祝靈平， 陳秀， 何蘊(yùn)藉， 周思穎， 鐘山亮， 趙建華， 唐金海

環(huán)狀 RNA (circular RNA， circRNA) 在哺乳動(dòng)物中廣泛表達(dá)。許多研究表明，環(huán)狀RNA與胃癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、食管癌、肝癌和卵巢癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有直接或間接的關(guān)系。不少文獻(xiàn)也證實(shí)環(huán)狀RNA可調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后基因的表達(dá)，可與蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)而影響細(xì)胞周期進(jìn)程、細(xì)胞衰老和凋亡等生命活動(dòng)。隨著RNA 測(cè)序技術(shù)和生物學(xué)分析的發(fā)展，不僅越來(lái)越多的環(huán)狀RNA被發(fā)現(xiàn)，而且其具體的作用機(jī)制也逐漸被人們所熟知，環(huán)狀RNA有望成為一種新穎的疾病診斷標(biāo)志物。本文通過綜合國(guó)內(nèi)外有關(guān)環(huán)狀RNA的研究進(jìn)展，對(duì)環(huán)狀RNA發(fā)展歷史、起源、主要特征、功能及其參與腫瘤發(fā)展進(jìn)行概述。

1 環(huán)狀RNA的發(fā)展歷史

1976年，Sanger等[1]發(fā)現(xiàn)，類病毒基因組由單鏈、閉合RNA分子構(gòu)成，類病毒能侵染植株并導(dǎo)致其死亡，而死亡植株體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了類病毒的基因組RNA。1979年，洛克菲勒大學(xué)Hsu 和 Coca-Prados 在電子顯微鏡下觀察到真核細(xì)胞的胞質(zhì)中有環(huán)狀RNA的存在[2]。1993年，Capel等[3]在小鼠精子決定基因Sry中發(fā)現(xiàn)環(huán)狀RNA轉(zhuǎn)錄過程。2006年，Houseley等[4]在果蠅中發(fā)現(xiàn)來(lái)自Muscleblind的未知環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本。2012年，Salzman等[5]通過RNA-Seq方法首次報(bào)道80個(gè)環(huán)狀RNA。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，大量環(huán)狀RNA分子被相繼發(fā)現(xiàn)。Jeck等[6]在人類成纖維細(xì)胞中檢測(cè)出 25 000多種環(huán)狀RNA；而Memczak等[7]通過結(jié)合RNA-seq數(shù)據(jù)和人白細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定出1 950種人類環(huán)狀RNA、1 903種小鼠環(huán)狀RNA (其中81種與人類環(huán)狀RNA相同) 和724種線蟲環(huán)狀RNA。

2 環(huán)狀RNA的起源和特征

環(huán)狀RNA的種類和形式多種多樣，可以起源于基因組序列中任何區(qū)域，且同一基因位置產(chǎn)生的環(huán)狀RNA也可以是不同類型[7-11]。不同于線性RNA，環(huán)狀RNA是一組3’和5’ 端反向剪接形成共價(jià)閉合的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，稱為“backsplicing”[9， 12-15]。根據(jù)來(lái)源主要分為3類：內(nèi)含子序列形成的環(huán)狀RNA (circular intronicRNA， ciRNA)，外顯子序列形成的環(huán)狀RNA(exonic circular RNA， ecircRNA) 以及內(nèi)含子和外顯子序列共同形成的環(huán)狀RNA (exon-intron circular RNA， EIciRNA)[8，10， 16-17]。外顯子環(huán)狀RNA可以由一個(gè)或者多個(gè)外顯子序列組成，主要存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，而內(nèi)含子環(huán)狀RNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi)[18-19]。由于環(huán)狀RNA呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)，沒有5’—3’的極性和多聚腺苷酸尾巴，故不易被核酸外切酶RNaseR降解，比線性RNA更穩(wěn)定，進(jìn)化也是保守的[20-21]。環(huán)狀RNA廣泛存在于人體細(xì)胞中，其數(shù)量甚至超過線性RNA的10倍。環(huán)狀RNA具有組織和疾病特異性，在腦組織的含量高，尤其是神經(jīng)突觸中[5-6，22-23]。也有研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)狀RNA在細(xì)胞外泌體中富集，其可能機(jī)制是環(huán)狀RNA不易被降解，可通過細(xì)胞分泌細(xì)胞外囊泡途徑釋放到胞外[24-25]。

