• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      基于核磁共振的肝癌大鼠血清代謝組學(xué)分析

      2016-10-27 03:47:48梁柳
      生物技術(shù)世界 2016年2期
      關(guān)鍵詞:丙酮酸代謝物組學(xué)

      梁柳

      (廣西醫(yī)科大學(xué) 廣西南寧 530021)

      基于核磁共振的肝癌大鼠血清代謝組學(xué)分析

      梁柳

      (廣西醫(yī)科大學(xué) 廣西南寧 530021)

      本文通過(guò)腹腔注射二乙基亞硝胺(DEN)的方法,成功建立了大鼠的肝癌模型,并應(yīng)用核磁共振的代謝組學(xué)技術(shù), 對(duì)肝癌模型組大鼠、以及正常組大鼠血清的代謝組分進(jìn)行分析,判斷小分子標(biāo)志物的差異性。按照小劑量二乙基亞硝胺(DEN)間斷性腹腔注射的方法建立肝癌大鼠模型, 同時(shí)用正常大鼠作為對(duì)照,核磁共振氫譜檢測(cè)對(duì)兩組血清進(jìn)行檢測(cè), 獲得各組大鼠血清中的代謝差異性。肝癌大鼠血清中的丙酮、乙酰乙酸升高, 然而丙酮酸含量降低。代謝組學(xué)是指在體外系統(tǒng)分析生物系統(tǒng)內(nèi)代謝物的變化并以此來(lái)評(píng)價(jià)外源性刺激的對(duì)機(jī)體的效果及其機(jī)制[1]。完整的代謝組學(xué)包括樣品的采集、制備;其代謝產(chǎn)物的檢測(cè)、鑒定;最后是數(shù)據(jù)分析、建模:建立代謝物與生物體本身疾病的關(guān)系[2]。代謝物的識(shí)別更容易、更能準(zhǔn)確地反映生物體系的狀態(tài)。 本文運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù),在建立化學(xué)試劑誘導(dǎo)的肝癌大鼠模型的基礎(chǔ)上,分析大鼠體內(nèi)的化學(xué)成分,這有助于認(rèn)識(shí)小分子物質(zhì)對(duì)腫瘤的影響及其在腫瘤治療的重要意義[3]。

      代謝組學(xué) 核磁共振 大鼠

      1 材料和方法

      1.1 材料

      健康的SPF級(jí)SD雌性大鼠15只。二乙基亞硝胺(DEN)、重水(D2O), 氯化鈉(NaCl2)、磷酸氫二鉀(K2HPO4)、乙酸、氯化鉀(KCl)、無(wú)水乙醇、生理鹽水、石蠟(國(guó)產(chǎn)分析純)。 一次性采血針, 5 mm核磁管,靜脈血樣采集容器[4]。

      1.2方法

      完全隨機(jī)分組將15只SD大鼠隨機(jī)分為正常組(7只)、肝癌模型組(8只)。肝癌模型組動(dòng)物用DEN腹腔注射,按體重15mg/kg給藥,每周2次,持續(xù)12周。正常組用同等劑量的生理鹽水腹腔注射作為對(duì)照。動(dòng)物用乙醚麻醉后處死, 從腹主動(dòng)脈采血, 采完血放入分離膠促凝采血管,置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。?5℃的測(cè)試溫度下用INOVA600型核磁共振波譜儀調(diào)用CPMG脈沖序列進(jìn)行氫譜測(cè)定。將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Topspin 2.2軟件,進(jìn)行基線和相位的矯正,以α-葡萄糖化學(xué)位移5.255mg/L的質(zhì)子信號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)定標(biāo),數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCAP+12軟件進(jìn)行OPLS-DA分析,然后對(duì)兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的NMR數(shù)據(jù)進(jìn)行模式識(shí)別分析。通過(guò)代謝物相關(guān)系數(shù)得到兩組大鼠血清的差異性代謝成分。通過(guò)檢測(cè)皮爾森相關(guān)系數(shù)顯著性差異得到代謝物含量變化是否具有顯著性的閾值。對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS18.0軟件[3]。

