潘繼釗 黃海深 朱苑霞 張朝棟

廣東省東莞市黃江醫(yī)院，廣東東莞 523750

探討三種EB病毒抗體檢測(cè)在鼻咽癌篩查中的臨床價(jià)值

潘繼釗 黃海深 朱苑霞 張朝棟

廣東省東莞市黃江醫(yī)院，廣東東莞 523750

目的研究探討三種EB病毒抗體檢測(cè)在鼻咽癌篩查中的臨床價(jià)值。方法抽取2014年9月～2015年9月我院耳鼻喉科收集的經(jīng)病理診斷確診為鼻咽癌的患者100例作為研究對(duì)象，并以同期合并鼻咽部癥狀到我院就診的非鼻咽癌患者500例、接受健康體檢的正常人1000例作為對(duì)照，采用酶聯(lián)免疫吸附法分別對(duì)三組受檢者的三種EB病毒抗體進(jìn)行測(cè)定，比較三組受檢者的檢出陽(yáng)性率，同時(shí)對(duì)不同EB病毒抗體單獨(dú)或聯(lián)合診斷鼻咽癌的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值等進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果三組不同受檢者的VCA-IgA、EA-IgA以及Rta-IgG檢測(cè)陽(yáng)性率比較有鼻咽癌組患者＞對(duì)照Ⅰ組患者＞對(duì)照Ⅱ組正常人的情況，且鼻咽癌組患者各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果與其他兩組對(duì)照組的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。不同EB病毒的檢測(cè)結(jié)果比較，則有鼻咽癌組VCA-IgA和Rta-IgG顯著高于EA-IgA，而對(duì)照組受檢者VCAIgAG顯著高于EA-IgA和Rta-IgG的情況，比較差異顯著。三種EB病毒診斷鼻咽癌的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值比較均有聯(lián)合診斷結(jié)果均高于每種EB病毒單獨(dú)診斷時(shí)的結(jié)果，除陽(yáng)性預(yù)測(cè)值略低外（但聯(lián)合診斷的提升效果最為顯著），均達(dá)到95%以上。結(jié)論聯(lián)合三種EB病毒抗體的血清學(xué)診斷有利于鼻咽癌的有效篩查，頗具臨床應(yīng)用價(jià)值。

EB病毒抗體；鼻咽癌；篩查；應(yīng)用價(jià)值

鼻咽癌是我國(guó)南方地區(qū)比較常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，其源于鼻咽部上皮組織，具有起病隱匿、早期無(wú)典型癥狀的特點(diǎn)[1-3]，而且在青壯年男性群體中有較高的發(fā)病率。調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，患者不僅有較高的誤漏診率，而且五年生存率僅為34%～50%[4]，死亡率也比較高，早期正確診斷具有十分重要的意義[5-6]。本研究抽取2014年9月～2015年9月我院耳鼻喉科收集的經(jīng)病理診斷確診為鼻咽癌的患者100例作為研究對(duì)象，旨在通過(guò)對(duì)三種不同的EB病毒抗體（VCA-IgA、EA-IgA以及Rta-IgG）檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行測(cè)定，分析其在鼻咽癌篩查中的臨床價(jià)值。具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取2014年9月～2015年9月我院耳鼻喉科收集的經(jīng)病理診斷確診為鼻咽癌的患者100例作為研究對(duì)象，其中，男69例，女31例，患者年齡18～79歲，平均為（49.4±5.2）歲。

以同期合并鼻咽部癥狀到我院就診的非鼻咽癌患者500例、接受健康體檢的正常人1000例作為對(duì)照，分別設(shè)為對(duì)照Ⅰ組和對(duì)照Ⅱ組。對(duì)照Ⅰ組中，男293例，女207例，患者年齡18～81歲，平均為（50.4±4.5）歲；對(duì)照Ⅱ組中，男612例，女388例，受檢者年齡18～80歲，平均為（50.1±5.4）歲。

三組受檢者的性別、年齡等一般資料的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

標(biāo)本采集與處理：在清晨空腹條件下，采集所有受檢者的靜脈血液標(biāo)本4～5mL，將其常規(guī)靜置30min，待血液凝固后，行離心處理，離心速度為3000r/min，離心時(shí)間為10min，將獲得的上層血清保存在-20℃ 的冰箱中，待檢。

三種EB病毒抗體的檢測(cè)均采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），VCA-IgA、EA-IgA均購(gòu)自德國(guó)歐蒙公司生產(chǎn)、Rta-IgG檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京同昕生物技術(shù)有限公司、檢測(cè)儀器為熱電公司生產(chǎn)的MK 3型酶標(biāo)儀，操作需要嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行。在450nm波長(zhǎng)下對(duì)不同抗體的吸光度值進(jìn)行測(cè)定，其中，當(dāng)VCA-IgA、EA-IgA的相對(duì)吸光度值（rOD=標(biāo)本OD/校準(zhǔn)品OD）在1.1及以上時(shí)視為陽(yáng)性，當(dāng)Rta-IgG的吸光度值（標(biāo)本OD值）在0.11及以上時(shí)視為陽(yáng)性[7-8]。

