王紅梅，王和平，雷 旻，周高楓，張交生，彭寶玲，張銳沐，鄧?yán)^巋

(深圳市兒童醫(yī)院，廣東 深圳 518038)

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·論著·

深圳市兒童醫(yī)院兒童糞便分離的459株沙門菌分布特征及耐藥性

王紅梅，王和平，雷 旻，周高楓，張交生，彭寶玲，張銳沐，鄧?yán)^巋

(深圳市兒童醫(yī)院，廣東 深圳 518038)

目的 了解兒童糞便分離沙門菌的分布特征及耐藥情況。 方法 分析2012年1月—2015年10月某院患兒糞便標(biāo)本分離的沙門菌檢出情況，以及沙門菌血清型和對(duì)常用抗菌藥物的敏感性。 結(jié)果 7 047例患兒送檢糞便標(biāo)本，459例患兒檢出沙門菌，總檢出率為6.51%。沙門菌腸炎患兒男女比為2.4︰1，其中3歲以下兒童352例(占76.69%)；459株沙門菌中5—10月份檢出374株(占81.48%)，7、8、9月檢出數(shù)量最多，分別為72、84、78株。沙門菌血清型主要為B群(69.06%)和D群(19.39%)，分別以鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌血清型為主。未檢出耐亞胺培南和厄他培南的菌株，沙門菌屬對(duì)哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南和頭孢曲松的敏感率均>70%，腸炎沙門菌對(duì)頭孢類抗生素的敏感率低于鼠傷寒沙門菌，但對(duì)復(fù)方磺胺甲口惡唑的敏感率高于鼠傷寒沙門菌。結(jié)論 該院兒童糞便檢出的沙門菌主要分離自3歲以下嬰幼兒，夏秋季節(jié)高發(fā)，血清型以鼠傷寒和腸炎沙門菌為主，抗菌藥物治療要結(jié)合血清型及藥敏結(jié)果慎重選擇。

沙門菌； 血清型； 兒童； 糞便； 抗藥性，微生物；耐藥性； 流行病學(xué)特征

[Chin J Infect Control，2016，15(11)：817-820]

沙門菌是一類重要的人畜共患病原菌，是細(xì)胞內(nèi)寄生的革蘭陰性腸桿菌，在自然界廣泛存在，除可感染人外，還可感染很多動(dòng)物，受污染的動(dòng)物肉類、蛋類和奶制品等食品是沙門菌的主要感染源。兒童免疫力相對(duì)低下，是沙門菌的易感人群，學(xué)齡前兒童多見，主要表現(xiàn)為腸炎。文獻(xiàn)[1]報(bào)道，沙門菌血清型分布具有明顯的地區(qū)差異。本研究對(duì)深圳市兒童醫(yī)院2012年1月—2015年10月糞便分離的459株沙門菌進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 菌株來源 2012年1月—2015年10月從7 047例患兒送檢糞便標(biāo)本中培養(yǎng)的沙門菌，同一患兒分離的相同菌株只收集第一株菌。

1.2 儀器及試劑 血平皿、營養(yǎng)瓊脂、麥康凱和SS平皿購自鄭州安圖綠科生物工程有限公司，亞硒酸鹽胱氨酸增菌培養(yǎng)基(SC培養(yǎng)基)購自江門市凱林貿(mào)易有限公司，菌株的鑒定及藥敏試驗(yàn)為法國生物梅里埃公司VITEK 2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)，診斷血清(60種)為寧波天潤生物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品。

1.3 菌株分離培養(yǎng) 糞便標(biāo)本接種SC培養(yǎng)基、血平板、麥康凱和SS平皿，根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第三版)對(duì)可疑菌落進(jìn)行分離、純化，應(yīng)用VITEK 2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)進(jìn)行生化鑒定和藥敏試驗(yàn),按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2014年標(biāo)準(zhǔn)判定細(xì)菌的藥敏結(jié)果。

