周麗華 趙俊

臨床研究

血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2對(duì)冠心病的臨床意義

周麗華 趙俊

目的 檢測(cè)冠心病患者血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2（Lipocalin-2）濃度水平，探討脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在冠心病中的臨床意義。方法 用酶聯(lián)免疫反應(yīng)方法檢測(cè)冠心病患者167例（CHD組）及127名健康對(duì)照者（對(duì)照組）血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2水平，同時(shí)收集血糖、血脂等一般性資料。結(jié)果 CHD組患者血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2濃度明顯高于對(duì)照組［（417.78±55.87）pg/ml比（231.67±71.71）pg/ml，P=0.000］。相關(guān)分析表明，脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與MDA（r=0.257，P=0.006）、hs-CRP（r=0.178，P=0.018），TNF-α（r=0.245，P=0.005）、HOMA-IR（r=0.214，P=0.001）呈正相關(guān)，與HDL-C（r=-0.184，P=0.027）、GSH（r=-0.358，P=0.000）呈負(fù)相關(guān)。多重線性回歸分析提示，MDA、HOMA-IR是影響脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2水平的獨(dú)立相關(guān)因素，血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2診斷冠心病ROC曲線下面積為0.812（0.765，0.861）。結(jié)論 血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與胰島素抵抗、氧化應(yīng)激及炎癥密切相關(guān)，它有助于冠心病診斷及病情檢測(cè)。

脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2； 冠狀動(dòng)脈疾??； 臨床意義

冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是一種主要由于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致心肌供血不足的臨床代謝綜合征[1，2]。冠心病發(fā)病率高、危害大，病死率居高不下，嚴(yán)重影響廣大人民的身心健康。目前，冠心病的確切發(fā)病機(jī)制尚未明了。國(guó)內(nèi)學(xué)者現(xiàn)一致認(rèn)為內(nèi)皮細(xì)胞損傷是冠心病發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，而其損傷與內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激及機(jī)體胰島素抵抗密切相關(guān)[2,3]。

脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2是kjeldsen在1993年用免疫沉淀法及免疫印跡法在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)并成功分離的蛋白[4]。既往研究發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2廣泛參與慢性炎癥和脂肪代謝[5,6]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2參與肥胖、代謝綜合征及糖尿病的發(fā)生發(fā)展[7,8]。本研究旨在檢測(cè)血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在冠心病患者中的表達(dá)水平，以探討其對(duì)冠心病的臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2014年1月至 2015年8月在我院心內(nèi)科導(dǎo)管室經(jīng)過(guò)冠狀動(dòng)脈造影明確診斷為CHD的患者167例，其中男性86例、女性81例，年齡（48.12±13.23）歲。診斷標(biāo)準(zhǔn)：管腔直徑狹窄70%～75%或以上[9]。選取同期健康體檢正常者127例作為對(duì)照組，其中男性65例、女性62例，年齡（49.35±14.12）歲。所有受試者測(cè)量血壓、血糖，以確定是否有高血壓病及糖尿病。所有CHD患者均為初次發(fā)現(xiàn)，在接受造影前均未接受抗凝、PCI及支架等治療。所有操作和測(cè)量必須征得患者同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 測(cè)量受試者以下形態(tài)學(xué)指標(biāo)：身高、體重、腰圍，按相關(guān)公式計(jì)算人體質(zhì)量指數(shù)（BMI），體重指數(shù)=體重/身高2（kg/m2）。所有研究對(duì)象在醫(yī)院清晨抽取空腹靜脈血，按照常規(guī)經(jīng)典方法檢測(cè)空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等血脂指標(biāo)，以及超敏C-反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平。采用南京建成生物公司相關(guān)試劑盒檢測(cè)丙二醛（MDA）；采用武漢谷歌生物有限公司相關(guān)試劑盒檢測(cè)血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2和還原型谷胱甘肽（GSH）。胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）計(jì)算如下：

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布采用±s描述，組間有關(guān)參數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與血糖、血脂、氧化應(yīng)激等參數(shù)之間的關(guān)系采用Pearson或者Sperm相關(guān)分析。多元線性回歸探討影響血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2因素。Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的危險(xiǎn)因素；進(jìn)行受試者工作特征（ROC）曲線分析脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2對(duì)CHD診斷。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較 兩組之間年齡、性別上未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C、GSH、高血壓及糖尿病兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

