朱 冰，李曉娟，呂 颯，游紹莉，李瑞生

（1.解放軍第302醫(yī)院肝衰竭診療與研究中心，北京 100039；2.解放軍第302醫(yī)院臨床研究管理中心，北京 100039）

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小型豬經(jīng)頸靜脈肝穿刺活檢術(shù)的可行性探討

朱 冰1，李曉娟2，呂 颯1，游紹莉1，李瑞生2

（1.解放軍第302醫(yī)院肝衰竭診療與研究中心，北京 100039；2.解放軍第302醫(yī)院臨床研究管理中心，北京 100039）

【摘要】目的 探討采用美國Cook公司LABS 200肝內(nèi)穿刺活檢針套裝行經(jīng)頸靜脈肝穿刺活檢術(shù)（TJLB）的可行性和安全性。方法 利用影像學(xué)技術(shù)對5只小型豬行TJLB活檢術(shù)，在術(shù)中密切觀察穿刺路徑，并進(jìn)行肝臟組織活檢樣本的采集。結(jié)果 5只小型豬行TJLB術(shù)均成功地采集了肝臟組織的活檢樣本，且無相關(guān)并發(fā)癥，均取得足夠多的肝組織，可以進(jìn)行相關(guān)病理學(xué)的分析。結(jié)論 采用Cook公司LABS 200肝內(nèi)穿刺活檢針套裝在小型豬上行TJLB術(shù)安全可行，為臨床進(jìn)一步的應(yīng)用提供技術(shù)支持。

【關(guān)鍵詞】小型豬；經(jīng)頸靜脈肝穿刺活檢術(shù)；介入放射學(xué)

隨著國內(nèi)外肝臟疾病的日益增多，肝組織活檢在肝臟疾病的診斷和治療中起到非常重要的作用。其中經(jīng)皮肝穿刺活檢技術(shù)（PLB）是目前應(yīng)用較為廣泛的方法，但是對于有大量腹腔積液及嚴(yán)重凝血功能異常的患者，應(yīng)用PLB發(fā)生腹腔內(nèi)出血的風(fēng)險(xiǎn)很高［1，2］。在這種情況下，經(jīng)頸靜脈肝穿刺活檢術(shù)（TJLB）作為一種理想的替代和補(bǔ)充方法應(yīng)運(yùn)而生［3］。雖然TJLB在國外已成為常規(guī)技術(shù)，但由于TJLB的器械一直未正式進(jìn)入國內(nèi)市場，國內(nèi)有關(guān)該方法的臨床應(yīng)用和報(bào)道較少［4］，為了更好地開展臨床應(yīng)用和治療研究，本實(shí)驗(yàn)采用美國 Cook公司LABS 200肝內(nèi)穿刺活檢針套裝對5只小型豬行TJLB，旨在探討和觀察TJLB的安全性和可行性，為今后臨床上開始應(yīng)用TJLB方法提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和支持。

1　材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物及實(shí)驗(yàn)器械

成年健康實(shí)驗(yàn)豬5頭，雄性，體重為40～50 kg，購自北京科宇動物養(yǎng)殖中心許可證號：SCXK（京）2012-0004。Liver Access and Biopsy Needle Set （LABS 200）購自 Cook Medical，速眠新（1.5 mL/支）購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所。本實(shí)驗(yàn)室具有普通級實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（軍）2012-0009。

1.2術(shù)前準(zhǔn)備及麻醉

術(shù)前小型豬需提前禁食禁水8 h，麻醉時(shí)先用速眠新和安定1：1配合，按每公斤體重0.3～0.5 mL肌內(nèi)注射，誘導(dǎo)后再用戊巴比妥鈉按0.2～0.3 mL/ kg靜脈給予，這種麻醉方式更優(yōu)于丙泊酚［5］，同時(shí)觀察小型豬進(jìn)入麻醉后的狀態(tài)，然后用紗布將舌頭置于口側(cè)邊，以防發(fā)生窒息，術(shù)中密切觀察小型豬的呼吸、脈搏，右后肢靜脈保留置針，以便及時(shí)補(bǔ)充麻醉劑以維持其手術(shù)。

