度就顯得尤為重要與迫切。

目前關(guān)于糧食中真菌毒素的脫毒已有大量研究[5-12]，脫毒的方法總體上分為物理、化學(xué)和生物三大類，其中物理脫毒法主要有水洗法、剔除法、脫胚去毒法、溶劑提取法、加熱去毒法、輻射法等。多數(shù)方法雖然可以脫去一定量的嘔吐毒素，但由于能耗高、操作復(fù)雜、脫毒不徹底或可能導(dǎo)致二次污染等因素的制約，并沒(méi)有在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中得到推廣應(yīng)用。因此，尋找一種方便、安全、經(jīng)濟(jì)、可行的嘔吐毒素脫毒方法顯得非常重要。本試驗(yàn)采用谷朊粉生產(chǎn)工藝（谷朊粉為面筋粉的商品名），選用嘔吐毒素含量較高的面粉作原料，采用水洗法將面粉中的嘔吐毒素洗去，從而得到嘔吐毒素含量低于1000 μg/kg的谷朊粉和小麥淀粉。

1　材料與方法

試驗(yàn)用儀器：高效液相色譜儀：1100Series型，美國(guó)Agilent公司；氮吹濃縮儀：N-EvapⅢ型，美國(guó)Organomation Associater Jnc公司；針式揉面機(jī)：JHMZ-200型，北京東方孚久恒儀器技術(shù)有限公司；振蕩器：WS-150D型，德國(guó)WIGGENS公司。

嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心購(gòu)買，國(guó)家糧食局科學(xué)研究院定值，濃度為100.7 μg/ml；嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取一定量的嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相稀釋，分別配成相當(dāng)于0.1 μg/ml、0.2 μg/ml、0.5 μg/ml、1.0 μg/ml、2.0 μg/ml、5.0 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

面粉樣品：取自然污染了嘔吐毒素不同程度、不同產(chǎn)地的面粉樣各1kg。

試驗(yàn)方法：取面粉200g于揉面機(jī)中加水100ml，開機(jī)揉面2min，取出面團(tuán)整理后，將面團(tuán)分成4小塊在水中浸泡20min后，在約150ml/min的流水下清洗面團(tuán)（水溫控制在20±5℃），下放準(zhǔn)1.0 mm的鋁篩收集掉落的面筋并用容器收集所有洗落的水淀粉，一般洗滌200g樣品需用水2500ml左右，另選二只樣品延長(zhǎng)水洗時(shí)間，洗滌200g樣品控制用水量在3500ml左右。將洗出的濕面筋用剪刀剪成細(xì)條狀，并將洗出的淀粉沉淀后倒入布袋中除水后在48℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干，粉碎后備用。每個(gè)樣品重復(fù)洗滌一次，二次結(jié)果的平均值為該樣品的最終結(jié)果。

嘔吐毒素測(cè)定：稱取試樣25.00g于250ml的具塞三角瓶中，加入125ml的去離子水，以250 r/min劇烈振蕩20min；靜置5min后用中速定性濾紙過(guò)濾，收集濾液；濾液再用玻璃纖維濾紙進(jìn)行第二次過(guò)濾，收集二次濾液作為上柱用樣品溶液；向免疫親和柱內(nèi)準(zhǔn)確加入樣品溶液2.5ml（相當(dāng)樣品0.5g）待樣品溶液排干后用去離子水洗滌2次，每次10ml，待水排干后向免疫親和柱內(nèi)加入1ml的甲醇洗脫，收集全部洗脫液于干凈的進(jìn)樣瓶中，氮吹濃縮儀在50℃加熱條件下氮?dú)獯蹈?，最后?ml流動(dòng)相復(fù)溶，在旋渦混合器上混勻（此液為0.5g樣品/ml），待高效液相色譜儀測(cè)定嘔吐毒素。

高效液相色譜儀條件色譜柱：C18柱，5 μm，150 mm×4.6 mm；流動(dòng)相：甲醇＋水（20＋80）；流速1.0ml/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：50 μl；出峰時(shí)間：8.2min；檢測(cè)波長(zhǎng)：218nm。

定量測(cè)定：以嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品溶液定量，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品溶液中嘔吐毒素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)。

