趙品，林婉玲，郝淑賢*，李來好，楊賢慶

1(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所，國(guó)家水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)中心，農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州，510300)　2(上海海洋大學(xué)，上海，201306)

?

響應(yīng)面法優(yōu)化糟醉鱘魚濕腌工藝

趙品1,2，林婉玲1，郝淑賢1*，李來好1，楊賢慶1

1(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所，國(guó)家水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)中心，農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州，510300)2(上海海洋大學(xué)，上海，201306)

摘要采用響應(yīng)面法優(yōu)化研究糟醉西伯利亞鱘魚(A.baerii)的濕腌工藝。通過單因素實(shí)驗(yàn)研究食鹽添加量、腌制時(shí)間和腌制溫度對(duì)魚肉品質(zhì)的影響，根據(jù)響應(yīng)面中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，建立感官評(píng)定的三元二次回歸方程。通過分析等高線圖和響應(yīng)面圖得到回歸方程的決定性系數(shù)為0.974，說明模型能夠代替真實(shí)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)對(duì)感官評(píng)價(jià)得分進(jìn)行預(yù)測(cè)。響應(yīng)面結(jié)果表明：鹽水濃度對(duì)魚肉品質(zhì)的影響最為顯著，腌制溫度為10 ℃，腌制時(shí)間為10.5 h，鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14%時(shí)，糟醉鱘魚產(chǎn)品品質(zhì)較佳，感官評(píng)分值最高，為90分，與模型預(yù)測(cè)值基本相符。

關(guān)鍵詞鱘魚；腌制溫度；腌制時(shí)間；鹽水濃度；響應(yīng)面；感官評(píng)價(jià)

鱘魚(Acipenser)是目前世界上現(xiàn)存魚類中壽命最長(zhǎng)、體型最大的魚類。鱘魚全身是寶，魚皮可用于制備明膠；魚籽蛋白含量高[1]，富含礦物質(zhì)和不飽和脂肪酸[2]，鱘魚籽醬為歐洲達(dá)官貴族顯示身份的象征；鱘魚通體為軟骨，內(nèi)含的硫酸軟骨素具有抗凝、抗癌及降低心肌耗氧量、促進(jìn)冠狀動(dòng)脈循環(huán)、抗凝血和防止血管硬化等作用[3]。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)鱘魚的研究主要集中在鱘魚的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分析[4]、蛋白粉制備[5-7]和硫酸軟骨素的提取[8]等方面。相對(duì)而言，鱘魚肉的加工研究還較少。

酒糟魚，又稱醉魚，是我國(guó)南方地區(qū)的傳統(tǒng)風(fēng)味食品，深受消費(fèi)者的喜愛。酒糟魚主要經(jīng)鹽腌、干燥、糟制和再干燥等工序加工而成。鹽腌是影響產(chǎn)品品質(zhì)的重要工序之一，目前常用的鹽腌方法有干腌法、濕腌法和混合腌制法。高娟[9]等研究了草魚干腌工藝，得出腌制溫度為9.3 ℃，腌制時(shí)間6 d，腌制液濃度為11.7%時(shí)，所得臘魚感官評(píng)分值與模型預(yù)測(cè)基本相符；張群飛等[10]研究了糟醉帶魚的濕腌工藝，得出濕腌時(shí)，鹽水濃度對(duì)產(chǎn)品品質(zhì)的影響最為顯著；律佳雪等[11]研究了風(fēng)味醉魚生產(chǎn)過程中研制條件的優(yōu)化，建立了不同腌制條件下產(chǎn)品的感官評(píng)價(jià)結(jié)果與測(cè)定指標(biāo)之間的多元回歸模型；MUNASINGHE等[12]研究了不同鹽水濃度對(duì)魚肉蛋白提取率的影響。本文以鱘魚魚肉為原料，以鹽腌時(shí)鱘魚肉中鹽含量，魚肉脫水失重率以及鹽鹵中可溶性蛋白含量和氨基酸態(tài)氮含量為指標(biāo)，建立感官評(píng)定與考察指標(biāo)之間的數(shù)學(xué)模型。

1材料與方法

1.1材料

西伯利亞鱘魚(A.baerii)，杭州千島湖鱘龍科技股份有限公司；AgNO3、稀HNO3、甲醛、NaOH等均為分析純；考馬斯亮蘭，南京建成生物工程研究所；食鹽等購(gòu)于廣州市海珠區(qū)華潤(rùn)萬家超市。

