火麻仁油、藻油混合油軟膠囊對(duì)高膽固醇血癥動(dòng)物模型血脂及脂質(zhì)過(guò)氧化的影響

陳 鵬，鄧乾春，臧茜茜，孟露曦，張 逸，黃鳳洪

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所/油料脂質(zhì)化學(xué)與營(yíng)養(yǎng)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430062)

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火麻仁油、藻油混合油軟膠囊對(duì)高膽固醇血癥動(dòng)物模型血脂及脂質(zhì)過(guò)氧化的影響

陳 鵬，鄧乾春，臧茜茜，孟露曦，張 逸，黃鳳洪

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所/油料脂質(zhì)化學(xué)與營(yíng)養(yǎng)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430062)

目的：探討火麻仁油、藻油混合油軟膠囊對(duì)高膽固醇血癥大鼠血脂及脂質(zhì)過(guò)氧化的影響。方法：50只大鼠隨機(jī)分為5組，分別是空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、火麻仁油藻油低劑量組(85mg/kg)、火麻仁油藻油中劑量組(170mg/kg)、火麻仁油藻油高劑量組(340mg/kg)，飼喂以高脂飼料及不同劑量火麻仁油藻油，測(cè)大鼠體重、脂肪，計(jì)算Lee’s指數(shù)、脂體比，檢測(cè)血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)，以及血清和肝臟中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。結(jié)果：與正常組相比，模型組大鼠體重、Lee’s指數(shù)、腎脂體比、睪脂體比、總脂體比顯著增加(P<0.01或P<0.05)，TG、TC、LDL-C含量顯著升高，HDL-C顯著降低(P<0.01或P<0.05)，血清和肝臟中MDA顯著升高，SOD顯著降低(P<0.01或P<0.05)。與模型組比較，火麻仁油、藻油高、中劑量組大鼠體重、睪脂肪比、腎周脂肪比、總脂體比顯著降低，TG、TC、LDL-C含量顯著降低，HDL-C顯著升高(P<0.01或P<0.05)，血清和肝臟中MDA含量顯著降低，SOD活性升高(P<0.01或P<0.05)。結(jié)論：對(duì)于高膽固醇血癥模型大鼠，中、高劑量火麻仁油、藻油混合油的攝入能夠有效起到調(diào)節(jié)血脂、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化學(xué)作用。

火麻仁油；藻油；高膽固醇血癥；脂質(zhì)過(guò)氧化

高膽固醇血癥屬于代謝性疾病，該疾病的發(fā)生與生活環(huán)境、飲食習(xí)慣、遺傳因素等密切相關(guān)，主要特征表現(xiàn)為血液中膽固醇和低密度脂蛋白的升高，是導(dǎo)致冠心病、心肌梗死、腦卒中等心腦血管疾病發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素。隨著人民生活水平的提高，目前高膽固醇血癥的患病率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢(shì)，而降低低密度脂蛋白和膽固醇有助于降低心腦血管疾病的發(fā)生率和死亡率[1，2]。目前一般采用西醫(yī)藥物進(jìn)行降脂，雖療效顯著，但是大多存在一定的毒副作用，不宜長(zhǎng)期服用，停藥甚至可能會(huì)引發(fā)反彈，因此開(kāi)發(fā)出安全可信的食源性中藥制劑治療高脂血癥成為目前的研究熱點(diǎn)[3，4]。已有的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)顯示，火麻仁油和藻油均可以調(diào)節(jié)血脂以及抑制脂質(zhì)過(guò)氧化[5-7]，在提倡營(yíng)養(yǎng)均衡全面的大健康產(chǎn)業(yè)下，作為時(shí)下較為熱門(mén)的2種功能油脂，未有兩者進(jìn)行混合搭配使用的相關(guān)研究，火麻仁油含有較豐富的ω-3類多不飽和脂肪酸α-亞麻酸、藻油含有豐富的ω-3類多不飽和脂肪酸二十二碳六烯酸(DHA)，兩者的脂肪酸組成存在較大的差別，兩者配伍研究的缺乏這也在一定程度上制約了兩者在產(chǎn)品中的搭配使用。本實(shí)驗(yàn)以高膽固醇大鼠作為研究對(duì)象，通過(guò)觀察不同劑量的火麻仁油藻油混合油軟膠囊對(duì)大鼠血脂及氧化應(yīng)激酶的調(diào)節(jié)，探討其對(duì)高膽固醇血癥動(dòng)物模型血脂及脂質(zhì)過(guò)氧化可能產(chǎn)生的影響以及劑量效應(yīng)，對(duì)于這2種不同功能油脂的搭配應(yīng)用具有積極的現(xiàn)實(shí)意義及參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及藥物