3 環(huán)狀RNA的功能

一直認(rèn)為，環(huán)狀RNA是一種mRNA錯(cuò)誤剪接體，是一類沒有功能的結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)期被忽視[3， 10， 26]。隨著轉(zhuǎn)錄本研究的深入和RNA測(cè)序技術(shù)發(fā)展，環(huán)狀RNA功能慢慢被了解。它們主要參與 miRNA 海綿吸附、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、結(jié)合蛋白質(zhì)、翻譯和剪接等 5個(gè)方面的調(diào)節(jié)[27-33]。據(jù)報(bào)道，環(huán)狀RNA在多種疾病(如心血管疾病[34]、阿爾茨海默病[35-36]、帕金森[37]等)和肝癌[38]、胃癌[39]、食管癌[40]、結(jié)腸癌[41]等腫瘤中發(fā)揮重要作用，參與這些疾病生理病理調(diào)節(jié)過程[42]。

3.1 環(huán)狀RNA在腫瘤組織中異常表達(dá) 環(huán)狀RNA在腫瘤組織中異常表達(dá)，與癌旁組織相比，環(huán)狀RNA hsa_circ_002059[43]、hsa_circ_0000096[39]、has_circ_0001649[44]表達(dá)水平在胃癌組織中下調(diào)，而circPVT1[45]在胃癌組織中高表達(dá)。Hsa_circ_0000069[46]、hsa_circ_001569[47]、circ-BANP[41]表達(dá)水平在結(jié)腸癌組織中明顯上調(diào)，而hsa_circ_001988[48]在結(jié)腸癌中低表達(dá)。Zhong等[49]在膀胱癌組織芯片中發(fā)現(xiàn)circTCF25高表達(dá)。Hsa_circ_0067934[40]在食管癌組織中上調(diào)，而cir-ITCH[50]在食管鱗癌組織中明顯下調(diào)。 Xuan等[51]發(fā)現(xiàn)，hsa_circRNA_100855在喉癌組織中上調(diào)，而hsa_circRNA_104912在喉癌組織中下調(diào)。同樣有研究發(fā)現(xiàn)hsa_circ_0005075[52]、circZKSCAN1[53]在肝癌組織中上調(diào)。

3.2 環(huán)狀RNA參與腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移、凋亡 環(huán)狀RNA在癌癥研究領(lǐng)域備受關(guān)注，多項(xiàng)研究表明，他們可以通過相關(guān)信號(hào)通路來(lái)影響細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)移和凋亡等發(fā)展過程。例如，叉形頭盒 O3 環(huán)狀 RNA(circRNA-forkhead box O3， circ-Foxo3) 能與缺氧誘導(dǎo)因子 (hypoxia inducible factor 1α， HIF1α) 和局部粘著斑激酶 (focal adhesion kinase， FAK) 相結(jié)合，這些蛋白質(zhì)被捕獲，它們的功能無(wú)法發(fā)揮，從而促進(jìn)細(xì)胞衰老。circ-Foxo3能 與 細(xì) 胞 周 期 蛋 白 依 賴 性 激 酶 2 (cyclindependent kinase 2， CDK2) 和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑 p21 形成三元復(fù)合物抑制 CDK2 的活性，將細(xì)胞阻滯在 G1/S 期，影響細(xì)胞周期進(jìn)展，抑制細(xì)胞增殖[54-55]。circHIPK3可以海綿吸附miR-124調(diào)節(jié)基因如蛋白磷酸酶調(diào)節(jié)分子(protein phosphatase 1 regulatory subunit 13 like，iASPP)影響腫瘤細(xì)胞增殖[56-57]。此外，長(zhǎng)非編碼RNA和環(huán)狀RNA可以在mRNA和蛋白水平上調(diào)節(jié)mir-671誘導(dǎo)上調(diào)凋亡相關(guān)因子caspase8和p38表達(dá)，促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡[58]。早幼粒細(xì)胞白血病/視黃酸受體α(promyelocytic leukemia/retinoic acid receptorα，PML/RARA)和酸甲基轉(zhuǎn)移酶2A(lysine methyltransferase 2A，MLL)基因融合、生產(chǎn)環(huán)狀RNA(f-circm9和f-circpr)被敲除后會(huì)導(dǎo)致大量腫瘤細(xì)胞凋亡[59]。cir-ITCH可結(jié)合miR-7和miR-214增強(qiáng)E3泛素蛋白連接酶(itchy E3 ubiquitin protein ligase ，ITCH)表達(dá)，從而抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路[50]。同時(shí)，cZNF292下調(diào)被證實(shí)有助于降低核因子κb(nuclear factorκB，NF-κB)、轉(zhuǎn)錄因子E2F transcription factor 1(E2F1)、Sp1 transcription factor(SP1)、hypoxia inducible factor 1(HIF-1)、AP-1transcription factor subunit(AP-1)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子5(signal transducer and activator of transcription 5，STAT5)，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[60-61]。環(huán)狀RNA表達(dá)受到許多癌癥相關(guān)通路和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，包括磷脂酰肌醇3激酶/Akt(Phosphoinositide 3-Kinase/Akt ，PI3K/Akt)和NFκB，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factorβ，TGF-β)等[62]。環(huán)狀RNA可能在腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[46， 53， 63]。

