劉　欣，?；勖簦摺?，焦榮紅，張海霞

(1. 河北省人民醫(yī)院，河北 石家莊 050051；2. 解放軍260醫(yī)院，河北 石家莊 050041)

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莪術油對動脈粥樣硬化大鼠血脂和炎性因子的影響

劉欣1，牛慧敏1，高潔1，焦榮紅1，張海霞2

(1. 河北省人民醫(yī)院，河北 石家莊 050051；2. 解放軍260醫(yī)院，河北 石家莊 050041)

[摘要]目的觀察莪術油對動脈粥樣硬化大鼠血脂指標及炎性因子白細胞介素-2(IL-2)、高敏C反應蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響。方法應用高脂喂養(yǎng)法建立Wistar大鼠動脈粥樣硬化模型。將造模成功大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組25只。實驗組給予莪術油葡萄糖注射液40 mg/kg腹腔注射，對照組給予等量5%葡萄糖注射液腹腔注射，均1次/d，共2周。實驗結束后處死大鼠，檢測2組大鼠血脂及炎性因子水平。結果實驗組大鼠血TC、TG、LDL-C及IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對照組(P均<0.05)，而HDL-C水平明顯高于對照組(P<0.05)。結論莪術油可改善動脈硬化大鼠血脂水平，并能降低血清炎癥因子水平，為用于動脈粥樣硬化的治療提供了實驗依據。

[關鍵詞]動脈粥樣硬化；動物模型；莪術油；血脂指標；炎性因子

動脈粥樣硬化是許多疾病的病理基礎，可導致冠心病、動脈硬化閉塞等多種疾病。近年來隨著社會進步和人民生活水平的不斷提高，動脈粥樣硬化的發(fā)生率也逐漸升高。目前認為有效改善動脈粥樣硬化是治療多種疾病的基礎，相關藥物的研究應用是該領域的熱點，并已取得許多成果。但迄今為止對動脈粥樣硬化的治療效果還有待進一步提高。植物類藥物由于其作用溫和、不良反應少而受到關注。莪術油是多年生草本植物莪術的提取物，具有消炎、抗病毒、抑制腫瘤、修復血管損傷等功效[1-2]，但該藥是否對動脈粥樣硬化有效報道少見。故本研究觀察了莪術油對動脈粥樣硬化大鼠模型血脂及相關炎性因子的影響，旨在為其用于動脈粥樣硬化的治療提供實驗依據。

1實驗資料

1.1動物雄性Wistar大鼠55只，體質量180～200(192±24.36)g。動物購自河北醫(yī)科大學動物中心，生產許可證號:SCXK(冀)2003-1-003。大鼠在本院動物室進行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)過程中注意保持籠具及環(huán)境衛(wèi)生，每天更換水、飼料及墊料，每周消毒2次，注意保持室內濕度大于40%。

1.2主要藥物、試劑莪術油葡萄糖注射液(商品名：杜迪，黑龍江科倫制藥有限公司,國藥準字H23020037)；TC、TG、LDL-C、HDL-C檢測試劑為日本和光純堯工業(yè)株式會社生產; 高敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑由DiaSys Diagnostic Systems GmbH提供，批號：60094955；白細胞介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒為美國Sigma公司生產。

1.3實驗方法

1.3.1Wistar大鼠動脈粥樣硬化模型的建立所有Wistar大鼠在常規(guī)條件下飼養(yǎng)，按文獻[3]方法給予動物高脂飼料建立動脈硬化模型。高脂飼料成分：3%膽固醇、0.5%膽酸鈉、0.2%丙硫氧嘧啶、5%白糖、10%豬油、81.3%基礎飼料。基礎飼料購自河北醫(yī)科大學動物中心，高脂飼料由本課題組配制。在造模開始時一次性腹腔注射維生素D 360萬IU/kg。飼養(yǎng)8周后隨機處死5只大鼠用于證實動脈粥樣硬化模型是否制備成功。

1.3.2動物分組及給藥方法將剩余50只建模成功后的Wistar大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組25只。實驗組給予莪術油葡萄糖注射液40 mg/kg腹腔注射，對照組給予等量5%葡萄糖注射液腹腔注射，均1次/d，共2周。實驗結束后普通飲食喂養(yǎng)3 d后檢測相應指標。

1.3.3血脂水平檢測留取大鼠血清2 mL，采用7600-020全自動生化分析儀(日本日立公司)檢測TC、TG 、LDL-C、HDL-C水平。

1.3.4血清hs-CRP水平檢測留取大鼠血清2 mL，用AU680全自動生化分析儀(美國Beckman公司)測定hs-CRP水平，檢測范圍為0～350 mg/L。

1.3.5血清IL-2、TNF-α水平檢測留取大鼠血清2 mL，應用ELISA法檢測IL-2、TNF-α水平，實驗操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行，在美國寶特Multiskan FC全自動酶免分析儀450 nm處測吸光值。IL-2檢測范圍為100～1 800 ng/L，批內差異<9%，批間差異<15%。TNF-α檢測范圍為10～360 ng/L，批內差異及批間差異均<10%。

2結果

2.1大鼠動脈粥樣硬化模型鏡下表現飼養(yǎng)8周后，應用掃描電鏡及MOVAT染色觀察發(fā)現大鼠動脈壁均出現硬化，腔內有脂質斑塊沉積，證實造模成功。見圖1及圖2。

圖1　動脈粥樣硬化大鼠動脈掃描電鏡表現(×4 000)

2.22組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較實驗組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均明顯低于對照組(P均<0.05)，血清HDL-C水平明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

圖2　動脈粥樣硬化大鼠動脈MOVAT染色表現(×400)表1　2組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較