加標(biāo)回收：向25.00g樣品中準(zhǔn)確加入嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液250 μl，使樣品增加到嘔吐毒素含量1000 μg/kg，然后進(jìn)行樣品的提取、凈化等處理，同時(shí)進(jìn)行樣品空白和試劑空白的測(cè)定。

所有樣品粉碎細(xì)度達(dá)到95%過(guò)20目篩。本試驗(yàn)所有測(cè)定嘔吐毒素樣品的水分含量勻在10%～13%。

2　結(jié)果與分析

嘔吐毒素測(cè)定，試劑空白檢測(cè)結(jié)果為未檢出，加標(biāo)回收在91%～94%。

圖1　面粉經(jīng)水洗分離后嘔吐毒素分布情況

圖1所示各面粉樣品經(jīng)楺面、水洗分離、脫水、低溫干燥、粉碎后嘔吐毒素的分布情況。嘔吐毒素含量3000 μg/kg以下的面粉樣品經(jīng)水洗分離后谷朊粉和淀粉中的嘔吐毒素全都降到1000 μg/kg，雖然嘔吐毒素含量近5000 μg/kg面粉樣品經(jīng)正常水洗分離后淀粉中的嘔吐毒素還有1670 μg/kg，但是增加一次水洗、沉淀后淀粉中的嘔吐毒素可降到200 μg/kg以下。另外增加面團(tuán)水洗的用水量也能明顯提高嘔吐毒素的去除率。

從圖1中可以看出，采用谷朊粉生產(chǎn)工藝去毒法，將面團(tuán)洗成水面筋的過(guò)程中嘔吐毒素去除效果非常明顯。在我國(guó)小麥主產(chǎn)區(qū)都有一定數(shù)量的面粉加工廠和谷朊粉生產(chǎn)廠家，可利用這些廠家的生產(chǎn)設(shè)備，對(duì)被嘔吐毒素污染的小麥或面粉進(jìn)行綜合利用。先由面粉加工廠將嘔吐毒素含量較高（如6000 μg/kg）的小麥加工成生產(chǎn)谷朊粉的原料，小麥經(jīng)研磨后存留在面粉中的嘔吐毒素總量為原來(lái)小麥中的31.03%～50.39%[10]，即1862 μg/kg～3023 μg/kg，這是由于自然污染嘔吐毒素的小麥，因受到各種自然因素影響：有溫度、濕度、通風(fēng)及日照等氣候條件的影響；有抗病性不同的小麥品種的影響；還有不同的赤霉病菌、禾谷鐮刀菌菌株產(chǎn)毒能力不同的影響，從而造成小麥?zhǔn)車I吐毒素污染的“深度”和“廣度”的不同。再由谷朊粉廠用嘔吐毒素含量超標(biāo)的面粉作原料生產(chǎn)出嘔吐毒素含量符合食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的谷朊粉、小麥淀粉。

3　結(jié)論

通過(guò)本試驗(yàn)可以看出：采用谷朊粉生產(chǎn)工藝去除面粉中的嘔吐毒素是非常有效的，在現(xiàn)階段是非?？尚械模矛F(xiàn)有的生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行去毒。雖然面粉通過(guò)去毒后用途發(fā)生了改變，不能作為主糧來(lái)食用，但是合格的谷朊粉和小麥淀粉都可用作食品加工行業(yè)的生產(chǎn)原料。從而使得原本只能用作生產(chǎn)燃料乙醇的原料，通過(guò)水洗去毒加工重新獲得符合食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的小麥制品。對(duì)于我們這樣一個(gè)擁有13億人口的國(guó)家，糧食尤為重要和珍貴，根據(jù)我國(guó)國(guó)情，人口眾多，糧食匱缺，面對(duì)嘔吐毒素超標(biāo)的小麥及面粉棄之浪費(fèi)，食之傷身，本方法為被嘔吐毒素污染超標(biāo)的面粉或小麥的重新利用提供一種方便、安全、經(jīng)濟(jì)、可行的方法。

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中圖分類號(hào)：TS 211.2，TS 211.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1674-5280（2016）03-0028-03

收稿日期：2016-04-20

作者簡(jiǎn)介：袁向星（1958—），男，杭州人，高級(jí)工程師，浙江省糧油產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)中心食品檢測(cè)室主任，研究方向：糧油食品檢測(cè)。