王協(xié)利，陶志杰，王珊珊，劉　城，吳從文

(蚌埠學(xué)院生物與食品工程系，安徽　蚌埠　233030)

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幾種不同花生品種輔酶Q10含量比較*

王協(xié)利，陶志杰，王珊珊，劉城，吳從文

(蚌埠學(xué)院生物與食品工程系，安徽蚌埠233030)

分析不同花生品種中輔酶Q10含量，為植物細(xì)胞培養(yǎng)制備輔酶Q10提供理論依據(jù)。采用紫外分光光度法測定花生中輔酶Q10的含量。結(jié)果表明：蚌埠地區(qū)主要種植的5個(gè)花生品種(魯花11號、魯花14號、魯花8號、豫花4號、中花5號)種子中的輔酶Q10含量以魯花14號輔酶Q10含量最高，中花5號次之，豫花4號最低。芽莖中輔酶Q10含量以魯花8號、魯花14號較高，根中輔酶Q10含量差異不大。

輔酶Q10；花生；紫外分光光度法

輔酶Q10(Coenzyme Q10,簡寫CoQ10)，化學(xué)名稱為2,3-二甲氧基-5-甲基-6-癸異戊烯基-苯醌，又名泛醌，廣泛存在于生物體細(xì)胞線粒體中。CoQ10能保護(hù)和改善心功能、降血壓、保肝、抗癌、治療皮膚性疾病、糖尿病等藥理作用[1]。此外，由于抗氧化作用，CoQ10還可應(yīng)用于保健食品、化妝品等方面[2-3]。

本實(shí)驗(yàn)測定了蚌埠地區(qū)主要種植的5個(gè)花生品種(魯花11號、魯花14號、魯花8號、豫花4號、中花5號)果實(shí)及芽莖、根中CoQ10的含量，預(yù)篩選出CoQ10含量較高的品種和外植體，為以后花生細(xì)胞懸浮培養(yǎng)產(chǎn)CoQ10奠定理論基礎(chǔ)。

1　實(shí)　驗(yàn)

1.1材料、試劑與儀器

花生種子魯花11號、魯花14號、魯花8號、豫花4號、中花5號(購于固鎮(zhèn)縣種子站)。

氫氧化鈉，焦性沒食子酸，無水乙醇，石油醚，硼氫化鈉，無水硫酸鈉等，以上試劑均為分析純。

FW-100高速萬能粉碎機(jī)，北京市永光明醫(yī)療儀器廠；JA1203電子天平，上海精科天平廠；HH-S型數(shù)顯恒溫水浴鍋，金環(huán)市華科教實(shí)驗(yàn)儀器廠；紫外分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE52CS，上海亞榮生化儀器廠；SHZ-D[III]循環(huán)式真空泵，鞏義市予華儀器有限公司等。

1.2方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)流程

采集→清洗→粉碎→皂化→萃取→水洗→脫水→旋蒸濃縮→冷凍→過濾→含量測定

1.2.2CoQ10的提取

將洗凈的不同品種花生種子去皮用粉碎機(jī)粉碎，稱取10 g，再加入0.7 g 焦性沒食子酸，7.5 g氫氧化鈉-75%的乙醇，在90℃條件下回流30 min，用自來水迅速冷卻，加入石油醚，劇烈振蕩5 min，萃取2 次，取上清液合并，用蒸餾水洗滌至中性，再加入適量無水硫酸鈉除去水分，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(60℃)濃縮至干，并揮發(fā)完全，加入10 mL無水乙醇，放入冰箱冷凍析出膽固醇等雜質(zhì)，待測[4]。

1.2.3CoQ10的含量測定

將上述所得待測液取出，過濾，濾液用無水乙醇定容至25 mL，待測。用無水乙醇溶解定容后，在275 nm波長下測定氧化型CoQ10的光吸收值(A1)，然后加入0.1 mL 0.7%的硼氫化鈉水溶液充分還原CoQ10，并在同一波長下測定還原型CoQ10光吸收值(A2)[5]。以無水乙醇作對照，按以下公式計(jì)算CoQ10的含量：

W(CoQ10)=(A1-A2)×106×n/(142×S)

式中：W——每克花生中CoQ10的含量

n——稀釋倍數(shù)

S——去皮花生果實(shí)鮮重質(zhì)量

142——質(zhì)量分?jǐn)?shù)

2　結(jié)果與分析

2.1不同花生品種種子中CoQ10含量比較

圖1　不同品種花生種子中CoQ10含量比較

圖1中表明，在5個(gè)不同花生品種中，種子中CoQ10含量最高的是魯花14號(平均含量為168.378 μg/g)；其次是中花5號(平均含量為131.944 μg/g)；含量最低的是豫花4號(平均含量為62.382 μg/g)。由此可見，不同品種花生種子中CoQ10含量有較大差異，比較的這5個(gè)品種中，CoQ10含量最高比最低高出2倍之多。