      2 結(jié)果

      正常組和肝癌模型組血清代謝成分差異的比較:肝癌模型組大鼠血清中乳酸、丙氨酸、丙酮酸、甲基組氨酸的濃度有升高, 而丙酮、乙酰乙酸、肉堿的濃度反而下降(表1)。

      表1 兩組大鼠血清1H-NMR譜經(jīng)過(guò)OPLS-DA分析獲得的主要差異代謝物

      3 討論

      實(shí)驗(yàn)組大鼠血清的谷氨酰胺含量降低,血清中谷氨酰胺水平下降,說(shuō)明肝癌大鼠抗氧化能力有所下降, 細(xì)胞膜被氧化傷害、機(jī)體受自由基傷害從而導(dǎo)致免疫力的下降,使大鼠體內(nèi)的代謝成分產(chǎn)生變化。本文中實(shí)驗(yàn)組大鼠血清的丙酮酸含量下降,這預(yù)示腫瘤發(fā)生時(shí),作為過(guò)氧化氫清除劑,丙酮酸在防止自由基損傷細(xì)胞過(guò)程中被大量消耗,這也就是丙酮酸含量下降的原因。

      [1]Li, M., Applications of metabolomics technology in traditional Chinese medicine treatment of non-alcoholic fatty liver disease. World Chinese Journal of Digestology, 2015. 23(7): p. 1045.

      [2]Zhu, W.-N., Application of metabonomics in research of in?ammatory bowel disease. World Chinese Journal of Digestology,2015. 23(13): p. 2084.

      [3]Wang, M.Q., X. Yang, L.H. Ren, S.T. Li, X. He, X.Y. Wu, T.T. Liu,L.Q. Lin, Y. LiC.H. Sun, Biomarkers Identified by Urinary Metabonomics for Noninvasive Diagnosis of Nutritional Rickets. Journal Of Proteome Research, 2014. 13(9): p. 4131-4142.

      [4]Li, X.Z., S.N. Zhang, F. Lu, C.F. Liu, Y. Wang, Y. Bai, N. WangS. M. Liu, Cerebral metabonomics study on Parkinson's disease mice treated with extract of Acanthopanax senticosus harms. Phytomedicine, 2013. 20(13): p. 1219-1229.

      Q95-3

      A

      1674-2060(2016)02-0323-01

      猜你喜歡
      丙酮酸代謝物組學(xué)
      丙酮酸的微生物發(fā)酵生產(chǎn)中的菌種篩選與改良
      優(yōu)化穩(wěn)定劑提高丙酮酸氧化酶穩(wěn)定性的研究
      阿爾茨海默病血清代謝物的核磁共振氫譜技術(shù)分析
      丙酮酸鈉藥理作用及其臨床應(yīng)用前景研究進(jìn)展
      口腔代謝組學(xué)研究
      基于UHPLC-Q-TOF/MS的歸身和歸尾補(bǔ)血機(jī)制的代謝組學(xué)初步研究
      柱前衍生化結(jié)合LC-MSn分析人尿中茶堿及其代謝物
      代謝組學(xué)在多囊卵巢綜合征中的應(yīng)用
      HPLC-MS/MS法分析乙酰甲喹在海參中的主要代謝物
      蛋白質(zhì)組學(xué)在結(jié)核桿菌研究中的應(yīng)用
      和田县| 民县| 辽中县| 古浪县| 浦城县| 宿州市| 公主岭市| 乐昌市| 兰坪| 荃湾区| 贺兰县| 观塘区| 台中县| 巫山县| 巫溪县| 永胜县| 云南省| 中江县| 会东县| 合江县| 肇庆市| 玉溪市| 兴安县| 武胜县| 九龙县| 平舆县| 武冈市| 合川市| 当雄县| 沅江市| 株洲县| 黄冈市| 延津县| 莱州市| 房山区| 湘阴县| 扬中市| 加查县| 乐平市| 色达县| 保定市|