軟棗獼猴桃種苗快速繁育技術(shù)研究

陳晶

摘要 利用組織培養(yǎng)技術(shù)，對比多種培養(yǎng)基中軟棗獼猴桃的生長，選出最適合軟棗獼猴桃生長的培養(yǎng)基為培養(yǎng)基④1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L，以期對軟棗獼猴桃的快速繁殖提供一定的幫助。

關(guān)鍵詞 軟棗獼猴桃；組織培養(yǎng)；快速繁殖

中圖分類號 S663.4 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2016）09-0073-0

為了對軟棗獼猴桃種苗快速繁育技術(shù)進行研究，特開展了此研究。

1 材料與方法

1.1 基本培養(yǎng)基的配制

1.1.1 基本培養(yǎng)基母液的配制。在組織培養(yǎng)中，基本培養(yǎng)基的母液有4種：大量元素、微量元素、鐵鹽以及除蔗糖外的有機物。大量元素母液成分：NH4NO3 1 650 mg/L、KNO3 1 900 mg/L、KH2PO4 170 mg/L、MgSO4·7H2O 370 mg/L。微量元素母液成分：MnSO4·4H2O 22.3 mg/L、ZnSO4·7H2O 8.69 mg/L、H3BO3 6.2 mg/L、KI 0.83 mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25 mg/L、CoCl2·6H2O 0.025 mg/L、CuSO4·5H2O 0.025 mg/L。

鐵鹽母液成分：FeSO4·7H2O 27.8 mg/L、Na2-EDTA 37.3 mg/L。有機物母液成分：肌醇100 mg/L；煙酸（V）0.5 mg/L；鹽酸硫胺素（V）0.1 mg/L；鹽酸吡哆醇（V）0.5 mg/L；甘氨酸2.0 mg/L。

1.1.2 生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液的配制?；九囵B(yǎng)基確定后，母液配制完成，按照選定的試驗配方制作培養(yǎng)基。細胞分裂素的選定：將生長素選定為IBA 0.2 mg/L，糖30 g/L，做以下培養(yǎng)基備用：①MS+BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；②MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；③MS+BA 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L；④MS+ZT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑤MS+ZT 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑥MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑦MS+KT 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑧MS+KT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑨MS+KT 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L。

1.2 接種

接種材料先經(jīng)過表面消毒后滅菌處理后經(jīng)無菌操作程序轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基上的過程就叫接種；最初接種的材料就叫做外植體[1-3]。消毒的具體方法如下：一是刷洗沖洗材料（外植體）。將采來的外植體去除不用的部分，把需要的部分用適當?shù)能浢⒃诹魉聸_洗干凈，必要時可以用少量的洗衣粉。二是外植體的表面消毒滅菌。這一步驟要在超凈工作臺上進行（超凈工作臺在使用時要提前開機10 min），準備滅菌溶液，無菌水。把處理好的外植體放入燒杯中，倒入事先準備好的消毒液，輕輕晃動，不使液體外濺，按照規(guī)定的時間倒出消毒液，加入無菌水清洗，清洗3次即可，消毒好的外植體準備接種[4-6]。三是按要求將消毒好的外植體分別接種在準備好的培養(yǎng)基里，每個培養(yǎng)基接種200瓶，共16 800瓶。每瓶接種2點，分別將其編號，然后放在培養(yǎng)室內(nèi)觀察其變化。其他附屬條件（如溫度、光照、pH值等）均一致。10 d后去除污染，15 d后開始觀察記錄。觀察結(jié)果：經(jīng)過觀察發(fā)現(xiàn)，軟棗獼猴桃在含有分裂素ZT的培養(yǎng)基中表現(xiàn)明顯好于其他2種分裂素，KT表現(xiàn)最差，長勢最好的培養(yǎng)基為⑥MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L，能夠分化較多較正常的芽，沒有玻璃化現(xiàn)象，沒有褐變，因此軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基為MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L糖30 g/L。

2 結(jié)果與分析

2.1 繼代培養(yǎng)基的選定

將誘導(dǎo)好的芽轉(zhuǎn)接在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，出現(xiàn)了玻璃化現(xiàn)象且芽節(jié)間未伸長，因此在繼代過程中應(yīng)將分裂素濃度降低，在培養(yǎng)基中添加了赤霉素（GA3）根據(jù)這些性狀做以下繼代培養(yǎng)基試驗：①MS+ZT 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L；②MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L；③MS+ZT 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L+糖30 g/L。

經(jīng)過觀察表明：在試驗②培養(yǎng)基中長勢好，能分化較多較壯的苗，而且節(jié)間伸長明顯，因此，軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)的最適繼代（擴繁）培養(yǎng)基為MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L+糖30 g/L。

2.2 生根培養(yǎng)基的選定

組培苗在生根前要提高生長素濃度，讓瓶苗變得粗壯，確保生根苗的質(zhì)量，同時要降低無機鹽濃度，促進生根。根據(jù)觀察苗的長勢情況，做生根培養(yǎng)基試驗分別為①1/2MS+ZT 0.01 mg/L+IBA 0.2 mg/L+糖20 g/L；②1/2MS+IBA 0.2 mg/L；③1/2MS+IBA 0.3 mg/L；④1/2MS+IBA 0.5 mg/L。

3 結(jié)論

通過觀察發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基④1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L中能夠分化出2～4條正常的根系，生根率100%，能夠達到移栽標準，因此最適軟棗獼猴桃組培苗生根的培養(yǎng)基是1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L。組培苗生好根后，就可以馴化移栽，從而得到優(yōu)質(zhì)的種苗。

4 參考文獻

[1] 袁從兵.龍牙百合快速繁殖與脫毒分析[J].南方農(nóng)業(yè)，2016（3）：23-25.

[2] 王宇卓，胡國巖.宿根福祿考快速繁殖方法的研究[J].農(nóng)村實用科技信息，2010（1）：47-49.

[3] 郝明明，杜小春，周文婷.藍莓的快速繁殖[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（22）：96-98.

[4] 閻珂，肖君澤.章姬草莓無病毒苗快速繁殖配套技術(shù)[J].現(xiàn)代園藝，2013（19）：12-14.

[5] 郭志欣，顧地周，閆中雪，等.軟棗獼猴桃優(yōu)良品系“2008-07”組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2014（11）：93-98.

[6] 牛曉林.長白山軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)和快繁技術(shù)研究[D].南京：南京林業(yè)大學(xué)，2012.