4 環(huán)狀RNA可能成為新型的腫瘤診斷及治療標(biāo)志物

隨著RNA測(cè)序和其他檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用，我們注意到，環(huán)狀RNA在許多腫瘤中差異表達(dá)現(xiàn)象很普遍，包括食管癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、肝細(xì)胞癌等腫瘤中環(huán)狀RNA的表達(dá)。Li等[24]發(fā)現(xiàn)，外泌體中環(huán)狀RNA(exosome circRNA， exo-circRNA)含量比細(xì)胞豐富，且性質(zhì)穩(wěn)定，而血清中多種 exo-circRNA 在癌癥患者和健康人中具有明顯差異表達(dá)，環(huán)狀RNA可通過外泌體傳遞某種信號(hào)到遠(yuǎn)處靶細(xì)胞，從而可以初步實(shí)現(xiàn)腫瘤患者的早期診斷和鑒別診斷。由于環(huán)狀RNA比線性RNA更穩(wěn)定，起源于易種植腫瘤，環(huán)狀RNA可以貯存在細(xì)胞囊泡中通過胞吐方式釋放進(jìn)入血液循環(huán)，使得環(huán)狀RNA在臨床創(chuàng)傷小、易于獲得的采集體液 (如唾液、 血液等)中更容易被檢測(cè)和被提取[64-65]。這些特點(diǎn)為環(huán)狀RNA成為腫瘤診斷和靶向治療標(biāo)志物提供了臨床優(yōu)勢(shì)。環(huán)狀RNA有可能成為人類腫瘤中理想分子標(biāo)志物，用于某些腫瘤的靶向治療。

5 環(huán)狀RNA的應(yīng)用與挑戰(zhàn)

環(huán)狀RNA可通過調(diào)控miRNA間接實(shí)現(xiàn)其功能，環(huán)狀RNA 與miRNA 之間既存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系又存在協(xié)同關(guān)系，可以把環(huán)狀RNA作為靶標(biāo)來(lái)調(diào)控miRNA，進(jìn)而調(diào)控一系列生命活動(dòng)，他們之間的平衡對(duì)生物體至關(guān)重要。目前，雖然已有大量證據(jù)證明環(huán)狀RNA參與基因的表達(dá)調(diào)控、腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程，但環(huán)狀RNA大部分功能還是未知的，且探索環(huán)狀RNA的工具也是有限的，因此更深入研究將面臨著挑戰(zhàn)。

[1] Sanger HL， Klotz G， Riesner D， et al. Viroids are single-stranded covalently closed circular RNA molecules existing as highly base-paired rod-like structures[J]. Proc Natl Acad Sci U S A， 1976，73(11):3852-3856.

[2] Hsu MT， Coca-Prados M. Electron microscopic evidence for the circular form of RNA in the cytoplasm of eukaryotic cells[J]. Nature， 1979，280(5720):339-340.

[3] Capel B， Swain A， Nicolis S， et al. Circular transcripts of the testis-determining gene Sry in adult mouse testis[J]. Cell， 1993，73(5):1019-1030.