Wistar雄性大鼠(6w)50只，SPF級(jí)，體重200±20 g。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證：第420006000000710，許可證號(hào)：SCXK(鄂)2008-0005，湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。受試物由火麻仁油、藻油(1∶4，w∶w)為主要原料混合而成，其中含α-亞麻酸約40mg/g、二十碳五烯酸(EPA)+二十二碳六烯酸(DHA)約270mg/g。各組臨用前取至少20粒軟膠囊，將內(nèi)容物盡量擠出，取適量?jī)?nèi)容物與聚山梨酯80混合(油：聚山梨酯80為20∶1，w∶w)，根據(jù)大鼠給藥容積為1mL/100g加水配置成乳化混懸液。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組

實(shí)驗(yàn)設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、火麻仁油藻油低劑量組(85mg/kg)、火麻仁油藻油中劑量組(170mg/kg)、火麻仁油藻油高劑量組(340mg/kg)，共5組。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

高膽固醇飼料由普通鼠飼料88.7%、膽固醇1%、豬油 10 % 和膽酸鈉0.3% 組成，模型飼料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、磷、鈣：磷均要達(dá)到維持飼料的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

大鼠維持飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)5d，查隨機(jī)數(shù)字表按體重隨機(jī)分成2組，空白對(duì)照組10只大鼠給予維持飼料，模型對(duì)照組40只給予模型飼料喂養(yǎng)。模型對(duì)照組給予模型飼料2w后，空白對(duì)照組和模型組大鼠不禁食眼內(nèi)眥采血測(cè)定血脂，并根據(jù)TC水平將模型對(duì)照組隨機(jī)分成4組，分組后各模型對(duì)照組比較血脂水平差異均無(wú)顯著性。分組后連續(xù)灌胃3w，在各劑量組灌胃的同時(shí)，模型對(duì)照組和空白對(duì)照組給予同體積的蒸餾水灌胃，空白對(duì)照組給予維持飼料，模型對(duì)照組及各給藥組繼續(xù)給予模型飼料，于實(shí)驗(yàn)結(jié)束測(cè)定血脂水平、血清和肝臟丙二醛(MDA) 含量、超氧化物歧化酶(SOD) 活性，方法參考《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范2003年版》。3%戊巴比妥鈉麻醉，測(cè)量大鼠體長(zhǎng)，計(jì)算Lee’s指數(shù)，取肝臟、腎周及附睪周圍脂肪組織，稱重。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 體質(zhì)量、Lee’s指數(shù)、脂體比比較

與正常組相比，模型組大鼠的體質(zhì)量、Lee’s指數(shù)明顯增高，且腎及附睪周圍脂肪組織顯著增多。與模型組相比，中、高劑量混合油均可顯著降低高膽固醇血癥動(dòng)物大鼠的Lee’s指數(shù)、總脂體比以及減少大鼠附睪周圍脂肪組織的增加。中、高劑量混合油減少高膽固醇血癥動(dòng)物大鼠體質(zhì)量和腎臟周圍脂肪組織的增加及降低總脂體比的作用顯著(表1)。

表1 各組大鼠體質(zhì)量、Lee’s指數(shù)、脂體比的比較

注：與空白對(duì)照組比較，★P<0.05、★★P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05、▲▲P<0.01