1.2儀器與設(shè)備

3-550A高溫馬弗爐，美國(guó)Ney VULCAN；809 Titrando自動(dòng)電位滴定儀，瑞士Metrohm；電子分析天平；DHG-9145A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司；MIR254低溫恒溫培養(yǎng)箱，日本SANYO。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1氨基酸態(tài)氮

中性甲醛[13]電位滴定法。

1.3.2氯化鈉含量的測(cè)定

依據(jù)SC/T3011—2001[14]方法測(cè)定。

1.3.3魚肉增重率

η=(m-m0)/m0

(1)

式中：m0，魚塊初始質(zhì)量，g；m，魚塊腌制一定時(shí)間后的質(zhì)量，g；η，魚肉增重率，%。

1.3.4樣品制作方法

將鱘魚去皮、去內(nèi)臟、去頭后，清洗干凈，切成5 cm×4 cm×2 cm的塊狀，以魚水比1∶2(g∶mL)放入盛有一定濃度的食鹽水的燒杯中，用保鮮膜封口，轉(zhuǎn)移到低溫恒溫培養(yǎng)箱中腌制。

1.3.5感官評(píng)定

將在不同條件下腌制好的鱘魚魚塊經(jīng)過干燥和真空糟制工藝制成產(chǎn)品。感官評(píng)定小組由10名具有感官評(píng)定經(jīng)驗(yàn)的成員組成，對(duì)產(chǎn)品的滋味、色澤、酒香味、口感等4個(gè)方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)總分為100分，評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1　糟醉鱘魚感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.6數(shù)據(jù)處理

采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理。所有樣品均做3次平行，測(cè)定結(jié)果以(均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差)表示。采用Design-Expert 8.0.6軟件進(jìn)行響應(yīng)面分析[15]。

2結(jié)果與分析

2.1糟醉鱘魚濕腌條件的單因素實(shí)驗(yàn)

以魚肉NaCl含量和魚肉增重率以及鹽鹵中氨基態(tài)氮含量為指標(biāo)，分別考察鹽水濃度、腌制時(shí)間和腌制溫度對(duì)各項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)和產(chǎn)品品質(zhì)的影響。

2.1.1鹽水濃度對(duì)魚肉和鹽鹵成分的影響

將鱘魚魚塊在腌制時(shí)間為10 h、腌制溫度為10 ℃的條件下制作成咸魚肉，考察不同鹽水濃度對(duì)魚肉和鹽鹵成分的影響，結(jié)果見圖1。

從圖1中可以看出，隨著鹽水濃度的提高，魚肉中NaCl含量增高，而鹽鹵中氨基酸態(tài)氮的含量和魚肉增重率下降。魚肉在腌制時(shí)，溶液中的鹽逐漸滲入魚肉中，魚肉中的水分逐漸滲出，魚肉鹽含量的提高、脫水程度與滲透液的濃度有關(guān)[16]。在低鹽水濃度下，魚肉水分滲出的量低于鹽分滲入魚肉的量，總體表現(xiàn)為魚肉增重，在高鹽水濃度下，魚肉水分滲出的量高于鹽分滲入魚肉的量，總體表現(xiàn)為魚肉失重[17]。此外，腌制時(shí)，魚肉中的蛋白等營(yíng)養(yǎng)成分流失[18]，造成鹽鹵中氨基態(tài)氮含量的升高，這與圖1中各指標(biāo)的變化規(guī)律相符。為控制魚肉營(yíng)養(yǎng)成分的析出，應(yīng)盡可能的控制鹽鹵中氨基態(tài)氮的含量，同時(shí)保持魚肉中適宜的氯化鈉含量和較低的魚肉增重率。鹽水濃度為15%的試驗(yàn)結(jié)果與濃度為20%的試驗(yàn)結(jié)果很接近，因此，以15%的鹽水濃度為宜。

圖1　鹽水濃度對(duì)鱘魚肉和鹽鹵成分的影響Fig.1　Effects of concentration of brine on the composition of sturgeon and brine

2.1.2腌制溫度對(duì)魚肉和鹽鹵成分的影響

將鱘魚肉在鹽水質(zhì)量濃度為15%、腌制時(shí)間為10 h的條件下制作成咸魚肉，考察不同腌制溫度對(duì)魚肉和鹽鹵成分的影響，結(jié)果見圖2。由圖2可知，隨著腌制溫度的提高，魚肉中鹽分增加，魚肉增重率增加，鹽鹵中氨基態(tài)氮含量增加。在鹽水質(zhì)量濃度為15%、腌制10 h時(shí)，5 ℃和10 ℃的試驗(yàn)結(jié)果比較接近，考慮到生產(chǎn)能耗的問題，故腌制溫度為10 ℃較適宜。