1.3穿刺活檢過程

TJLB需要有經(jīng)驗(yàn)的介入科醫(yī)生進(jìn)行操作，首先分離小型豬右側(cè)頸靜脈，以19G穿刺針穿刺右側(cè)頸內(nèi)靜脈，然后引入0.018或0.035導(dǎo)絲，并置入7 cm 長9F血管鞘。透視下，導(dǎo)管導(dǎo)絲配合將導(dǎo)管鞘經(jīng)右心房進(jìn)入下腔靜脈；首先行下腔靜脈DSA造影確認(rèn)無明顯下腔靜脈狹窄，再將導(dǎo)管鞘進(jìn)入肝靜脈，再造影確認(rèn)肝靜脈無明顯狹窄閉塞；將導(dǎo)管鞘頭端進(jìn)一步深入肝右靜脈遠(yuǎn)端、距離下腔靜脈3～4 cm處，經(jīng)鞘引入7F肝穿活檢針，旋轉(zhuǎn)導(dǎo)管鞘頭端指向正下方，開啟活檢槍完成肝實(shí)質(zhì)活檢，并退出活檢針。視獲得肝組織大小決定是否再次獲取肝組織，最后行肝靜脈造影排除明顯異常。

1.4術(shù)后監(jiān)測

TJLB術(shù)后，拔出穿刺針，逐層縫合組織至皮膚，給予抗生素以防發(fā)生感染，密切觀察術(shù)后小型豬的脈搏和呼吸直至麻醉蘇醒，每天觀察小型豬的生活狀態(tài)和傷口愈合情況。

2　結(jié)果

2.1TJLB術(shù)前準(zhǔn)備結(jié)果

5頭小型豬均采用速眠新和安定誘導(dǎo)麻醉，然后用戊巴比妥鈉靜脈麻醉，其麻醉深度恰到好處，并適合行TJLB。逐層分離小型豬皮膚、筋膜，成功分離可見右側(cè)頸靜脈。

2.2TJLB術(shù)在影像學(xué)下觀察的結(jié)果

5頭小型豬經(jīng)Cook公司LABS 200肝內(nèi)穿刺活檢針套裝行TJLB術(shù)，在手術(shù)過程中，穿刺針順利到達(dá)肝臟組織，造影顯示血管均無狹窄（圖1A）。隨后打開活檢針，順利采集肝臟活組織（圖1B）。

圖1　TJLB術(shù)中觀察結(jié)果Note.A：Access to the right hepatic vein. B：Opening the biopsy gun to take liver tissueFig.1 The results of intraoperative observation in TJLB

2.3TJLB術(shù)后肝組織病理結(jié)果和小型豬術(shù)后觀察結(jié)果

TJLB術(shù)后將5頭小型豬成功采集到的肝組織進(jìn)行了病理組織學(xué)分析，結(jié)果顯示為正常肝臟病理學(xué)結(jié)果：肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝索排列規(guī)則且以中心靜脈放射排列，肝細(xì)胞未見任何異常。TJLB術(shù)后采用逐層縫合，同時(shí)給予一定的抗生素以防感染。小型豬于術(shù)后第2天已全部恢復(fù)，并能正常行走和采食，生長狀態(tài)良好，無任何不良反應(yīng)，其傷口愈合好未見感染。

3　討論

肝組織病理活檢是肝臟病變診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，在肝臟疾病的診斷和治療中起到非常關(guān)鍵性的作用，對疾病診斷、分級、分期、療效判定及預(yù)后都有十分重要的參考價(jià)值［6］。臨床上獲取肝臟組織的方法非常多，主要有開腹肝活檢、經(jīng)腹腔鏡肝穿刺活檢、PLB和TJLB等等［7］，而PLB因其簡單易行、費(fèi)用低廉普遍公認(rèn)為首選的方法，但患者如果伴有凝血障礙或中重度腹水、重度肥胖、肝臟萎縮等并發(fā)癥，采取PLB方法會出現(xiàn)出血的風(fēng)險(xiǎn)［8］，因此目前一致建議對此類患者可行TJLB術(shù)。雖然TJLB較PLB操作復(fù)雜，還需要訓(xùn)練有素的醫(yī)務(wù)人員，花費(fèi)時(shí)間長，費(fèi)用高，但對于上述一些特殊患者來說卻是一種更安全的替代技術(shù)，可減少患者發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的可能性，成功獲得肝組織進(jìn)行病理學(xué)診斷以確定下一步的治療方案［9］。另外，經(jīng)頸靜脈進(jìn)行肝組織活檢還可以進(jìn)行肝靜脈造影，測量肝靜脈壓力以及肝靜脈楔壓等指標(biāo)［10］。

