包 巖，方繼良，賈術(shù)永，張金鈴，賀 毅，高 波，李遠(yuǎn)競，佟海濱，趙 青，劉 歡，何 勛，張今朝，朱秀玲，榮培晶，梁繁榮

（1.中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院a放射科b核醫(yī)學(xué)科c超聲科，北京 100053；2.中國中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所，北京 100700；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬安貞醫(yī)院放射科，北京100029；4.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075）

經(jīng)驗交流

針灸治療慢性心肌缺血模型豬綜合影像評價優(yōu)化方案

包 巖1a，方繼良1a，賈術(shù)永2，張金鈴2，賀 毅3，高 波1b，李遠(yuǎn)競1c，佟海濱1a，趙 青1a，劉 歡1a，何 勛2，張今朝1a，朱秀玲1a，榮培晶2，梁繁榮4

內(nèi)關(guān)穴；針刺；小豬慢性缺血心臟模型；診斷顯像

冠心病是一種嚴(yán)重威脅人類健康和生命的疾病，具有較高的致殘率和死亡率。心肌缺血是引起冠心病的常見病因。目前關(guān)于綜合影像學(xué)評價中華小型豬慢性心肌缺血已有相關(guān)報道，但缺乏心電圖、心肌缺血白蛋白等指標(biāo)，以及 MRI的T1mapping、CT冠脈成像的綜合評價報道，特別是缺乏針灸治療慢性心肌缺血前后的多項評價指標(biāo)的報道。本實驗選用中華小型豬23只，行超聲心動圖、心電圖、實驗室檢查及CT、MRI心臟成像后，于冠狀動脈左前降支近中段交界區(qū)置入蛋白縮窄環(huán)；4周時，建立慢性心肌缺血模型，行第2次上述檢查，最后針刺前肢內(nèi)關(guān)穴和（或）后肢足三里穴治療；2周后，行第3次上述檢查。本文將討論這些評價指標(biāo)綜合應(yīng)用優(yōu)化的實驗方案［1-3］，給相關(guān)研究者提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選用健康中華小型豬23只，體質(zhì)量在18～25 kg，年齡≤1齡。所有動物研究完全符合國家《實驗動物管理條例》，經(jīng)阜外心血管病醫(yī)院動物實驗倫理委員會批準(zhǔn)（批號：2013-1-25-973）。實驗中死亡8只（造模前2只、造模型后6只）。

1.2 麻醉方案 肌內(nèi)注射氯胺酮（劑量0.28 mL/kg體質(zhì)量）與戊巴比妥鈉（劑量15 mg/kg體質(zhì)量），或戊巴比妥鈉（劑量15 mg/kg體質(zhì)量）與速眠新Ⅱ（劑量0.1 mL/kg體質(zhì)量）2種方法。

1.3 心電圖 采用12導(dǎo)全心電圖，記錄各導(dǎo)聯(lián)的缺血情況［4］。

1.4 超聲心動圖 采用彩色超聲診斷儀（HITACHI Ascendus）檢測左心功能及形態(tài)。

1.5 實驗室檢查 采前腔靜脈血，檢測血清CK-MB、IMA、cTnT、AngⅡ，檢測缺血狀態(tài)［5-7］。

1.6 MRI掃描 使用Siemens Skyra 3.0 T MRI掃描儀及心臟序列。查閱相關(guān)資料，測試2只后，得到優(yōu)化方案，先行心臟定位掃描：行二腔心、四腔心及短軸位的定位；再行心臟電影：四腔心、兩腔心及短軸位心底-心尖8層，檢測心功能及運(yùn)動狀態(tài)；T1maping：短軸位心尖-乳頭肌-心底部3層，兩腔心1層；負(fù)荷心肌灌注掃描：藥物ATP使用參照0.15 mg·min-1·kg-1比例泵入，3 min 30 s開始MRI掃描，共6 min；掃描同時高壓注射對比劑Gd-DTPA（劑量0.1 mL/kg體質(zhì)量），流率5 mL/s，鹽水20 mL，掃描左室短軸3層，四腔心1層，連續(xù)50次，從平掃到強(qiáng)化掃描，檢測心肌血供狀態(tài)；復(fù)制心臟電影層面，延遲開始時追加對比劑（劑量0.1 mL/kg體質(zhì)量），流率2 mL/s，20 mL鹽水；延遲10 min后，檢測心肌延遲強(qiáng)化顯像，心肌缺血、壞死或纖維化情況［8-10］。

1.7 CT掃描 使用Siemens Flash第2代雙源64排CT機(jī)。試驗5只后，獲得優(yōu)化方案，先分別行冠狀位、矢狀位定位像掃描；再行鈣化積分掃描，觀察偽影情況，發(fā)現(xiàn)偽影時，及時調(diào)整電極片；與心臟MRI一樣方式行ATP微量泵入，3 min 30 s后，同時高壓注射碘海醇（370 mgI/mL）30 mL，流率3 mL/s，再以同樣流率注入0.9%氯化鈉注射液10 mL沖管；ATP注射液繼續(xù)泵入到6 min注射完畢，高壓注射碘海醇時行雙能量心肌增強(qiáng)掃描；延遲5 min，再行增強(qiáng)掃描后靜息時行雙能量心臟掃描［9，11-12］。

