田 偉，梁 淳，郭紅霞，郭勝利

（1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，056001；2河北省邯鄲市邯鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科，056001）

自身免疫病患者急性上呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果分析

田 偉1，梁 淳1，郭紅霞1，郭勝利2

（1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，056001；2河北省邯鄲市邯鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科，056001）

呼吸道病原體IgM抗體； 自身免疫?。?間接免疫熒光法

自身免疫?。ˋID）是一類機(jī)體自身免疫應(yīng)答失去控制平衡，產(chǎn)生針對(duì)自身組織免疫應(yīng)答，使相應(yīng)器官病變，從而引起臨床癥狀的一類疾病。自身免疫病患者由于需要大量并且長(zhǎng)期使用免疫抑制劑等藥物，從而引起細(xì)菌、真菌、病毒等一些病原微生物的感染率上升。本文對(duì)2015年1月至2015年12月已確診為自身免疫病并伴有呼吸道感染癥狀的315例患者，及未患風(fēng)濕免疫病的急性上呼吸道感染的2636例患者，進(jìn)行呼吸道病原體IgM抗體分析，研究自身免疫病患者呼吸道感染病原體的特征和發(fā)病規(guī)律，從而為臨床提供可靠地實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

資料與方法

1 一般資料

選擇2015年1月至2015年12月在邯鄲市中心醫(yī)院就診的急性上呼吸道感染，經(jīng)臨床明確診斷為患有自身免疫?。愶L(fēng)濕、系統(tǒng)性紅斑狼瘡）的患者315例。類風(fēng)濕（RA）診斷采用1987年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ACR）的RA分類標(biāo)準(zhǔn)［1］，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）診斷采用1982年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)關(guān)于SLE的分類標(biāo)準(zhǔn)［2］。其中男性80例，女性235例。同時(shí)選取2015年1月至2015年12月在我院就診的患有急性上呼吸道感染的患者為對(duì)照組，對(duì)2636例對(duì)照組臨床詢問(wèn)病史，排除患有自身免疫病史及家族史，其中男性1311例，女性1325例。自身免疫病患者患病季節(jié)為春季（3～5月）65例，夏季（6～8月）101例，秋季（9～11月）48例，冬季（12～2月）101例。以上2951例（包括AID患者和對(duì)照組）血象顯示均為淋巴細(xì)胞增高，全血CRP小于0.5mg/L（陰性），痰培養(yǎng)細(xì)菌陰性，臨床明確診斷為呼吸道感染［3］。

2 標(biāo)本采集及檢測(cè)

采集2mL肘靜脈血，3000 rpm離心10 min，收集血清，置于2～8℃冰箱待檢。采用間接免疫熒光法進(jìn)行呼吸道病原體11項(xiàng)檢測(cè)：呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADN）、流感病毒A型（IFA）、流感病毒B型（IFB）、副流感病毒（PINF）、嗜肺軍團(tuán)菌（Lp）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）、柯薩奇病毒A型 （CVA）、柯薩奇病毒 B型（CVB）、?？刹《荆‥CHO）。檢測(cè)試劑采用德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的呼吸道病原體譜IgM診斷試劑盒，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明書操作。儀器為奧林巴斯（OLYMPUS）熒光顯微鏡。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用百分率表示，組間計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1 11種呼吸道病原體IgM檢測(cè)結(jié)果

受檢病人2951例，IgM抗體呈陽(yáng)性1545例，總陽(yáng)性率52.36%。流感病毒B型檢出陽(yáng)性例數(shù)最多，為598例，肺炎支原體次之，為383例，肺炎衣原體第三，后三位的是柯薩奇病毒B型34例，嗜肺軍團(tuán)菌29例，腺病毒22例（見(jiàn)表1）。