[4] Houseley JM， Garcia-Casado Z， Pascual M， et al. Noncanonical RNAs from transcripts of the Drosophila muscleblind gene[J]. J Hered， 2006，97(3):253-260.

[5] Salzman J， Gawad C， Wang PL， et al. Circular RNAs are the predominant transcript isoform from hundreds of human genes in diverse cell types[J]. PLoS One， 2012，7(2):e30733.

[6] Jeck WR， Sorrentino JA， Wang K， et al. Circular RNAs are abundant， conserved， and associated with ALU repeats[J]. RNA， 2013，19(2):141-157.

[7] Memczak S， Jens M， Elefsinioti A， et al. Circular RNAs are a large class of animal RNAs with regulatory potency[J]. Nature， 2013，495(7441):333-338.

[8] Chen I， Chen CY， Chuang TJ. Biogenesis， identification， and function of exonic circular RNAs[J]. Wiley Interdiscip Rev RNA， 2015，6(5):563-579.

[9] Chen LL， Yang L. Regulation of circRNA biogenesis[J]. RNA Biol， 2015，12(4):381-388.

[10] Shen T， Han M， Wei G， et al.An intriguing RNA species-perspectives of circularized RNA[J].Protein Cell，2015，6(12):871-880.

[11] Zhang Y， Zhang XO， Chen T， et al. Circular intronic long noncoding RNAs[J]. Mol Cell， 2013，51(6):792-806.

[12] Cocquerelle C， Mascrez B， Hétuin D， et al. Mis-splicing yields circular RNA molecules[J]. FASEB J， 1993，7(1):155-160.

[13] Sun X， Wang L， Ding J， et al. Integrative analysis of Arabidopsis thaliana transcriptomics reveals intuitive splicing mechanism for circular RNA[J]. FEBS Lett， 2016，590(20):3510-3516.

[14] Suzuki H， Aoki Y， Kameyama T， et al. Endogenous Multiple Exon Skipping and Back-Splicing at the DMD Mutation Hotspot[J]. Int J Mol Sci， 2016，17(10). pii: E1722.

[15] Zhang XO， Dong R， Zhang Y， et al. Diverse alternative back-splicing and alternative splicing landscape of circular RNAs[J]. Genome Res， 2016，26(9):1277-1287.

[16] Starke S， Jost I， Rossbach O， et al. Exon circularization requires canonical splice signals[J]. Cell Rep， 2015，10(1):103-111.

[17] Zhang XO， Wang HB， Zhang Y， et al. Complementary sequence-mediated exon circularization[J]. Cell， 2014，159(1):134-147.

[18] Westholm JO， Miura P， Olson S， et al. Genome-wide analysis of drosophila circular RNAs reveals their structural and sequence properties and age-dependent neural accumulation[J]. Cell Rep， 2014，9(5):1966-1980.

[19] Talhouarne GJ， Gall JG. Lariat intronic RNAs in the cytoplasm of Xenopus tropicalis oocytes[J]. RNA， 2014，20(9):1476-1487.

[20] Suzuki H， Zuo Y， Wang J， et al. Characterization of RNase R-digested cellular RNA source that consists of lariat and circular RNAs from pre-mRNA splicing[J]. Nucleic Acids Res， 2006，34(8):e63.

[21] Suzuki H， Tsukahara T. A view of pre-mRNA splicing from RNase R resistant RNAs[J]. Int J Mol Sci， 2014，15(6):9331-9342.

[22] Rybak-Wolf A， Stottmeister C， Gla?ar P， et al. Circular RNAs in the Mammalian Brain Are Highly Abundant， Conserved， and Dynamically Expressed[J]. Mol Cell， 2015，58(5):870-885.

[23] Xia S， Feng J， Lei L， et al. Comprehensive characterization of tissue-specific circular RNAs in the human and mouse genomes[J]. Brief Bioinform， 2016，pii: bbw081. [Epub ahead of print] .

[24] Li Y， Zheng Q， Bao C， et al. Circular RNA is enriched and stable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis[J]. Cell Res， 2015，25(8):981-984.

[25] Lasda E， Parker R. Circular RNAs Co-Precipitate with Extracellular Vesicles: A Possible Mechanism for circRNA Clearance[J].PLoS One， 2016，11(2):e0148407.

[26] Nigro JM， Cho KR， Fearon ER， et al. Scrambled exons[J]. Cell， 1991，64(3):607-613.