1.8 埋針方法 取右側(cè)內(nèi)關(guān)穴（實驗組）或后足三里穴（對照組），先電針20 min，后埋針。通過測試開始的2只豬，發(fā)現(xiàn)由于小豬的皮膚較厚，無法使用常規(guī)針具達(dá)到穴位的刺激作用，遂自制針具進(jìn)行埋針。將7號埋線針的內(nèi)芯取出，用95%酒精消毒；將內(nèi)芯截取為每段1.5 cm，用砂紙把所截取內(nèi)芯的2段打磨光滑；將處理好的內(nèi)芯泡在75%的醫(yī)用酒精中待用。用鑷子夾取一段已經(jīng)消毒備用的內(nèi)芯，從針孔放置在穿刺針套管的前端（9號），從套管尾孔插入一段針芯。右手持針柄，左手夾住套管中下段，將針刺入皮膚后，快速刺入皮下或肌層；退針后，用碘酒消毒針孔，并用消毒紗布包扎好。

2 結(jié)果

本實驗23只小型豬，死亡8只，15只行影像學(xué)檢查，其中12只心臟MRI掃描順利，占80%；14只心臟雙能量CT掃描成功，占93%，其中5只采用超聲心臟掃描，均檢查順利。心臟綜合影像學(xué)檢查成功的小豬中，90%圖像清晰度達(dá)到診斷需要。

3 討論

3.1 麻醉注意事項 ①實驗前12 h禁食水，以免在實驗中嘔吐。②氯胺酮與戊巴比妥鈉聯(lián)合應(yīng)用效果最佳，從實驗的麻醉效果看，小型豬在注射麻藥后數(shù)分鐘均進(jìn)入麻醉狀態(tài)，且蘇醒所需時間短，對呼吸、心率影響較小。③在缺少氯胺酮時，采用戊巴比妥鈉與速眠新Ⅱ聯(lián)合，注意戊巴比妥鈉配制時間不易太久，否則易出現(xiàn)結(jié)晶，影響麻醉效果，建議實驗前5 h內(nèi)配制。④麻醉后注意保暖，因速眠新Ⅱ影響體溫，如不注意保暖易引起麻醉意外。⑤戊巴比妥鈉與速眠新Ⅱ2種藥物不能用同一注射器、注射部位也不能過近，否則會產(chǎn)生凝結(jié)現(xiàn)象而失效，影響麻醉效果。⑥戊巴比妥鈉與速眠新Ⅱ聯(lián)合應(yīng)用時，應(yīng)注意觀察小型豬呼吸情況，因戊巴比妥鈉影響呼吸，如發(fā)現(xiàn)呼吸淺快，應(yīng)注射解毒劑或行胸部按壓輔助呼吸，以免發(fā)生麻醉意外。

3.2 心電圖經(jīng)驗 ①備皮要干凈，因小型豬前胸壁欠規(guī)則，必要時需人工按壓電極片緊貼小豬前胸壁。②掃描開始因小豬心電T波高尖，CT或MRI心電門控技術(shù)常誤認(rèn)為R波，出現(xiàn)一次心跳算2次假高心率狀態(tài)，心電突發(fā)異常，舒張期和收縮期分界不清，圖像重建出現(xiàn)雙期重影現(xiàn)象，此時須換另一種心電門控方式直到觸發(fā)正常。③掃描時，如出現(xiàn)心率突然變快或紊亂，應(yīng)即刻停止掃描，經(jīng)藥物穩(wěn)定心率后繼續(xù)掃描。④需采用專用MRI心臟電極片，否則有磁性易導(dǎo)致心電不穩(wěn)或檢測不到心電。

3.3 CT掃描技術(shù)優(yōu)化 ①試驗豬在行CCTA前經(jīng)過藥物處理后，使心率穩(wěn)定在60～80次/min；②雖無法進(jìn)行嚴(yán)格的屏氣準(zhǔn)備，但呼吸幅度不是太大，除去呼吸指令的延時時間，可更加有效追蹤到對比劑到達(dá)冠脈主干位置。

3.4 MRI掃描優(yōu)化 豬的心臟結(jié)構(gòu)雖與人類似，但其心房心室更加平行于身體冠狀面，定位時應(yīng)注意。

3.5 超聲心動圖注意事項 在探頭檢測處，備皮要干凈，保障耦合劑與探頭接觸良好。

3.6 實驗掃描順序優(yōu)化 實驗中個別小豬先行CT掃描，后行MRI掃描，結(jié)果發(fā)現(xiàn)圖像質(zhì)量不佳，可能因為MRI掃描時間長，受心律和心率影響更大；CT掃描時間短，受心律和心率影響較小，圖像質(zhì)量易得到保障。因此，之后均先行MRI檢查再行CT掃描。

3.7 取穴方法 取右側(cè)內(nèi)關(guān)穴或足三里穴。取穴方法應(yīng)結(jié)合比較解剖學(xué)，采用類似人體經(jīng)穴取穴法。

總之，本實驗采取心臟MRI、心臟CT、超聲心動圖、心電圖及血清心肌酶測定多種方法探索針灸治療慢性心肌缺血模型豬的療效，故實驗難度明顯增加，實驗流程復(fù)雜且較長。優(yōu)化實驗方案后，實驗成功率、圖像質(zhì)量明顯提高，結(jié)果較穩(wěn)定。

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2016-12-07）

10.3969/j.issn.1672-0512.2017.02.043

科技部重點(diǎn)課題973項目（2012CB518503）；國家自然科學(xué)基金面上項目（81273674）。

方繼良，E-mail：fangmgh@163.com；榮培晶，E-mail：drrongpj@163.com。