組別nTCTGLDL-CHDL-C實驗組252.97±0.640.35±0.101.69±0.411.21±0.38對照組254.03±0.980.97±0.192.74±0.660.86±0.17t-4.528-14.438-6.7574.204P<0.001<0.001<0.001<0.001

2.32組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平比較實驗組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對照組(P均<0.05)。見表2。

表2　2組血清IL-2、hs-CRP、TNF-α水平比較

3討論

近年來我國冠心病、頸動脈狹窄、腦梗死等疾病的發(fā)生率不斷上升，嚴重威脅著人們健康。這些疾病的共同病理基礎為動脈粥樣硬化，如能減輕動脈粥樣硬化，則可緩解上述疾病病情。目前研究發(fā)現，動脈粥樣硬化的發(fā)生與高血脂癥、炎癥反應密切相關[4-5]。因此，降脂和抗炎對減輕動脈粥樣硬化有重要作用。

TC指血液中所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯，在動脈粥樣硬化時TC水平明顯升高[6]。TG是3分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，作為血液中的一種脂肪類物質，大部分是從飲食中獲得，該指標在動脈粥樣硬化時也明顯升高[7]。LDL-C是富含膽固醇的脂蛋白，其膽固醇主要來自高密度脂蛋白中的膽固醇，其升高也是反映動脈粥樣硬化的重要指標之一[8]。HDL-C為血清蛋白之一，富含磷脂質，在生理上起著將肝外組織的膽固醇運送到肝臟的運載工具作用，因而可以防止游離膽固醇在肝外組織細胞上的沉積，該指標在冠心病等疾病時水平降低[9]。

IL-2是白細胞介素家族研究最為深入的成員，主要由T細胞產生，以自分泌和旁分泌方式發(fā)揮效應，其能夠活化T細胞，刺激NK細胞增殖，增強NK細胞殺傷活性及產生細胞因子。在炎性反應時，IL-2水平明顯升高[10]。hs-CRP與傳統(tǒng)的CRP相比具有更高的靈敏度，可以更為準確地反映機體的應激情況[11]。TNF-α由巨噬細胞產生，對機體免疫功能具有調節(jié)作用，可促進T細胞及其他殺傷細胞的功能，在應激狀態(tài)下也明顯升高[12]。

莪術為姜科姜黃屬多年生宿根草本植物，該藥味辛、苦、溫，歸肝、脾經，具有行氣止痛、積散結、破血祛瘀等作用。莪術油是莪術中的提取物，具有消炎、抗病毒、抗氧化、抑制腫瘤、修復血管損傷、治療肝纖維化、活血化瘀等多種作用，已在多種疾病的治療中取得了顯著效果[13-14]。但關于莪術油對血脂和炎性因子的影響報道尚不多見。

本研究結果顯示，實驗組大鼠血清TC、TG、LDL-C及IL-2、hs-CRP、TNF-α水平均明顯低于對照組，而HDL-C水平則明顯高于對照組。說明莪術油可調節(jié)血脂水平，有可能減輕硬化動脈壁上脂質沉積的程度；可減輕動脈粥樣硬化的炎癥反應，對動脈粥樣硬化的綜合治療有益。

綜上所述，莪術油可調節(jié)動脈粥樣硬化大鼠血脂及炎性因子水平，但本研究內容較為簡單，僅就莪術油對血清指標的影響進行了分析，距全面闡明莪術油對動脈粥樣硬化的效果及機制仍有較大距離，尚需進一步對莪術油的作用進行綜合評價，最終確定莪術油能否作為動脈粥樣硬化治療的新藥物應用于臨床。

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Effect of Zedoray Turmeric Oil on serum lipid and inflammatory factors in rats with atherosclerosis

LIU Xin1, NIU Huimin1, GAO Jie1, QIAO Ronghong1, ZHANG Haixia2

(1. Hebei General Hospital，Shijiazhuang 050051，Hebei，China; 2. The 260th Hospital of PLA, Shijiazhuang 050041，Hebei, China)

Abstract:Objective It is to observe the effect of Zedoray Turmeric Oil on serum lipids(TC, TG, LDL-C, HDL-C) and inflammatory factors(IL-2, hs-CRP, TNF-α) in rats with atherosclerosis. Methods The models of rats with atherosclerosis were established with high-fat diet. The models were divided into experimental group and control group randomly, and there were 25 rats in each group. The rats in experimental group were given Zedoary Turmeric Oil and Glucose Injection(40 mg/kg) by intraperitoneal injection once per day and treated for 2 weeks, and the ones in control group were treated with the same dosage of 5% glucose injection. At the end of experiment, the rats were executed to detect serum lipids(TC, TG, LDL-C, HDL-C) and inflammatory factors(IL-2, hs-CRP, TNF-α) in both groups. Results The levels of serum TC, TG, LDL-C, IL-2, hs-CRP, TNF-α were all lower, whereas the level of serum HDL-C was higher in experimental group than those in control group (P<0.05). Conclusion Zedoray Turmeric Oil could improve the serum lipids and decrease inflammatory factors in rats with atherosclerosis effectively, which provided some experimental evidences for the treatment of atherosclerosis.

Key words:atherosclerosis; animal model; Zedoray Turmeric Oil; serum lipids; inflammatory factors

[作者簡介]劉欣，男，副主任醫(yī)師，主要從事動脈粥樣硬化性疾病的影像學診斷及研究。 [通信作者]張海霞，E-mail:765894882@qq.com

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.20.006

[中圖分類號]R-332

[文獻標識碼]A

[文章編號]1008-8849(2016)20-2183-03

[收稿日期]2016-01-05