[27] Ebert MS， Sharp PA. MicroRNA sponges: progress and possibilities[J]. RNA， 2010，16(11):2043-2050.

[28] Ebert MS， Sharp PA. Emerging roles for natural microRNA sponges[J]. Curr Biol， 2010，20(19):R858-861.

[29] Hansen TB， Jensen TI， Clausen BH， et al. Natural RNA circles function as efficient microRNA sponges[J]. Nature， 2013，495(7441):384-388.

[30] Chen LL. The biogenesis and emerging roles of circular RNAs[J]. Nat Rev Mol Cell Biol， 2016，17(4):205-211.

[31] Dudekula DB， Panda AC， Grammatikakis I， et al. CircInteractome: A web tool for exploring circular RNAs and their interacting proteins and microRNAs[J]. RNA Biol， 2016，13(1):34-42.

[32] Schneider T， Hung LH， Schreiner S， et al. CircRNA-protein complexes: IMP3 protein component defines subfamily of circRNPs[J]. Sci Rep， 2016，6:31313.

[33] Yang Y， Fan X， Mao M， et al. Extensive translation of circular RNAs driven by N(6)-methyladenosine[J]. Cell Res， 2017，27(5):626-641.

[34] Wang K， Long B， Liu F， et al. A circular RNA protects the heart from pathological hypertrophy and heart failure by targeting miR-223[J]. Eur Heart J， 2016，37(33):2602-2611.

[35] Zhao Y， Alexandrov PN， Jaber V， et al. Deficiency in the Ubiquitin Conjugating Enzyme UBE2A in Alzheimer’s Disease (AD) is Linked to Deficits in a Natural Circular miRNA-7 Sponge (circRNA; ciRS-7)[J]. Genes (Basel)， 2016，7(12). pii: E116.

[36] Lukiw WJ. Circular RNA (circRNA) in Alzheimer’s disease (AD)[J]. Front Genet， 2013，4:307.

[37] Junn E， Lee KW， Jeong BS， et al. Repression of alpha-synuclein expression and toxicity by microRNA-7[J]. Proc Natl Acad Sci U S A， 2009，106(31):13052-13057.

[38] Xu L， Zhang M， Zheng X， et al. The circular RNA ciRS-7 (Cdr1as) acts as a risk factor of hepatic microvascular invasion in hepatocellular carcinoma[J]. J Cancer Res Clin Oncol， 2017，143(1):17-27.

[39] Li P， Chen H， Chen S， et al. Circular RNA 0000096 affects cell growth and migration in gastric cancer[J]. Br J Cancer， 2017，116(5):626-633.

[40] Xia W， Qiu M， Chen R， et al. Circular RNA has_circ_0067934 is upregulated in esophageal squamous cell carcinoma and promoted proliferation[J]. Sci Rep， 2016，6:35576.

[41] Zhu M， Xu Y， Chen Y， et al. Circular BANP， an upregulated circular RNA that modulates cell proliferation in colorectal cancer[J]. Biomed Pharmacother， 2017，88:138-144.

[42] Hansen TB， Kjems J， Damgaard CK. Circular RNA and miR-7 in cancer[J]. Cancer Res， 2013，73(18):5609-5612.

[43] Li P， Chen S， Chen H， et al. Using circular RNA as a novel type of biomarker in the screening of gastric cancer[J]. Clin Chim Acta， 2015，444:132-136.

[44] Li WH， Song YC， Zhang H， et al. Decreased Expression of Hsa_circ_00001649 in Gastric Cancer and Its Clinical Significance[J]. Dis Markers， 2017，2017:4587698.

[45] Chen J， Li Y， Zheng Q， et al. Circular RNA profile identifies circPVT1 as a proliferative factor and prognostic marker in gastric cancer[J]. Cancer Lett， 2017，388:208-219.

[46] Guo JN， Li J， Zhu CL， et al. Comprehensive profile of differentially expressed circular RNAs reveals that hsa_circ_0000069 is upregulated and promotes cell proliferation， migration， and invasion in colorectal cancer[J]. Onco Targets Ther， 2016，9:7451-7458.