1.4 血清學(xué)分型 經(jīng)生化鑒定為沙門菌屬后，用沙門菌診斷血清確定血清型，生理鹽水作為陰性對(duì)照，傷寒沙門菌ATCC 14028為陽性對(duì)照。

1.5 質(zhì)控菌株 肺炎鏈球菌ATCC 49619、大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853和肺炎克雷伯菌ATCC 700603，均購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用WHONET 5.6軟件對(duì)沙門菌的藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 沙門菌檢出情況及患兒臨床資料 7 047例患兒送檢糞便標(biāo)本，共檢出沙門菌459株，總檢出率為6.51%，2015年檢出率最高(10.37%),見表1。5—10月份檢出沙門菌374株(占81.48%)，7、8、9月檢出數(shù)量最多，分別為72、84和78株，見表2。男性患兒檢出324株，女性患兒檢出135株，男女比例為2.4︰1，年齡分布1月～13歲，平均年齡(1.83±3.60)歲，其中<1歲年齡組最多，占35.95%，其次是1～2歲年齡組(占30.28%)，見表3。

表1 2012年1月—2015年10月某兒童醫(yī)院糞便標(biāo)本中沙門菌檢出情況

Table 1 Detection ofSalmonellafrom fecal specimens in a children’s hospital between January 2012 and October 2015

項(xiàng)目2012年2013年2014年2015年合計(jì)送檢標(biāo)本數(shù)10621273238823247047檢出菌株數(shù)5146121241459檢出率(%)4．803．615．0710．376．51

表2 2012年1月—2015年10月某兒童醫(yī)院各月糞便標(biāo)本中沙門菌檢出情況(株)

Table 2 Detection ofSalmonellafrom fecal specimens in a children’s hospital in each month between January 2012 and October 2015 (No. of isolates)

年份1月2月3月4月5月6月7月8月9月10月11月12月2012123331086752120130113147551054201426167121523815161020156264173042505826--合計(jì)91111162856728478562315

表3 糞便標(biāo)本檢出沙門菌的患兒年齡分布

Table 3 Age distribution of children who were isolatedSalmonellafrom feces

年齡(歲)株數(shù)構(gòu)成比(%)<116535．951～13930．282～4810．463～316．754～286．105～163．496～13326．97合計(jì)459100．00

2.2 血清型分布 沙門菌血清型主要為B群和D群，分別占69.06%和19.39%，分別以鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌血清型為主。見表4。

表4 2012—2015年某兒童醫(yī)院糞便標(biāo)本中459株沙門菌血清型分布

Table 4 Serotype distribution of 459 strains ofSalmonellafrom fecal specimens in a children’s hospital in 2012-2015

分群血清型株數(shù)(%)B317(69．06)鼠傷寒沙門菌176(38．34)沙門菌B群138(30．07)乙型副傷寒沙門菌 3(0．65)D89(19．39)腸炎沙門菌60(13．07)沙門菌D群28(6．10)傷寒沙門菌 1(0．22)C32(6．97)沙門菌C1群20(4．36)沙門菌C2群12(2．61)E 7(1．53)沙門菌E群 7(1．53)未明確分型14(3．05)沙門菌群14(3．05)

2.3 藥敏結(jié)果 檢測(cè)446株沙門菌對(duì)常用抗菌藥物的敏感率，未檢出耐亞胺培南和厄他培南菌株，沙門菌屬對(duì)哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南和頭孢曲松的敏感率均>70%，腸炎沙門菌對(duì)頭孢類抗生素的敏感性低于鼠傷寒沙門菌，但對(duì)復(fù)方磺胺甲口惡唑的敏感率高于鼠傷寒沙門菌。見表5。

表5 2012—2015年某兒童醫(yī)院糞便標(biāo)本中沙門菌對(duì)抗菌藥物的敏感情況(%，株)

Table 5 Antimicrobial susceptibility ofSalmonellafrom fecal specimens in a children’s hospital in 2012 - 2015(%, No. of isolates)