比較三組受檢者三種不同EB病毒抗體的檢出陽(yáng)性率，同時(shí)對(duì)不同EB病毒抗體單獨(dú)或聯(lián)合診斷鼻咽癌的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值等進(jìn)行計(jì)算。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別受檢者的EB病毒抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較

對(duì)三組不同受檢者的VCA-IgA、EA-IgA以及Rta-IgG檢測(cè)陽(yáng)性率分別進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果均有鼻咽癌組患者＞對(duì)照Ⅰ組患者＞對(duì)照Ⅱ組正常人的情況，且鼻咽癌組患者各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果與其他兩組對(duì)照組的比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。不同EB病毒的檢測(cè)結(jié)果比較，則有鼻咽癌組VCAIgA和Rta-IgG顯著高于EA-IgA，而對(duì)照組受檢者VCA-IgAG顯著高于EA-IgA和Rta-IgG的情況，比較差異顯著。見(jiàn)表1。

表1 不同組別受檢者的三種EB病毒抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較

2.2 不同組別受檢者的EB病毒抗體分布情況統(tǒng)計(jì)

表2為對(duì)三組不同受檢者的VCA-IgA、EAIgA以及Rta-IgG的分布情況，據(jù)此計(jì)算三種EB病毒診斷鼻咽癌的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值，可見(jiàn)聯(lián)合診斷結(jié)果均高于每種EB病毒單獨(dú)診斷時(shí)的結(jié)果，除陽(yáng)性預(yù)測(cè)值略低外（但聯(lián)合診斷的提升效果最為顯著），均達(dá)到95%以上。見(jiàn)表3。

3 討論

目前鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，一般認(rèn)為有三個(gè)最主要的因素可能參與鼻咽癌的發(fā)生過(guò)程，包括：（1）遺傳因素，如不正常的人類(lèi)白細(xì)胞抗原（HLA）基因；（2）病毒因素，研究認(rèn)為EB病毒早期感染和長(zhǎng)期反復(fù)感染會(huì)導(dǎo)致鼻咽部上皮永生化，并使其進(jìn)一步惡化；（3）環(huán)境因素，體外實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為，香煙煙霧提取物促進(jìn)EBV的復(fù)制，吸煙不僅可以增加個(gè)人鼻咽癌患病率而且可以在健康男性的血清中參與EBV的激活。其中，EB病毒感染在鼻咽癌的發(fā)生于發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮這十分重要的作用已經(jīng)得到大量研究的證實(shí)，在鼻咽癌患者的血清中均可以檢測(cè)得到抗EB病毒抗體，且抗體譜較廣[9-11]，人群中比較常見(jiàn)EB病毒抗體包括了針對(duì)EBV早期抗原的抗體EA-IgA、針對(duì)衣殼抗原的抗體的VCA-IgA、針對(duì)Rta蛋白的抗體ZRta-IgG、針對(duì)ZTA蛋白的抗體Zta-IgA、針對(duì)核抗原的抗體NA1-IgA等，其多屬于分泌型抗體[12-13]，有研究認(rèn)為這些EB病毒抗體與鼻黏膜的免疫功能息息相關(guān)[14-16]。

表2 不同組別受檢者的EB病毒抗體分布比較

表3 三種EB病毒診斷鼻咽癌的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值統(tǒng)計(jì)比較[%（n/n）]