圖2　腌制溫度對(duì)鱘魚肉和鹽鹵成分的影響Fig.2　Effects of curing temperature on the composition of sturgeon and brine

2.1.3腌制時(shí)間對(duì)魚肉和鹽鹵成分的影響

將鱘魚魚肉在鹽水質(zhì)量濃度為15%，腌制溫度為10 ℃的條件下制作成咸魚肉，考察不同腌制時(shí)間對(duì)魚肉品質(zhì)和鹽鹵成分的影響。結(jié)果見圖3。

圖3　腌制時(shí)間對(duì)鱘魚肉和鹽鹵成分的影響Fig.3　Effects of curing time on the composition of sturgeon and brine

由圖3可知，腌制時(shí)間與魚肉增重率、鹽含量和鹽鹵中氨基態(tài)氮含量呈正相關(guān)。腌制超過10 h后，魚肉增重率和鹽鹵中氨基態(tài)氮含量均增高，不利于產(chǎn)品的品質(zhì)。而腌制時(shí)間過短，魚肉鹽度較低，不利于產(chǎn)品的感官品質(zhì)，因此，腌制時(shí)間為10 h為宜。

由圖1～圖3可知，鹽鹵中氨基態(tài)氮含量和魚肉增重率隨腌制溫度的上升和腌制時(shí)間的增長(zhǎng)而提高，而與鹽水濃度則呈相反趨勢(shì)。魚肉NaCl的含量與腌制溫度、時(shí)間和鹽水濃度呈正相關(guān)。為制得營(yíng)養(yǎng)損失小、咸淡適宜的酒糟鱘魚，腌制條件為10 ℃，10 h，鹽水質(zhì)量濃度15%。

2.2響應(yīng)面法優(yōu)化糟醉鱘魚的濕腌工藝

2.2.1響應(yīng)面分析因素與水平選擇

根據(jù)Box-Behnken中心設(shè)計(jì)原理[19]，結(jié)合鱘魚腌制工藝單因素實(shí)驗(yàn)，對(duì)糟醉鱘魚濕腌工藝進(jìn)一步優(yōu)化。以腌制溫度(A)、腌制時(shí)間(B)和鹽水濃度(C)3個(gè)因素為自變量，以-1、0、1來表示低、高3水平，以產(chǎn)品感官評(píng)價(jià)值(Y)為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)3因素3水平實(shí)驗(yàn)，見表2。設(shè)計(jì)15個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)，其中12個(gè)析因點(diǎn)，3個(gè)零點(diǎn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3。

表2　試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素和水平

表3　Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

2.2.2感官評(píng)定結(jié)果與測(cè)定指標(biāo)間數(shù)學(xué)模型的建立

通過觀察單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以得出各個(gè)因素的影響順序?yàn)椋篊(鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù))>B(腌制時(shí)間)>A(腌制溫度)，在有交互作用的存在下，各個(gè)因素對(duì)酒糟鱘魚感官評(píng)價(jià)得分的影響順序?yàn)椋築C>AC>AB。

表4　響應(yīng)面方差分析

注：P值<0.05表明模型或各因素影響顯著，以“*”表示；P值<0.01表明模型或因素影響高度顯著，以“**”表示；P值<0.001表明模型或因素影響極顯著，以“***”表示。

2.2.3響應(yīng)面交互作用分析與優(yōu)化

采用Design Expert8.0.6軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行三元二次回歸擬合，并繪制響應(yīng)面三維曲線圖，進(jìn)行可視化分析。結(jié)果見圖4～圖6。響應(yīng)面等高線圖可直觀反映各因素交互作用的顯著程度[23]，等高線圖呈現(xiàn)橢圓形，則表示兩因素之間交互作用顯著，且橢圓長(zhǎng)半軸越長(zhǎng)，交互作用越顯著。而圓形則表示兩因素交互作用不顯著[24]。

圖4顯示了鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)位于中心水平時(shí)，腌制溫度和腌制時(shí)間交互作用對(duì)感官評(píng)定結(jié)果的影響。從圖4可知，腌制溫度和腌制時(shí)間對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的交互作用顯著。其中，腌制時(shí)間對(duì)感官評(píng)定結(jié)果的影響較大，具體表現(xiàn)為三維響應(yīng)曲面坡度較陡及等高線較密集；腌制溫度對(duì)感官評(píng)定結(jié)果的影響較小，表現(xiàn)為等高線較稀疏及響應(yīng)曲面坡度較緩。

圖5　腌制溫度和鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)感官評(píng)定結(jié)果的影響Fig.5　Effects of curing temperature and brine concentration on the sensory evaluation scores