2.2 血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在各組人群分布 CHD患者血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2濃度明顯高于對(duì)照組［（417.78±55.87）pg/ml比（231.67±71.71）pg/ml，P= 0.000］。

2.3 相關(guān)分析及多元線性回歸分析 血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與年齡（r=0.414，P=0.126）、BMI（r= 0.254，P=0.376）、腰圍（r=0.358，P=0.297）、LDL-C（r=0.287，P=0.027）、TG（r=0.426，P=0.026）、TC（r= 0.524，P=0.046）無(wú)相關(guān)性；而與HDL-C（r=-0.184，P=0.027）、GSH（r=-0.358，P=0.000）呈負(fù)相關(guān)，與MDA（r=0.257，P=0.006）、hs-CRP（r=0.178，P= 0.018）、TNF-α（r=0.245，P=0.005）、HOMA-IR（r= 0.214，P=0.001）呈正相關(guān)。以脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2為因變量，上述與之呈顯著關(guān)系的指標(biāo)作為自變量進(jìn)行多元線性逐步回歸，結(jié)果顯示，MDA、HOMA-IR與脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2獨(dú)立相關(guān)，回歸方程Y脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2= 321.36－12.26XMDA－9.25XHOMA-IR，所得模型決定系數(shù)R2=0.812（F=40.36，P=0.020）。

2.4 血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2對(duì)冠心病的檢驗(yàn)效能分析 繪制ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2脂肪因子對(duì)冠心病的檢驗(yàn)ROC曲線下面積為0.812（0.765，0.861），最佳截點(diǎn)434.78 ng/ml（敏感度為68.8%，特異度為83.4%，P=0.041），約登指數(shù)為0.522。

3 討論

冠心病現(xiàn)已成為常見疾病，然而其確切機(jī)制尚不明了。在冠心病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中存在諸多病理生理方面的改變，其中胰島素抵抗、氧化應(yīng)激以及炎癥在冠心病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中起著至關(guān)重要的作用[2]。生理情況下機(jī)體脂肪細(xì)胞因子處于正常水平。而在冠心病發(fā)展過(guò)程中脂肪細(xì)胞因子可能通過(guò)參與肥胖-炎癥-血脂異常等幾個(gè)方面介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損最終參與冠心病的發(fā)生發(fā)展[2]。

表1 兩組受試者一般資料比較（±s）

表1 兩組受試者一般資料比較（±s）

注：HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇；TG：甘油三酯；TC：總膽固醇；MDA：丙二醛；GSH：還原型谷胱甘肽；hs-CRP：超敏C-反應(yīng)蛋白水平；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；HOMA-IR：胰島素抵抗指數(shù)。

組別 例數(shù) 年齡（歲） 男/女 體重指數(shù)（kg/m2） 腰圍（cm） HDL-C（mmol/L） LDL-C（mmol/L） TG（mmol/L）對(duì)照組 127 49.35±14.12 65/62 23.58±5.32 70.03±10.34 2.06±0.98 2.10±0.54 2.89±0.81 CHD組 167 48.12±13.23 86/81 25.59±4.06 78.04±14.18 1.79±0.54 3.71±1.09 3.71±0.54 P值 0.671 0.912 0.002 0.000 0.019 0.000 0.000組別 TC（mmol/L） MDA（μmol/L） GSH（μmol/L） hs-CRP（ng/ml） TNF-α（pg/ml） HOMA-IR 高血壓（例） 糖尿?。ɡ?duì)照組 3.47±1.22 2.34±0.56 358.96±27.31 2.56±0.86 13.25±5.47 2.66±0.96 11 5 CHD組 3.95±1.35 4.11±0.47 241.36±35.25 2.81±0.62 16.38±5.31 3.69±0.79 74 23 P值 0.005 0.000 0.000 0.015 0.000 0.000 0.000 0.000

脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2廣泛分布于人體肺、肝臟、胸腺、腎臟、小腸等器官和組織。既往已對(duì)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在肥胖、代謝綜合征、糖尿病等疾病臨床意義進(jìn)行大量的研究。然而脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在冠心病患者血清表達(dá)水平及臨床意義鮮見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病組患者血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2濃度均明顯高于健康對(duì)照組。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與胰島素抵抗、氧化應(yīng)激以及炎癥密切相關(guān)。Wang等[10]進(jìn)行的臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，循環(huán)血液中的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2濃度與hs-CRP水平呈高度正相關(guān)。為了排除混雜因素的影響，校正了性別、年齡、脂肪量等混雜因素后，這種相關(guān)性仍然存在。Lin等[11]利用ob/ ob小鼠進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)肥胖小鼠肝臟組織中的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2表達(dá)水平明顯升高，而在脂肪組織中該分子的表達(dá)水平亦高于正常。Yah等[12]將純化的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2添加在3T3-L1脂肪細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后檢測(cè)胰島素誘導(dǎo)下和基礎(chǔ)狀態(tài)下的葡萄糖攝取量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，脂肪細(xì)胞無(wú)論在基礎(chǔ)狀態(tài)下還是在胰島素刺激狀態(tài)下，都較對(duì)照組的葡萄糖攝取量顯著升高。Wang等[10]利用體內(nèi)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)229名中國(guó)人的血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2水平進(jìn)行檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，血脂代謝紊亂者血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2濃度明顯升高，而且可能與肥胖相關(guān)的代謝異常有關(guān)。綜上所述，在機(jī)體中血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2增高時(shí)可介導(dǎo)氧化應(yīng)激、胰島素抵抗及炎癥的發(fā)生，最終導(dǎo)致冠心病發(fā)生發(fā)展。然而血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在冠心病患者內(nèi)增高的機(jī)制及脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2對(duì)冠心病的作用需從分子機(jī)制進(jìn)一步探討。

目前臨床上冠脈造影檢查是用于冠心病診斷及病情監(jiān)測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但因存在有創(chuàng)性、取樣標(biāo)本穿刺偏移、價(jià)格高昂、存在一定風(fēng)險(xiǎn)等缺陷，嚴(yán)重制約著其在臨床中的廣泛應(yīng)用[13]。臨床工作迫切需要操作簡(jiǎn)單且重復(fù)性好的無(wú)創(chuàng)診斷方法，既便于冠心病診斷又利于病情監(jiān)測(cè)。血清生物標(biāo)志物診斷因其重復(fù)性好、取樣創(chuàng)傷小，近年來(lái)在臨床CHD病情檢測(cè)方面得到廣泛應(yīng)用[14]。本研究繪制ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2對(duì)冠心病檢驗(yàn)ROC曲線下面積分別為0.812，最佳截點(diǎn)434.78 ng/ml（敏感度為68.8%，特異度83.4%，P=0.041），約登指數(shù)為0.522。上述結(jié)果提示，血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2用于冠心病診斷及病情監(jiān)測(cè)方面檢驗(yàn)效能良好，在臨床上值得應(yīng)用和推廣。

綜上所述，脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2與冠心病發(fā)生發(fā)展中氧化應(yīng)激、炎癥、胰島素抵抗緊密相關(guān)，并且在一定程度上可以運(yùn)用于CHD的診斷。進(jìn)一步研究探討脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2在CHD中的分子機(jī)制及其上下游調(diào)控因素將具有重要的臨床意義和良好的研究前景。

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The clinical value of serum lipocalin-2 in coronary heart disease

ZHOU Li-hua，ZHAO Jun.Department of Geriatric，Huangshi Center Hospital，Huangshi 435000，China

ZHAO Jun，E-mail：35320220@qq.com

Objective To detect the serum levels of lipocalin-2 in patients of coronary heart disease（CHD），and to analysis clinical value in coronary heart disease.MethodsEnzyme linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detect the serum lipocalin-2 in 167 CHD patients and 127 healthy controls.ResultsThe serum Lipocalin-2 concentration in coronary heart disease was significantly higher than in healthy controls［（417.78±55.87）pg/ml vs（231.67±71.71）pg/ml，P=0.000］.Lipocalin-2 associated positively with MDA（r= 0.257，P=0.006），hs-CRP（r=0.178，P=0.018），TNF-α（r=0.245，P=0.005），HOMA-IR（r=0.214，P= 0.001），but negatively with（r=-0.184，P=0.027），GSH（r=-0.358，P=0.000）.The area under the receiver operating characteristic curve for CHD diagnosis was estimated to be 0.812（0.765，0.861）.ConclusionLipocalin-2 is closely related to oxidative stress，inflammation and insulin resistance in CHD.It is useful for disease surveillance and diagnosis of CHD by serum lipocalin-2.

Lipocalin-2； Coronary heart disease； Clinical value

435000 湖北省黃石市，黃石市中心醫(yī)院老年病科

趙俊，E-mail：35320220@qq.com

10.3969/j.issn.1672－5301.2016.04.015

R541.4

A

1672-5301（2016）04-0345-03

2015-10-17）