李琛澤,楊　健,江培濤

(南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)儀征醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇儀征 211900)

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·經(jīng)驗(yàn)交流·

2013～2015年泌尿生殖道感染解脲支原體耐藥性變遷的研究

李琛澤,楊健,江培濤

(南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)儀征醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇儀征 211900)

目的了解近3年泌尿生殖道解脲支原體(UU)感染耐藥變化情況，指導(dǎo)臨床合理用藥。方法采用支原體分離、鑒定、藥敏復(fù)合檢測板及固體瓊脂培養(yǎng)法對1 164例有癥狀患者進(jìn)行UU檢測及藥敏分析。結(jié)果1 164例有癥狀患者中，UU陽性405例，陽性率34.8%。藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果3年合計(jì)耐藥率最低的抗菌藥物為美滿霉素和強(qiáng)力霉素，耐藥率分別為5.4%和7.2%；耐藥率最高的抗菌藥物為林可霉素和甲砜霉素，耐藥率分別為78.5%和62.7%；而美滿霉素、強(qiáng)力霉素、大觀霉素、交沙霉素4種抗菌藥物的耐藥率呈逐年遞升狀態(tài)，而羅紅霉素、阿奇霉素等的耐藥率變化不大。結(jié)論UU對常用抗菌藥物有不同程度的耐藥性，因此，臨床診治前應(yīng)盡可能做支原體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn),優(yōu)先選擇強(qiáng)力霉素、美滿霉素等抗菌藥物，并合理、規(guī)范用藥。

泌尿；解脲支原體；耐藥性；變遷

支原體是一類不具有細(xì)胞壁并可在人工培養(yǎng)基上生長的原核細(xì)胞微生物，可引起人類多種疾病。其中解脲支原體(UU)可引起人類非淋病性尿道炎，并與男性慢性前列腺炎、男性不育、女性不孕等疾患高度相關(guān)[1]。近年發(fā)病率逐漸上升，因抗菌藥物的不規(guī)范使用，使UU對部分抗菌藥物產(chǎn)生耐藥。本院對2013～2015年臨床患者泌尿生殖道分離的405株陽性患者進(jìn)行藥敏分析，以了解本地區(qū)UU對常用抗菌藥物的耐藥變遷情況，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料本院2013～2015年門診及住院患者1 164例,UU檢測陽性405例，其中2013年113例，2014年135例，2015年157例。所有患者中，女性334例，男性71例；年齡18～72歲，中位年齡38歲。

1.2標(biāo)本采集嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行標(biāo)本采集，用無菌拭子取男性患者尿道分泌物、前列腺按摩液或不明原因不育者精液，女性患者取宮頸分泌物或陰道分泌物。

1.3儀器與試劑隔水恒溫培養(yǎng)箱由上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠生產(chǎn)。支原體培養(yǎng)、鑒定、藥敏試劑盒，以及A8 UU瓊脂培養(yǎng)基由鄭州安圖綠科生物工程有限公司提供。

1.4方法嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書進(jìn)行，將標(biāo)本接種于含有尿素的肉湯培養(yǎng)瓶中并將培養(yǎng)瓶與藥敏試劑條同時(shí)在36 ℃恒溫箱內(nèi)孵育,24、48 h分別記錄結(jié)果。將上述肉湯培養(yǎng)物再轉(zhuǎn)種加入馬血清和酵母浸液的A8 UU瓊脂培養(yǎng)基上，置36 ℃恒溫箱內(nèi)孵育，24～72 h后觀察并記錄結(jié)果。

1.5結(jié)果判斷當(dāng)培養(yǎng)瓶與藥敏試劑孔同時(shí)變紅，且UU孔>104CCU，同時(shí)瓊脂培養(yǎng)基上有圓形、棕色、直徑15～60 μm的菌落生長，滴加1滴0.1 mol/L的CaCl2試劑后，菌落變?yōu)楹稚瑒t判斷UU陽性[2]。藥敏結(jié)果判斷：低濃度與高濃度孔均未變紅為敏感(S)；低濃度孔變紅而高濃度孔未變紅,為中介(I)；低濃度與高濃度孔均變紅為耐藥(R) 。

2　結(jié)　　果

2.1陽性檢出情況3年1 164例有癥狀患者中，UU檢測陽性405例，其中2013年113例，2014年135例，2015年157例。所有患者中女性334例，男性71例。

2.2藥敏試驗(yàn)結(jié)果近3年泌尿生殖道UU感染耐藥性結(jié)果，見表1。

表1　　近3年泌尿生殖道UU感染耐藥性結(jié)果[n(%)]