抗菌藥物鼠傷寒沙門菌(n=174)腸炎沙門菌(n=58)沙門菌屬(n=446)氨芐西林11．49(20)31．03(18)29．82(133)氨芐西林/舒巴坦11．49(20)36．21(21)33．63(150)哌拉西林/他唑巴坦90．23(157)100．00(58)95．74(427)頭孢他啶83．33(145)63．79(37)84．30(376)頭孢曲松71．84(125)63．79(37)78．70(351)頭孢吡肟85．63(149)68．97(40)87．00(388)氨曲南78．74(137)63．79(37)82．06(366)厄他培南100．00(174)100．00(58)100．00(446)亞胺培南100．00(174)100．00(58)100．00(446)復(fù)方磺胺甲口惡唑59．20(103)94．83(55)62．78(280)

3 討論

沙門菌是最常見的細(xì)菌食源性疾病的病原菌,在世界范圍內(nèi)引起許多成人和兒童發(fā)病及死亡。沙門菌的血清型超過2 600種，且不斷出現(xiàn)新的致病性血清型，沙門菌感染已成為一個(gè)重大的公共衛(wèi)生問題[1]。大部分沙門菌感染是食源性感染，也可通過接觸感染的動(dòng)物或直接的人際傳播獲得。沙門菌屬感染在臨床上可分為胃腸炎型或食物中毒型、敗血癥(傷寒型)和局部感染型,沙門菌腸炎是沙門菌感染的主要臨床表現(xiàn)，以兒童多見[2]。本研究中<3歲患兒占76.69%，6歲以上患兒檢出數(shù)明顯減少，提示3歲以下嬰幼兒胃腸功能尚未發(fā)育成熟，機(jī)體抵抗力差，為易感人群。發(fā)病季節(jié)以5—10月份多見，7、8、9月檢出最多，與文獻(xiàn)報(bào)道[2-4]相符。根據(jù)患兒發(fā)病年齡、病史和主要臨床表現(xiàn)，結(jié)合沙門菌感染的流行病學(xué)特征，考慮患兒發(fā)病可能是食品污染，主要集中在奶制品和冰箱內(nèi)儲(chǔ)存食品。沙門菌喜濕、耐寒、不耐熱，在水、乳類和肉制品中能生存數(shù)月，故在嬰幼兒喂養(yǎng)中應(yīng)盡量避免食用冰箱存儲(chǔ)食品，進(jìn)食煮透的肉制品。

本研究顯示2012—2015年腹瀉患兒糞便沙門菌檢出率由4.80%逐年增高至10.37%，與李樺等[3]研究相似；男性患兒多見，臨床表現(xiàn)主要為腹瀉、腹痛和發(fā)熱，部分患兒合并有呼吸道感染，有14例合并輪狀病毒感染,提示沙門菌腸炎存在與輪狀病毒混合感染的情況。

沙門菌血清型分布有地區(qū)差異。法國Montpellier大學(xué)一項(xiàng)為期4年的回顧性研究[4]顯示Languedoc-Roussillon地區(qū)兒童糞便分析和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)提示有2種主要的沙門菌血清型：鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌，與本研究結(jié)果一致，與珠海地區(qū)李樺等[3]研究也一致，但與中山地區(qū)楊曉華等[5]、浙江地區(qū)張建群等[6]的研究結(jié)果不同，提示沙門菌血清型分布可能有典型的地區(qū)差異，深圳與珠海地區(qū)濕潤溫暖，與Languedoc-Roussillon地區(qū)皆為臨海地區(qū)。氣候特點(diǎn)可能是沙門菌血清型在各地區(qū)分布不同的原因之一。

由于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)試劑的限制，2014年7月前本院僅能對(duì)沙門菌鑒定到群，不能鑒定到具體血清型，限制了統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)的完整性，之后采用的60種血清分型試劑檢測(cè)顯示大部分B群和D群沙門菌為鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌。