表12951　例急性感染呼吸道病原體IgM抗體病人各種疾病患病例數(shù)表

2 自身免疫病人11種呼吸道病原體IgM檢測(cè)結(jié)果

315例自身免疫病患者中，IgM抗體呈陽(yáng)性187例，總陽(yáng)性率59.37%。，其中流感病毒B型檢出陽(yáng)性例數(shù)最多，為80例，肺炎支原體第二，為54例，肺炎衣原體第三，25例，后三位的是柯薩奇病毒A型2例，?？刹《?例，嗜肺軍團(tuán)菌1例，柯薩奇病毒B型未檢出（見(jiàn)表2）。

表2315　例自身免疫病人感染呼吸道病原體IgM抗體病人各種疾病患病例數(shù)表

3 呼吸道病原體IgM抗體各病毒檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

自身免疫病患病人群與對(duì)照組人群中呼吸道病原體IgM抗體各病毒檢測(cè)陽(yáng)性率的比較見(jiàn)表3。

從患病率來(lái)看，在患自身免疫病的人群中（n= 315），引起急性上呼吸道感染的病毒排在前三位的分別為流感病毒B（25.40%）、肺炎支原體（17.14%）和肺炎衣原體（7.94%）。在未患風(fēng)濕免疫病的人群中（n=2636），引起急性上呼吸道感染的病毒排在前三位的依然為流感病毒B型（19.65%）、肺炎支原體（12.48%）和肺炎衣原體（6.30%）。經(jīng)交叉表卡方檢驗(yàn)，是否患自身免疫疾病的兩組人群中，因流感病毒B型、支原體、柯薩奇病毒B型三種病毒的患病率，卡方值分別為5.749、5.414、4.110，對(duì)應(yīng)的P值分別為0.016、0.020、0.043，P均小于0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中，因流感病毒B型（25.40%）、肺炎支原體（17.14%）兩種病毒的患病率在患自身免疫病的群體中發(fā)病率較高，高于未患自身免疫病的人群；而柯薩奇病毒B型病毒在患自身免疫病人群中未檢出，在未患自身免疫病人群中的患病率為1.29%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其余各個(gè)病毒的患病率未受自身免疫病毒的影響，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 不同季節(jié)分組的各個(gè)病毒患病率的卡方檢驗(yàn)結(jié)果

對(duì)因肺炎衣原體病毒感染的患者按季節(jié)分組卡方檢驗(yàn)，卡方值為8.103，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明不同季節(jié)因肺炎衣原體病毒患病率存在差異。經(jīng)檢驗(yàn)，其他病毒并無(wú)季節(jié)性差異。進(jìn)一步做肺炎衣原體季節(jié)性兩兩比較，冬季和其他三個(gè)季節(jié)差異均顯著（P＜0.05），說(shuō)明，肺炎衣原體在冬季的患病率均顯著低于其他季節(jié)。見(jiàn)表4。

表4　自身免疫病的人群中不同季節(jié)各病毒檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

5 患自身免疫病的人群中對(duì)不同性別差異比較

由表5可見(jiàn)，患自身免疫病的人群中，因各個(gè)病毒的患病率在性別方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)（P＞0.05）。在男性中排名前三的為流感病毒B（17.5%）、肺炎支原體（13.8%）和肺炎衣原體（7.5%），女性中依然為流感病毒B（28.1%）、肺炎支原體（18.3%）和肺炎衣原體（8.1%）。

表5　自身免疫病的人群中不同性別間各病毒檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

6 自身免疫病的人群混合感染呼吸道病原體IgM抗體情況

315例患者中，其中檢測(cè)到一種呼吸道病原體IgM抗體的最多為89例，其次為兩種呼吸道病毒感染，為41例，說(shuō)明自身免疫病人群中感染一種和同時(shí)感染兩種呼吸道病毒的居多。卡方值為8.166，P=0.226，整體差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說(shuō)明是否患自身免疫病，對(duì)疾病混合感染情況無(wú)顯著影響。