國內(nèi)有關(guān)TJLB的報(bào)道較少，羅澤龍等［4］報(bào)道了采用美國Cook公司LABS 100肝內(nèi)穿刺活檢針套裝對12例患者行TJLB證實(shí)其安全可行。而本實(shí)驗(yàn)采用美國Cook公司新一代的LABS 200產(chǎn)品在影像學(xué)技術(shù)的配合下對5只小型豬進(jìn)行肝內(nèi)穿刺活檢針套裝實(shí)驗(yàn)，在穿刺過程中，需要注意穿刺針的尖端不要太接近肝被膜，因此本實(shí)驗(yàn)選擇了小型豬的肝右靜脈能夠更好地控制穿刺針尖端與肝被膜的距離確保安全。臨床上常推薦進(jìn)行3次肝活檢，但是2次肝活檢就足夠滿足臨床實(shí)驗(yàn)診斷［11］，而選擇2次還是3次肝活檢取決于介入放射醫(yī)生觀察前兩次標(biāo)本大小及碎片程度，來決定是否再取1次，標(biāo)本的長度至少要1 cm［12］。本實(shí)驗(yàn)由于是在探討TJLB的可行性，因此對小型豬成功地采集了3次肝組織，采集的肝臟組織需要進(jìn)行不同的染色來診斷疾病，有報(bào)道稱最少需要6組匯管區(qū)對急慢性肝病進(jìn)行診斷并分級［13］，本實(shí)驗(yàn)為健康的小型豬，因此采用了普通的HE染色來觀察肝臟組織的變化［14，15］，結(jié)果均呈現(xiàn)正常肝組織的病理狀態(tài)。小型豬術(shù)后恢復(fù)良好，第2天可以行走和采食，傷口愈合良好無任何并發(fā)癥出現(xiàn)，說明對小型豬行TJLB術(shù)是成功的、安全可行的。

因此，本實(shí)驗(yàn)在影像學(xué)技術(shù)的配合下采用美國Cook公司LABS 200肝內(nèi)穿刺活檢針套裝對小型豬行TJLB術(shù)是成功的，說明TJLB術(shù)在小型豬上具有一定的可行性，這也將為此技術(shù)可以放心地應(yīng)用于臨床治療和診斷當(dāng)中提供了科學(xué)而又堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支持。

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〔修回日期〕2015-12-16

Feasibility of transjugular liver biopsy in minipigs

ZHU Bing1，LI Xiao-juan2，LV SA1，YOU Shao-li1，LI Rui-sheng2
（1.Liver Failure Treatment and Research Center，302 Hospital of PLA，Beijing 100039，China. 2.Research Center for Clinical Medicine，302 Hospital of PLA，Beijing 100039，China）

【Abstract】Objective To evaluate the feasibility and safety of transjugular liver biopsy（TJLB）by using the LABS 200 liver access and biopsy set（Cook Inc，USA）.Methods Five minipigs were operated though TJLB puncture under the imaging guidance.The liver biopsies were analyzed by histological examination.Results Technical success of TJLB was achieved in all the 5 minipigs.No procedure-related complications occurred，and sufficient amount of specimen for histological examination was obtained in all cases.Conclusions Our preliminary results indicate that transjugular liver biopsy with the use of Cook LABS 200 liver access and biopsy set is clinically safe and feasible，and provide technical support for its clinical application.

【Key words】Minipig；Transjugular liver biopsy；Interventional radiology

【中圖分類號】R-33

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1671-7856（2016）04-0072-03

doi：10.3969.j.issn.1671-7856.2016.04.013

［基金項(xiàng)目］北京市科委計(jì)劃課題項(xiàng)目（Z141100002114038）和院內(nèi)課題項(xiàng)目（YNKT007）。

［作者簡介］朱冰（1979-），男，博士，主治醫(yī)師，E-mail：zhubing302@163.com；李曉娟（1980-），女，碩士；并列第一作者。

［通訊作者］游紹莉（1972-）女，碩士，主任醫(yī)師，主要從事臨床肝病方面研究；李瑞生（1969-），男，博士，副研究員，主要從事人類疾病動物模型研究，E-mail：lrsheng@sohu.com。