3　討　　論

近幾年，泌尿生殖道支原體感染在國內(nèi)受到了廣泛的關(guān)注，與其流行性和耐藥性相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道大量涌現(xiàn)，但有學(xué)者在進(jìn)行該項(xiàng)研究的時(shí)候有2個問題并沒有引起重視，一是病原性支原體的選擇，UU和人型支原體(MH)都是人類生殖道常見寄生菌，只有在寄生數(shù)量達(dá)到一定程度后方可致病，而且UU是人類泌尿道唯一的病原性支原體，但是很多進(jìn)行支原體檢測試劑研發(fā)的廠家都將MH也作為相關(guān)的檢測項(xiàng)目，這導(dǎo)致很多臨床工作者在進(jìn)行相關(guān)研究時(shí)也將MH作為病原性支原體來檢測。二是支原體分離和培養(yǎng)方法的不完善，有學(xué)者僅憑肉湯培養(yǎng)基顏色的變化來判斷有無支原體感染，這必然導(dǎo)致假陽性的升高，十多年前就有學(xué)者對此進(jìn)行過相關(guān)報(bào)道[3]。

支原體是一組原核細(xì)胞型微生物，具有無細(xì)胞壁的特點(diǎn)，因而，對干擾細(xì)胞壁合成的抗菌藥物，如：β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物及磷霉素、萬古霉素等糖肽類抗菌藥物表現(xiàn)為耐藥。臨床多用干擾蛋白質(zhì)合成的抗菌藥物和阻斷DNA復(fù)制抗菌藥物，如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類、氨基糖苷類抗菌藥物進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)治療。

在本院近3年1 164例有癥狀患者中,檢出UU 405例，檢出率34.8%,女性檢出率41.2%,比國內(nèi)報(bào)道的47.0%略低[4]。這可能與本研究采用固體瓊脂培養(yǎng)法確認(rèn)UU感染，嚴(yán)格控制假陽性有關(guān)。女性UU檢出率明顯高于男性(P<0.05),這主要與UU容易在女性陰道內(nèi)寄居，在病理情況下侵犯女性泌尿生殖道的機(jī)會高于男性有關(guān)。

通過對以上10種抗菌藥物耐藥情況進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，UU對美滿霉素、強(qiáng)力霉素的耐藥率低于10.0%，表明這2種新型四環(huán)素類抗菌藥物在治療UU感染時(shí)可能有較好的療效。在以大觀霉素為代表的氨基糖苷類抗菌藥物中，也表現(xiàn)出26.0%以下的較低耐藥率。大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物是臨床上首選用于治療支原體感染性疾病的藥物，本研究在對該類藥物進(jìn)行敏感性試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，羅紅霉素、克拉霉素、交沙霉素的耐藥率在25.0%左右，而阿奇霉素的耐藥率在40.0%以上。以上結(jié)果除阿奇霉素外，與國內(nèi)楊小琴等[5]報(bào)道結(jié)果相差不大，這可能與本地區(qū)較多使用該抗菌藥物，導(dǎo)致其耐藥性相對升高有關(guān)。另外，阿奇霉素對肺炎支原體的作用是大環(huán)內(nèi)酯類中最強(qiáng)者，被廣泛應(yīng)用于呼吸道肺炎支原體感染的患者[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，林可霉素的耐藥率達(dá)71.0%～89.0%，而甲砜霉素、司帕沙星的耐藥率達(dá)40.7%～77.9%，平均中介在30%以上，可能與這些抗菌藥物在酸性條件下活性會下降有關(guān)，也可能與支原體在體外形成生物被膜，使其耐藥性增加有關(guān)[7-8]。分析近3年UU耐藥率的變化，可以看到美滿霉素、強(qiáng)力霉素、大觀霉素、交沙霉素4種抗菌藥物的耐藥率呈逐年遞升狀態(tài)，而羅紅霉素、阿奇霉素等的耐藥率變化不大。

根據(jù)以上分析，臨床在治療UU感染性疾病時(shí)，宜根據(jù)培養(yǎng)及其藥物敏感性試驗(yàn)，選擇四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，并避免長時(shí)間使用同一種抗菌藥物，以免耐藥的發(fā)生。

[1]張卓然．臨床微生物學(xué)和微生物檢驗(yàn)[M]．3版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：292-293．

[2]李仲興，鄭家齊，李家宏，等．診斷細(xì)菌學(xué)[M]．香港：黃河文化出版社，1992：552-556．

[3]趙旺勝，柏兵．淺談國內(nèi)支原體培養(yǎng)和鑒定中存在的問題[J]．臨床檢驗(yàn)雜志，2004，22(5)：321-322．

[4]羅慧琴，王志剛，李玲，等．583例泌尿生殖道支原體感染培養(yǎng)結(jié)果分析[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(11)：1441-1443．

[5]楊小琴，劉鑄，廖以眉．812例泌尿生殖道支原體培養(yǎng)及藥敏分析[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(23)：2949-2950．

[6]王睿，陳良安，郭代紅，等．臨床抗感染藥物治療學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：623-624．

[7]褚云卓，年華，賈桂英．解脲脲原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23(1)：43．

[8]葉曉敏，陸春，朱國興，等．解脲脲原體生物被膜形成與耐藥性的相關(guān)性研究[J]．中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2011，31(3)：245-249．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.065

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