表6　自身免疫病的人群呼吸道病原體IgM抗體

討論

呼吸道疾病成為現(xiàn)在人群中的高發(fā)病，并有逐年上升的趨勢(shì)。特別是近年來(lái)，我國(guó)北方地區(qū)霧霾日益嚴(yán)重，空氣質(zhì)量下降，呼吸道病毒的感染率呈現(xiàn)高發(fā)趨勢(shì)。根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，細(xì)菌感染的呼吸道疾病逐年下降，病毒、肺炎支原體、肺炎衣原體等非細(xì)菌性呼吸道感染的疾病近些年猛增，嚴(yán)重影響身體健康［4-5］。呼吸道感染的病原譜和感染率存在著地區(qū)上的差異［6-8］。

IgM抗體要先于IgG抗體出現(xiàn)，一般在感染后2～4天可在血清中檢測(cè)到［9］，可作為呼吸道病原體感染的早期診斷指標(biāo)。本文的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是自身免疫病組，還是對(duì)照組，其感染的前三位分別是流感病毒B型（IFB）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP），這與國(guó)內(nèi)外一些文獻(xiàn)報(bào)道相一致［10］?；加凶陨砻庖卟』颊吒腥旧鲜鋈N病毒與正常人群感染率有顯著差異（P＜0.05），感染率明顯高于正常人。分析其原因，可能與自身免疫病患者長(zhǎng)期使用甲氨蝶呤、硫唑嘌呤等免疫抑制劑，從而使機(jī)體免疫功能紊亂，免疫細(xì)胞應(yīng)答發(fā)生錯(cuò)誤有關(guān)，也與自身免疫病患者大量應(yīng)用激素、濫用抗生素等相關(guān)［11］。

在2951例急性呼吸道感染患者中，呼吸道病原體IgM檢出的陽(yáng)性率為52.36%，而在自身免疫病患者人群中，感染呼吸道病原體的陽(yáng)性率更是高達(dá)59.37%，這與國(guó)內(nèi)有些文獻(xiàn)報(bào)道不一致［7，12］。這可能北方地區(qū)受空氣質(zhì)量差、人口密度大等影響因素，呼吸道病原體感染情況更為嚴(yán)重。就315例自身免疫病患者來(lái)說(shuō)，肺炎衣原體的感染率受季節(jié)影響較大（P＜0.05），冬季感染率要低于其他三季，其他呼吸道病原體感染率受季節(jié)影響不大，這與其他文獻(xiàn)報(bào)道不一致。由于柯薩奇病毒B型在邯鄲地區(qū)一年四季幾乎沒(méi)有發(fā)病病例，所以未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（以表格中以橫線表示）。自身免疫病人群，一種呼吸道病原體感染的陽(yáng)性率要高于混合感染陽(yáng)性率，這也是此類人群感染的另一特征。自身免疫病人群呼吸道病毒感染無(wú)明顯男女性別差異，這與一些文獻(xiàn)報(bào)道一致［13］。有文獻(xiàn)報(bào)道，在呼吸道熒光片判讀中，特別是患有自身免疫病合并呼吸道病毒感染的患者中，類風(fēng)濕因子（RF）的存在會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)非特異熒光，造成結(jié)果的假陽(yáng)性［14］。本研究采用德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)的呼吸道病原體譜IgM診斷試劑盒，在標(biāo)本前處理方面，使用RF吸附劑（樣本稀釋液）首先處理待測(cè)標(biāo)本，經(jīng)過(guò)低速離心，提取上清液進(jìn)行熒光分析，可防止樣本中的IgM類類風(fēng)濕因子與特異性結(jié)合的IgG反應(yīng)導(dǎo)致的假陽(yáng)性，還可以防止特異性IgG與IgM發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合引起的假IgM陰性結(jié)果，同時(shí)去除類風(fēng)濕因子，從而有效的屏蔽了類風(fēng)濕因子和血清中其他蛋白的干擾，使檢驗(yàn)結(jié)果更加可靠。

呼吸道病原體IgM檢測(cè)，對(duì)指導(dǎo)臨床醫(yī)生在處理自身免疫病人合并呼吸道感染時(shí)有著極其重要的意義，從而減少濫用抗生素，指導(dǎo)臨床合理用藥。

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10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.034

2016-04-29；

2016-05-26