2.2 血脂生化指標(biāo)比較

與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠血清TG、TC含量顯著升高，HDL-C顯著降低、LDL-C顯著增高；與模型組比較，混合油中、高劑量組大鼠血清TG 含量顯著降低、TC含量升高，HDL-C 含量顯著升高。這表明火麻仁油藻油混合油對(duì)高膽固醇血癥動(dòng)物模型大鼠具有顯著的降血脂作用(表2)。

2.3 MDA、SOD比較

模型組血清與肝臟MDA均高于空白對(duì)照組，而SOD 活力均降低，有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。與模型組比較，火麻仁油藻油中、高劑量組大鼠MDA含量顯著降低，SOD含量顯著升高(P<0.01 或P<0.05)。綜上表明，火麻仁油藻油混合油對(duì)于高膽固醇血癥動(dòng)物模型大鼠可以有效抑制脂質(zhì)過(guò)氧化(表3)。

表2 各組血脂生化指標(biāo)的比較

注：與空白對(duì)照組比較，★P<0.05、★★P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05、▲▲P<0.01

表3 各組MDA、SOD的比較

注：與空白對(duì)照組比較，★P<0.05、★★P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05、▲▲P<0.01

3 結(jié)論與討論

綜上研究數(shù)據(jù)我們可以了解到，高脂攝入的模型大鼠體重、Lee’s指數(shù)、腎脂體比、睪脂體比、總脂體比顯著增加，TG、TC、LDL-C含量顯著升高，HDL-C顯著降低，血清和肝臟中MDA顯著升高，SOD活性顯著降低。低劑量的火麻仁油藻油混合油的攝入對(duì)上述危險(xiǎn)趨勢(shì)無(wú)顯著改善效應(yīng)，而中、高劑量的混合油對(duì)于高膽固醇血癥動(dòng)物模型大鼠增重、Lee’s指數(shù)、腎脂體比、睪脂體比、總脂體比改善明顯，甘油三酯、膽固醇明顯降低，高密度脂蛋白升高，同時(shí)在2種劑量下觀察到高膽固醇血癥動(dòng)物模型大鼠血清和肝臟中SOD活力顯著增高、MDA降低明顯。

高膽固醇血癥是指血漿中膽固醇和低密度脂蛋白濃度增高，出現(xiàn)脂質(zhì)代謝異常的高脂血癥中的一種[8]，并且造成血管內(nèi)皮細(xì)胞損失，因此，高膽固醇血癥是心肌梗死、腦卒中等動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的危險(xiǎn)閑素之一，也是引起心血管疾病發(fā)病率上升的主要因素。降低血漿脂質(zhì)水平、改善脂質(zhì)代謝情況、阻止脂質(zhì)過(guò)氧化的發(fā)生、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化產(chǎn)生一定的延緩與抑制作用，從而改善患者生存質(zhì)量，對(duì)減少心血管疾病發(fā)生具有重要意義[9-11]。

總膽固醇、甘油三脂及低、高密度脂蛋白膽固醇是高膽固醇血癥的4個(gè)重要指標(biāo)，低密度和高密度膽固醇是膽固醇的兩種存在形式，高密度膽固醇對(duì)血管有保護(hù)作用，低密度膽固醇偏高會(huì)使冠狀動(dòng)脈心臟病的危險(xiǎn)因素增加。高膽固醇水平易產(chǎn)生氧化應(yīng)激，從而導(dǎo)致低密度脂蛋白的化學(xué)修飾[12]。機(jī)體在氧化應(yīng)激狀態(tài)下，脂蛋白磷脂逐漸被氧化，致使動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程加速[13]。丙二醛與低密度脂蛋白結(jié)合成復(fù)合物，其復(fù)合物對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞造成較強(qiáng)的損傷，使細(xì)胞內(nèi)膽固醇堆積并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞，造成動(dòng)脈粥樣硬化早期病變。脂質(zhì)過(guò)氧化物對(duì)膽固醇酯酶活性的抑制也有助于膽固醇的沉積，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的形成和進(jìn)一步發(fā)展[9]。MDA是膜脂過(guò)氧化的主要產(chǎn)物，能反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的程度，SOD是機(jī)體內(nèi)清除氧自由基的抗氧化酶系統(tǒng)中的一種重要酶，兩者的變化可反映抗氧化能力。已有研究顯示，高膽固醇血癥大鼠同時(shí)伴有血清 MDA 含量增加，血清SOD 活力下降[10]。