圖5顯示了腌制時(shí)間位于中心水平時(shí)，腌制溫度和鹽水質(zhì)量濃度交互作用對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響。由圖5可知，腌制溫度和鹽水質(zhì)量濃度對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的交互作用顯著，其中，鹽水濃度對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響較大。圖6顯示了腌制溫度處于中心水平時(shí)，腌制時(shí)間和鹽水濃度交互作用對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響，由圖6可知，腌制時(shí)間和鹽水濃度對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響顯著，其中，鹽水濃度和腌制時(shí)間對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響均較大，且鹽水濃度影響最大。

圖6　腌制時(shí)間和鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)感官評(píng)定結(jié)果的影響Fig.6　Effects of curing time and brine concentration on the sensory evaluation scores

2.2.4最優(yōu)工藝條件的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證

采用Design Expert8.0.6軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行優(yōu)化預(yù)測(cè)分析，得到糟醉鱘魚濕腌工藝的最佳工藝參數(shù)為：腌制溫度9.46 ℃、腌制時(shí)間10.6 h、鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)14.03%：，在此條件下預(yù)測(cè)糟醉鱘魚的感官評(píng)分結(jié)果為90.994?？紤]到實(shí)際試驗(yàn)的可操作性，將工藝參數(shù)修正為：腌制溫度10 ℃、腌制時(shí)間10.5 h、鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)14%。在此工藝條件下驗(yàn)證模型的預(yù)測(cè)參數(shù)，得到感官評(píng)價(jià)結(jié)果為90，較接近模型預(yù)測(cè)值，表明響應(yīng)面法優(yōu)化得到的濕腌工藝參數(shù)可靠。

3結(jié)論

鱘魚魚肉鹽含量與腌制溫度、鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)和腌制時(shí)間呈正相關(guān)；鹽鹵中氨基態(tài)氮含量及魚肉增重率與腌制時(shí)間和腌制溫度呈正相關(guān)，與鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈負(fù)相關(guān)。

運(yùn)用響應(yīng)面分析法得到酒糟鱘魚感官評(píng)定結(jié)果與腌制工藝條件的二次多項(xiàng)回歸方程

Y=90.69-0.37A+1.19B-2.40C-1.53AB-2.31AC-3.75BC-6.64A2-8.05B2-7.30C2

回歸方程置信度高、擬合性好，其中各因素對(duì)感官評(píng)價(jià)結(jié)果的影響不同，鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)極顯著，腌制時(shí)間較顯著，腌制溫度不顯著。

經(jīng)響應(yīng)面優(yōu)化分析，得出最佳濕腌工藝為：腌制溫度：10 ℃、腌制時(shí)間10.5 h、鹽水質(zhì)量分?jǐn)?shù)14%。在此條件下得到的產(chǎn)品感官評(píng)價(jià)結(jié)果為90分，與模型預(yù)測(cè)值基本相符。

二次回歸方程能較好地反映實(shí)際試驗(yàn)值，故可用來分析響應(yīng)值的變化。

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Optimization of wet-curing conditions of vinasse sturgeon based on response surface methodology

ZHAO Pin1,2，LIN Wan-ling1，HAO Shu-xian1*，LI Lai-hao1，YANG Xian-qing1

1(National Research and Development Center for Aquatic Product Processing, Key Lab. of Aquatic Product Processing, Ministry of Agriculture; South China Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300,China)2(Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)

ABSTRACTThe wet-curing process of vinasse sturgeon was studied by response surface method. The effect of different content of the salt, the wet-curing temperature and time on quality of vinasse sturgeon was studied by the mono-factorial experiment. Based on these results and Box-Behnken of response surface method, a ternary quadratic equation for the value of sensory evaluation was built. By analyzing their corresponding contour plots and the response surface plots as well as solving the quadratic equation, the experimental values were shown in good agreement with predicted values, the adjusted determination coefficient was 0.974. Result indicated that the significant external factors affecting the quality of products were the content of the salt. The optimal clarification conditions were: salt 14%, wet-curing temperature 10 ℃, curing time 10.5 h. The value of sensory evaluation was 90.

Key wordssturgeon; curing temperature; curing time; the addition of the salt added; response surface; sensory evaluation

DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201606024

基金項(xiàng)目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)(鱘魚)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS-49)；國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(SQ2015BA0801744，2012BAD28B06)

收稿日期：2015-10-14，改回日期：2015-12-10

第一作者：碩士研究生(郝淑賢博士為通訊作者，E-mail：susanhao2001@163.com)。