本研究對(duì)100例鼻咽癌患者和1500例非鼻咽癌受檢者的三種EB病毒抗體進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果均有鼻咽癌患者檢測(cè)陽(yáng)性率高于非鼻咽癌患者的情況，特別是VCA-IgA和Rta-IgG，在檢測(cè)靈敏度上，均在90%上下，與EA-IgA相比明顯提高。但在非鼻咽癌受檢者中，又存在合并鼻咽部癥狀的非鼻咽癌患者VCA-IgA檢出率顯著高于健康志愿者的情況，則在檢出特異性的比較上，VCA-IgA的效果不如EA-IgA和Rta-IgG。提示，不同檢測(cè)指標(biāo)在鼻咽癌篩查過(guò)程中各有優(yōu)缺點(diǎn)，特別是每項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)診斷時(shí)，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值都不是很高（VCA-IgA、EAIgA、Rta-IgG分別為20.96%、36.30%、43.37%），均不達(dá)50%，而當(dāng)三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷時(shí)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值可升高至82.61%，提高效果十分明顯，而靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度及陰性預(yù)測(cè)值等四項(xiàng)指標(biāo)更是均達(dá)到95%以上，提示聯(lián)合診斷對(duì)鼻咽癌的篩查具有顯著優(yōu)勢(shì)，這與張曉琍等[17]的研究結(jié)果基本一致，其還通過(guò)繪制ROC曲線(xiàn)對(duì)三種EB病毒抗體診斷鼻咽癌的效能進(jìn)行了分析，結(jié)果可見(jiàn)VCA-IgA、Rta-IgG的ROC曲線(xiàn)下面積分別為0.933、0.908，效能相當(dāng)，而EA-IgA的ROC曲線(xiàn)下面積僅為0.816，相對(duì)較低。張啟飛等[18]的研究則對(duì)NA1-IgA、VCAIgA和Zta-IgA等三項(xiàng)指標(biāo)診斷鼻咽癌的效果進(jìn)行了分析，結(jié)果也有聯(lián)合診斷效果優(yōu)于單獨(dú)診斷的情況，且其對(duì)對(duì)鼻咽癌組患者加行EA-IgA、Rta-IgG指標(biāo)檢測(cè)，并行綜合分析后，也得出VCA-IgA、EAIgA與Rta-IgG 聯(lián)合檢測(cè)法可以作為鼻咽癌首選篩查方法的結(jié)論，提示這三種EB病毒抗體在鼻咽癌篩查中的重要性。連仕鋒等[1]的研究還對(duì)EB病毒血清學(xué)篩查鼻咽癌高、中危人群的隨訪(fǎng)結(jié)果進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鼻咽癌高危人群主要在首次EB病毒篩查及隨訪(fǎng)中有較高的檢出率，無(wú)論是篩查組還是隨訪(fǎng)組，鼻咽癌的早診率都較高，但篩查組患者的原發(fā)腫瘤中T1期的可占80%，提示可以通過(guò)對(duì)鼻咽癌高危人群的重點(diǎn)篩查及時(shí)發(fā)現(xiàn)并診治，改善患者的預(yù)后。

總之，通過(guò)對(duì)不同EB病毒抗體進(jìn)行血清學(xué)診斷有利于鼻咽癌的有效篩查，且不同抗體檢測(cè)的靈敏度特異性有一定差異，通過(guò)聯(lián)合診斷可以彌補(bǔ)單項(xiàng)抗體指標(biāo)無(wú)法兼顧靈敏度、特異性的缺點(diǎn)，為鼻咽癌的準(zhǔn)確診斷提供可靠依據(jù)，頗具臨床應(yīng)用價(jià)值。

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Clinical value of three kinds of EB virus antibody detection in screening of nasopharyngeal carcinoma

PAN Jizhao HUANG Haishen ZHU Yuanxia ZHANG Zhaodong
Huangjiang Hospital, Dongguan 523750, China

ObjectiveTo study the clinical value of three kinds of EB virus antibody detection in screening of nasopharyngeal carcinoma.Methods100 cases of nasopharyngeal carcinoma diagnosed by pathological diagnosis in our hospital from September 2014 to September 2015 were selected as the research objects, 500 cases of nonnasopharyngeal carcinoma patients with nasopharyngeal symptoms and 1000 cases of healthy people in the same period were selected as control. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) were used to respectively test the three groups of subjects three EB virus antibody. The positive detection rate among the three groups was compared, and the sensitivity, specificity, accuracy, negative prediction value and positive predictive value of different EB virus antibody alone or in combination with diagnosis of nasopharyngeal carcinoma(NPC) were calculated.ResultsThe comparison of VCA IgA, EA and RTA IgG detection positive rate of the three groups was patients with nasopharyngeal carcinoma＞patients in control group I＞Normal persons in control group II. And the detection results of patients with nasopharyngeal carcinoma group and the other two groups were statistically significant difference(P＜0.05).The detection results of different EB virus were the following, the VCA-IgA and Rta-IgG of nasopharyngeal carcinoma group were significantly higher than the EA-IgA, while the EA-IgA of control group was significantly higher than the EA-IgA and Rta-IgG, the difference was significant. Three kinds of EB virus in nasopharyngeal cancer diagnosis sensitivity, specificity, accuracy, negative predicted value, and positive predictive value comparison were combined diagnosis results, and were all higher than those of each kind of Epstein Barr virus alone diagnosis results, in addition to the positive predictive value was slightly lower (but the promotion effect of combined diagnosis is the most remarkable), all of which reached more than 95%.ConclusionThe serological diagnosis of three kinds of EB virus antibody is beneficial to the effective screening of nasopharyngeal carcinoma, and it has great clinical application value.

EB virus antibody; Nasopharyngeal carcinoma; Screening; Application value

R739.6

B

2095-0616（2016）19-225-04

2016-06-24）