萬莉芳　萬　鐘　黃　平　劉秀英

（江西省南昌市洪都中醫(yī)院·330008）

紫背天葵解毒顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

萬莉芳萬鐘黃平劉秀英

（江西省南昌市洪都中醫(yī)院·330008）

目的：建立紫背天葵解毒顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:采用薄層色譜(TLC)法對方中梔子，黃連，金銀花進(jìn)行定性鑒別;采用高效液相色譜法測定方中梔子的有效成分梔子苷含量。結(jié)果：TLC斑點(diǎn)清晰、分離度好,陰性對照無干擾;梔子苷進(jìn)樣量在0.1521～1.1811μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系r=0.9998,平均回收率為101.2%,RSD=0.62%。結(jié)論：所建標(biāo)準(zhǔn)可靠，方法便捷、靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于紫背天葵解毒顆粒制劑的質(zhì)量控制。

紫背天葵解毒顆粒梔子苷綠原酸鹽酸小檗堿黃連對照藥材薄層色譜法高效液相色譜法

紫背天葵解毒方劑是我院傳統(tǒng)協(xié)定湯劑驗(yàn)方，我院將此傳統(tǒng)湯劑改為顆粒劑,具有質(zhì)量穩(wěn)定、吸收快、服用、攜帶、貯藏方便等優(yōu)點(diǎn)。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量,筆者對方中梔子的有效成分梔子苷的含量測定進(jìn)行研究,同時(shí)對具有專屬性成分的藥材梔子，黃連，金銀花薄層鑒別作為進(jìn)行定性鑒別研究。

1　儀器與試藥

（1）北京高效液相色譜儀；Q/BKYY31-2000電熱干燥箱；瑞士Precisa電子天平（XR205SM-DR）；CX-100型超聲波清洗機(jī)（中國北京市醫(yī)療設(shè)備二廠）；DKS-12型不銹鋼新型電熱恒溫水浴鍋（上海經(jīng)濟(jì)區(qū)沈蕩中新電器廠）。UV75/GD紫外/可見分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠）；ZF-I型三用紫外分析儀（滬藥器監(jiān)（準(zhǔn)）字91第340003號）；TG328A分析天平（上海精密天平儀器廠制造）

（2）梔子苷對照品（批號120927-201315）、綠原酸對照品（批號110721-200613）、鹽酸小檗堿（批號110721-201316）黃連對照藥材（批號0726-200208）均為中國藥品生物制品檢定所提供。

（3）乙腈為色譜純，水為純化水，試劑均為分析純。其余輔料符合藥用標(biāo)準(zhǔn)。

（4）紫背天葵解毒顆粒（南昌市洪都中醫(yī)院制劑中心，批號（150220150513150725）。

2　薄層色譜鑒別

梔子：取本品粉末1.0g，加50%甲醇10ml，超聲處理40分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。取梔子苷對照品，加乙醇制成每1ml含4mg是溶液，作為對照品溶液。照博層色譜法[1]（附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G博層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5:5:1:1）為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)

3　梔子苷含量測定

照高效液相色譜法[2]（附錄VID）測定

3.1色譜條件

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（15：85）為流動相；檢測波長為238nm；

3.2樣品的配制

取生梔子連翹黃連金銀花紫花地丁野菊花蒲公英紫背天葵白芷甘草等藥材加水煎煮兩次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，濾過，濾液合并，減壓濃縮至適量，噴霧干燥，加入蔗糖和糊精適量，混勻，制成顆粒，低溫干燥，包裝，即得。

3.3測定法

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

3.4線性關(guān)系考察

精密稱取梔子苷對照品14.0mg（批號120927-201315），置100ml量瓶中，加50%甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻,精密吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，各取20μl進(jìn)樣，按上述色譜條件測定，以峰面積對進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果梔子苷在0.1521～101811μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。r=0.9998。

3.5溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一份供試品溶液(批號150513)，分別于0h、4h、8h、16h、24h進(jìn)行了測定，RSD（%）=0.46，梔子苷在24小時(shí)內(nèi)的峰面積積分值基本穩(wěn)定不變。

3.6重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號供試品（批號：150513）細(xì)粉6份，各約1.2g，精密稱定，分別按含量測定項(xiàng)下方法操作，測定每份供試品含量，結(jié)果含量重復(fù)性試驗(yàn)梔子苷RSD（%）=0.62。

3.7加樣回收試驗(yàn)

精密稱取梔子苷50.2mg（批號120927-201315）置100ml量瓶中，加50%甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，備用。然后取同一批號的供試品（批號：150513）6份，各約0.6g，精密稱定，分別置6個(gè)錐形瓶中，其中2個(gè)錐形瓶中精密加入上述對照品溶液3.8ml；另2個(gè)錐形瓶中精密加入上述對照品溶液7.6ml；其余2個(gè)錐形瓶中精密加入上述對照品溶液11.4ml。再按[含量測定]項(xiàng)下的方法，精密加水-甲醇（50：50）至50ml，同法操作，測定每份供試品的含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表-1。

表-1　梔子苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

3.10含量測定

取樣品6批按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下方法及色譜條件測定,結(jié)果見表2.

表-2　樣中梔子苷量測定結(jié)果(mg/g)（n=6）

4　討論

紫背天葵解毒方劑是我院傳統(tǒng)協(xié)定湯劑驗(yàn)方，通過對處方中各味藥材的分析，找出了梔子黃連金銀花三種具有專屬性成分的藥材做為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中鑒別的試驗(yàn)對象以及對方中梔子的有效成分梔子苷的含量測定進(jìn)行研究。

紫背天葵解毒顆粒具有清熱解毒，消散疔瘡的功能。用于熱毒所致的疔瘡初起，癰疽，紅、腫、熱、痛等癥。西醫(yī)診斷之癤、蜂窩組織炎、急性淋巴結(jié)炎、流行性腮腺炎、化膿性腮腺炎、顏面丹毒、天皰瘡、膿皰瘡、滲出性皮膚病用本劑。將此傳統(tǒng)湯劑制成顆粒劑,具有質(zhì)量穩(wěn)定、吸收快、服用、攜帶、貯藏方便等優(yōu)點(diǎn),尤其在骨折病人術(shù)后愈合復(fù)原過程中預(yù)防傷口局部紅腫熱痛及對扭傷腫痛有顯著療效。在中醫(yī)外科治療瘡癤潰爛、丹毒、皰疹、疥癬痛癢等方面療效獨(dú)特，深受患者歡迎。

[1]國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄34.

[2]國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄36.

（2015-09-22收稿）