2.2不同花生品種芽莖中CoQ10含量比較

在25℃黑暗條件下用上述5種品種花生種子催芽，待芽長6～8 cm時(shí)，去除花生瓣及根，采收白色粗壯的芽莖用丙酮研磨法提取CoQ10，含量按方法1.3.3測定。圖2中所示，在5種不同花生品種芽莖中CoQ10含量不等，最高的是魯花8號(平均含量為63.672 μg/g)；其次是魯花14號(平均含量為57.933 μg/g)；含量最低的是魯花11號(平均含量為38.532 μg/g)。

圖2　不同品種花生芽莖中CoQ10含量比較

2.3不同花生品種根中CoQ10含量比較

花生根采集于固鎮(zhèn)縣花生種植基地。由圖3可知，在5個(gè)不同花生品種根中CoQ10含量最高的是魯花14號(平均含量為86.295 μg/g)；其次是魯花8號(平均含量為79.389 μg/g)；含量最低的是魯花11號(平均含量為57.367 μg/g)。待測的5種花生品種根中CoQ10含量差異并不大，均在60～90 μg/g之間。

圖3　不同品種花生根中CoQ10含量比較

3　討　論

植物細(xì)胞培養(yǎng)法產(chǎn)CoQ10最早由Ikeda通過煙草組織細(xì)胞培養(yǎng)分離得到。鑒于植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物的獨(dú)特優(yōu)勢，采用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)CoQ10己成為研究熱點(diǎn)。花生組培技術(shù)應(yīng)用于次生代謝物質(zhì)的生產(chǎn)是有關(guān)學(xué)者研究的新課題?；ㄉ荂oQ10含量較高的植物物種之一，利用花生組織培養(yǎng)產(chǎn)CoQ10具有可行性。試驗(yàn)測定的5個(gè)花生品種中CoQ10含量最高比最低高出2～3倍。而各個(gè)品種的根部CoQ10含量差異不明顯，均約為60～90 μg/g之間?；ㄉ壳o中CoQ10含量較高，最高含量的魯花8號，平均值63.672 μg/g鮮重，花生芽莖由于含水量較高，若轉(zhuǎn)換為干重含量，將是花生種子含量的數(shù)倍。

4　結(jié)　論

測定的5個(gè)花生品種種子中的CoQ10含量魯花14號最高，中花5號次之，豫花4號最低。其芽莖中CoQ10含量則以魯花8號、魯花14號較高，而根中CoQ10含量差異不大。由此說明，可以選用魯花14號、魯花8號為試驗(yàn)材料進(jìn)行花生芽莖細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)CoQ10的研究。本實(shí)驗(yàn)為后續(xù)花生細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及生物合成CoQ10的研究奠定了試驗(yàn)基礎(chǔ)。

[1]錢雪,王祖巧,韓國平,等.輔酶Q10的藥理與應(yīng)用[J].食品與藥品,2006,8(1):16-19.

[2]馬菊,石寧.食品中應(yīng)用輔酶Q10的研究進(jìn)展[J].食品科技,2009,34(2):18-21.

[3]葉青,張賓紅,關(guān)屹.輔酶Q10的性質(zhì)及其在化妝品中的應(yīng)用[J].香料香精化妝品,1999,03:32-34.

[4]陶志杰,曹迪,王改玲,等.超聲波法輔助提取花生中輔酶Q10的工藝優(yōu)化[J].食品科學(xué),2012,33(18):53-56.

[5]呂春茂,孫忠思,楊國放,等.幾個(gè)煙草品種輔酶Q10含量的比較[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(1):129-130.

Comparison of CoQ10Content of Several Peanut Varieties*

WANG Xie-li，TAO Zhi-jie，WANG Shan-shan，LIU Cheng，WU Cong-wen

(Department of Biology and Food Engineering,Bengbu College,Anhui Bengbu 233030,China)

Coenzyme Q10content of five peanut varieties was analyzed,theoretical basis for production of CoQ10was provided by the application of plant cell culture technique.The results showed that five peanut varieties were mainly planted in Bengbu,the CoQ10content of peanut seeds was highest in Luhua No.14,moderate in Zhonghua No.5,and lowest in Yuhua No.4.The CoQ10content of peanut buds was higher in Luhua No.8,Luhua No.14,and the CoQ10content in roots was not significant differences.

Coenzyme Q10；peanut；ultraviolet spectrophotometry

省級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(No:AH201411305067)；安徽省高校自然科學(xué)研究項(xiàng)目(No:113052015KJ07)。

王協(xié)利(1994-)，女，生物工程專業(yè)學(xué)士在讀。

陶志杰(1979-)，女，講師，研究方向?yàn)樯锘钚晕镔|(zhì)提取與制備。

Q946.5

A

1001-9677(2016)06-0087-02