研究表明，藻油可以調(diào)節(jié)血脂并可增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化酶活性，降低因高脂飼料引起的小鼠脂質(zhì)過(guò)氧化[7]?；鹇槿视妥鳛榇舐楦稍锍墒旃麑?shí)的功能脂質(zhì)，富含不飽和脂肪酸，具有廣泛的食用及藥用價(jià)值，不僅能夠降脂，還能夠減輕了血管壁內(nèi)皮細(xì)胞的損傷及平滑肌細(xì)胞的增生，從而起到抗動(dòng)脈硬化及抗衰老的作用[11]。

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)研究，我們驗(yàn)證得到了高脂飼養(yǎng)動(dòng)物模型大鼠會(huì)產(chǎn)生諸如血清 MDA 含量增加，血清SOD 活力下降等一系列的不利趨勢(shì)。而對(duì)于本文研究的火麻仁油藻油(1：4，w：w)混合油，在服用之后對(duì)于上述趨勢(shì)各劑量組均發(fā)生利好變化，但相比于中高劑量組的顯著變化而言，低劑量的混合油收效甚微，由此我們可以推斷，本實(shí)驗(yàn)配比的火麻仁油藻油混合油具有調(diào)節(jié)血脂、抑制脂質(zhì)氧化的作用，且當(dāng)達(dá)到一定劑量后效果顯著提升，而且在本攝入范圍內(nèi)療效與劑量呈現(xiàn)正相關(guān)，對(duì)于兩種油脂的綜合使用具有較大的參考價(jià)值?！?/p>

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(責(zé)任編輯 李婷婷)

Effects of Hemp Seed Oil and Algae Oil Soft Capsule on Blood Lipid Lipid Peroridation in Hypercholesterolemic Animal Model

CHEN Peng，DENG Qian-chun，ZANG Xi-xi，MENG Lu-xi，ZHANG Yi，HUANG Feng-hong

(Oilcrops Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences/Hubei Key Laboratory of Lipid Chemistry and Nutrition，Wuhan 430062，China)

ObjectiveTo investigate the effect of hemp seed oil and algal oil soft capsule on blood lipid and Lipid Peroridation in hypercholesterolemia rats.Method Totally 50 rats were divided into 5 groups，the blank control group，model control group，fire hemp seed oil and algal oil low dose group (85mg/kg)，fire hemp seed oil and algal oil medium dose group(170mg/kg)，fire hemp seed oil and algal oil high dose group (340mg/kg).After fed with high fat diet and different doses of hemp seed oiland algal oil，rat body weight，body fat，the calculation of Lee ’s index，body fat ratio and detection of serumtotal cholesterol(TC)，triglyceride(TG)，low density lipoprotein cholesterol(LDL)，high density lipoprotein cholesterol (HDL-C)，malondialdehyde (MDA) content and superoxide dismutase (SOD) activity in serum and liver were measured.ResultCompared with the normal group，model group rats’body weight，Lee ’s index，kidney fat body ratio，epididymal fat body ratio，total body fat ratio increased significantly (P<0.05 orP<0.05)，and the levels of TG，TC，LDL-C were significantly increased，HDL-C decreased significantly (P<0.05 orP<0.05)，in serum and liver MDA were significantly increased，SOD was significantly lower (P<0.05 orP<0.05).ConclusionMiddle and high doses of hemp seed oil could algae oil can regulate blood lipids and depress lipid peroxidation.

hemp seed oil；algae oil；hypercholesterolemia；lipid peroxidation

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所所長(zhǎng)基金(項(xiàng)目編號(hào)：1610172014006)；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程 (項(xiàng)目編號(hào)：CAAS-ASTIP-2013-OCRI)。

陳鵬(1987— )，男，碩士研究生，研究方向：天然產(chǎn)物與功能脂質(zhì)。

黃鳳洪(1965— )，男，博士，研究員，研究方向：功能脂質(zhì)與營(yíng)養(yǎng)。