小兒沙門菌腸炎的治療主要是對(duì)癥處理，歐洲兒科傳染病學(xué)會(huì)推薦高危兒童使用抗菌藥物，以減少菌血癥和腸道外感染的風(fēng)險(xiǎn)，其中高危兒童包括新生兒、小嬰兒(<3個(gè)月)、免疫缺陷、解剖性或功能性無脾、糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑治療、炎癥性腸病或胃酸缺乏兒童；而抗菌藥物使用次數(shù)及劑量增加，導(dǎo)致病原菌耐藥性的增強(qiáng)則是目前沙門菌治療中的主要問題[7-12]。本組沙門菌對(duì)哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、頭孢他啶和頭孢曲松的敏感率較高，可經(jīng)驗(yàn)性用藥，未檢出對(duì)亞胺培南或厄他培南耐藥的菌株，但復(fù)方磺胺甲口惡唑的敏感率僅62.78%，需明確血清型和具體菌株的藥敏結(jié)果再?zèng)Q定是否使用；對(duì)氨芐西林/舒巴坦的敏感率已低至33.63%，不適于臨床治療。鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌血清型對(duì)藥物敏感性略有區(qū)別，腸炎沙門菌對(duì)頭孢類抗生素的敏感性低于鼠傷寒沙門菌，但對(duì)復(fù)方磺胺甲口惡唑的敏感率高于鼠傷寒沙門菌，與潘惠芳等[11]研究一致，提示臨床對(duì)沙門菌腸炎患兒的抗菌藥物治療需結(jié)合血清型及藥敏結(jié)果慎重選擇。

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(本文編輯：豆清婭)

Distribution characteristics and antimicrobial resistance of 459 strains of Salmonella isolated from feces of children in Shenzhen Children’s Hospital

WANG Hong-mei, WANG He-ping, LEI Min，ZHOU Gao-feng, ZHANG Jiao-sheng, PENG Bao-ling, ZHANG Rui-mu, DENG Ji-kui

(ShenzhenChildren’sHospital,Shenzhen518038,China)

Objective To understand the distribution characteristics and antimicrobial resistance ofSalmonellaisolated from feces of children. MethodsSalmonellawere isolated from fecal specimens of children in a hospital between January 2012 and October 2015, serotypes and susceptibility ofSalmonellato commonly used antimicrobial agents were analyzed. Results A total of 7 047 children’s fecal specimens were detected, 459 (6.51%) children were isolatedSalmonella, the ratio of male to female was 2.4∶1, 352 (76.69%) children were less than 3 years old; 374 strains (81.48%) were isolated from May to October, the numbers of stains isolated in July, August, and September were 72, 84, and 78 respectively.Salmonellagroup B and group D were the most common serotypes, accounting for 69.06% and 19.39% respectively, most were serotypes ofSalmonellatyphimurium(S.typhimurium) andSalmonellaenteritidis(S.enteritidis). No imipenem- or ertapenem-resistant strains were found, susceptibility ofSalmonellato piperacillin/tazobactam, cefepime, ceftazidime, aztreonam, and ceftriaxone were all>70%, susceptibility rate ofS.enteritidisto cephalosporins was lower thanS.typhimurium, but to compound sulfamethoxazole was higher thanS.typhimurium. ConclusionSalmonellaare mainly isolated from children less than 3 years old in this hospital, summer and autumn are peak seasons, the main serotypes wereS.typhimuriumandS.enteritidis, antimicrobial therapy should be carefully selected in combination with serotypes and antimicrobial susceptibility testing result.

Salmonella; serotype; child; feces; drug resistance,microbial; drug resistance; epidemiological characteristic

2015-12-22

深圳市科技研發(fā)資金(JCYJ20160429175723608)；深圳市兒童醫(yī)院重點(diǎn)?？瀑Y助項(xiàng)目(szetyy-zdzk-2015-gr)

王紅梅(1979-)，女(漢族)，陜西省寶雞市人，副主任技師，主要從事臨床微生物學(xué)感染與診斷研究。

鄧?yán)^巋 E-mail: djikui20212@sina.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2016.11.003

R378.2+2

A

1671-9638(2016)11-0817-04