[47] Xie H， Ren X， Xin S， et al. Emerging roles of circRNA_001569 targeting miR-145 in the proliferation and invasion of colorectal cancer[J]. Oncotarget， 2016，7(18):26680-26691.

[48] Wang X， Zhang Y， Huang L， et al. Decreased expression of hsa_circ_001988 in colorectal cancer and its clinical significances[J]. Int J Clin Exp Pathol， 2015，8(12):16020-16025.

[49] Zhong Z， Lv M， Chen J. Screening differential circular RNA expression profiles reveals the regulatory role of circTCF25-miR-103a-3p/miR-107-CDK6 pathway in bladder carcinoma[J]. Sci Rep， 2016，6:30919.

[50] Li F， Zhang L， Li W， et al. Circular RNA ITCH has inhibitory effect on ESCC by suppressing the Wnt/β-catenin pathway[J].Oncotarget，2015，6(8):6001-6013.

[51] Xuan L， Qu L， Zhou H， et al. Circular RNA: a novel biomarker for progressive laryngeal cancer[J]. Am J Transl Res， 2016，8(2):932-939.

[52] Shang X， Li G， Liu H， et al. Comprehensive Circular RNA Profiling Reveals That hsa_circ_0005075， a New Circular RNA Biomarker， Is Involved in Hepatocellular Crcinoma Development[J]. Medicine (Baltimore)， 2016，95(22):e3811.

[53] Yao Z， Luo J， Hu K， et al. ZKSCAN1 gene and its related circular RNA (circZKSCAN1) both inhibit hepatocellular carcinoma cell growth， migration， and invasion but through different signaling pathways[J]. Mol Oncol， 2017，11(4):422-437.

[54] Du WW， Yang W， Liu E， et al. Foxo3 circular RNA retards cell cycle progression via forming ternary complexes with p21 and CDK2[J]. Nucleic Acids Res， 2016，44(6):2846-2858.

[55] Yang W， Du WW， Li X， et al. Foxo3 activity promoted by non-coding effects of circular RNA and Foxo3 pseudogene in the inhibition of tumor growth and angiogenesis[J]. Oncogene， 2016，35(30):3919-3931.

[56] Chen J， Xiao H， Huang Z， et al. MicroRNA124 regulate cell growth of prostate cancer cells by targeting iASPP[J]. Int J Clin Exp Pathol， 2014，7(5):2283-2290.

[57] Zheng Q， Bao C， Guo W， et al. Circular RNA profiling reveals an abundant circHIPK3 that regulates cell growth by sponging multiple miRNAs[J]. Nat Commun， 2016，7:11215.

[58] Nan A， Chen L， Zhang N， et al. A novel regulatory network among LncRpa， CircRar1， MiR-671 and apoptotic genes promotes lead-induced neuronal cell apoptosis[J]. Arch Toxicol， 2017，91(4):1671-1684.

[59] Guarnerio J， Bezzi M， Jeong JC， et al. Oncogenic Role of Fusion-circRNAs Derived from Cancer-Associated Chromosomal Translocations[J]. Cell， 2016，165(2):289-302.

[60] Boeckel JN， Jaé N， Heumüller AW， et al. Identification and Characterization of Hypoxia-Regulated Endothelial Circular RNA[J]. Circ Res， 2015，117(10):884-890.

[61] Yang P， Qiu Z， Jiang Y， et al. Silencing of cZNF292 circular RNA suppresses human glioma tube formation via the Wnt/β-catenin signaling pathway[J].Oncotarget，2016，7(39):63449-63455.

[62] Ahmed I， Karedath T， Andrews SS， et al. Altered expression pattern of circular RNAs in primary and metastatic sites of epithelial ovarian carcinoma[J]. Oncotarget， 2016，7(24):36366-36381.

[63] Xin Z， Ma Q， Ren S， et al. The understanding of circular RNAs as special triggers in carcinogenesis[J]. Brief Funct Genomics， 2017，16(2):80-86.

[64] Memczak S， Papavasileiou P， Peters O， et al. Identification and Characterization of Circular RNAs As a New Class of Putative Biomarkers in Human Blood[J]. PLoS One， 2015，10(10):e0141214.

[65] Bahn JH， Zhang Q， Li F， et al. The landscape of microRNA， Piwi-interacting RNA， and circular RNA in human saliva[J]. Clin Chem， 2015，61(1):221-230.