吳濤
早在上世紀(jì)60年代,高效液相色譜技術(shù)就得以出現(xiàn)。該技術(shù)是在經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展而來,具有檢測限低和靈敏度高的特點,所以在多個領(lǐng)域的檢測工作中得到了運(yùn)用。而食品安全問題是關(guān)系到民生和社會發(fā)展的重要問題,因此還應(yīng)加強(qiáng)高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的運(yùn)用分析。
高效液相色譜技術(shù)概述
在色譜法中,高效液相色譜技術(shù)是重要分支,使用的流動相為液體,能夠利用高壓輸液系統(tǒng)將流動相泵入色譜柱。而色譜柱內(nèi)裝有固定相,能用于進(jìn)行不同極性單一溶劑、緩沖液和不同比例混合溶劑的分離,并將分離得到的各成分送入檢測器,以實現(xiàn)試樣分析。作為在農(nóng)學(xué)、化學(xué)和商檢等多個領(lǐng)域得到應(yīng)用的重要分離分析技術(shù),該技術(shù)具有較低檢測限度,并且靈敏度較高,因此能夠在食品檢測中得到運(yùn)用。
高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的運(yùn)用分析
在營養(yǎng)成分檢測中的運(yùn)用。在食品檢測中,高效液相色譜技術(shù)可用于檢測營養(yǎng)成分。在食品中的糖含量檢測上,運(yùn)用該技術(shù)能夠完成多種糖的測定,比如酒類糖分和果聚糖異構(gòu)體等。在脂肪酸檢測方面,運(yùn)用該方法能夠?qū)Χ嘉逑┧岬戎舅嵛镔|(zhì)進(jìn)行檢測,從而為食品的加工、貯存和配比提供科學(xué)依據(jù)。而蛋白質(zhì)具有相對分子量大和易發(fā)生變性等特點,以至于難以實現(xiàn)分離分析。運(yùn)用高效液相色譜技術(shù),則可以完成蛋白質(zhì)和氨基酸分離,所以能夠?qū)@些營養(yǎng)成分進(jìn)行靈敏測定。在食品保鮮方面,有機(jī)酸發(fā)揮著防腐的作用,同時也是食品鮮味和酸味的組成成分之一。運(yùn)用高效液相色譜法進(jìn)行檢測,可利用反向C18柱完成有機(jī)酸分離,然后利用紫外吸收檢測器等設(shè)備進(jìn)行乳酸、檸檬酸和蘋果酸等物質(zhì)的檢測。此外,在維生素檢測上,可運(yùn)用高效液相色譜法進(jìn)行保健食品中多種水溶性維生素的檢測。
在添加劑檢測中的運(yùn)用。在食品加工過程中,一般都要使用添加劑進(jìn)行食品色、香、味得到改進(jìn),并對食品進(jìn)行保鮮。而添加劑為人工合成或天然的物質(zhì),可以劃分為甜味劑、色素、防腐劑和抗氧化劑等。但是,人工合成的添加劑具有一定毒性,需限制其使用,所以還要進(jìn)行食品中添加劑含量的檢測。在甜味劑檢測方面,運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)使用的色譜柱通常為C18柱、-NH2柱和陰離子交換柱,使用的檢測器包含電導(dǎo)檢測器和紫外-可見光檢測器,可完成甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜和甜味素等多種甜味劑的測定。在防腐劑檢測方面,可使用R高效液相色譜法進(jìn)行脫氫乙酸、BA和對羥基苯甲酸乙酯等防腐劑的測定,具有準(zhǔn)確、靈敏和操作簡便的特點。在色素檢測方面,聯(lián)合使用高效液相色譜技術(shù)和紫外-可見光檢測器,并使用C18柱分離的梯度洗脫系統(tǒng),可完成胭脂紅、亮藍(lán)、檸檬黃和日落黃等多種色素的測定。在抗氧化劑檢測方面,運(yùn)用R高效液相色譜法能夠完成油脂中的9種抗氧化劑的同時測定,最低檢測濃度可以達(dá)到2mg/kg。另外,運(yùn)用高效液相色譜法進(jìn)行BHA、PG、BHT等物質(zhì)的分離,可分別達(dá)到84%、95%和99%的樣品回收率。運(yùn)用高效液相色譜法檢測食品中的增白劑,可使用陰離子柱進(jìn)行亞硫酸鹽的分離,最低檢出限能夠達(dá)到0.2μg/kg。
在有毒有害物質(zhì)檢測中的運(yùn)用。在食品中,可能含有多種有毒有害物質(zhì),如農(nóng)藥獸藥殘留和霉菌毒素等。如果誤食含有霉菌毒素的食品,可能導(dǎo)致人出現(xiàn)急性或慢性中毒現(xiàn)象,甚至引發(fā)人體細(xì)胞癌變。運(yùn)用高效液相色譜法,可進(jìn)行食品中霉菌毒素的檢測。從原理上來看,利用該方法能夠結(jié)合不同微生物的化學(xué)組成或代謝產(chǎn)物進(jìn)行樣品中各種細(xì)菌的分析,以確定病原微生物的特異性化學(xué)組分,進(jìn)而判定食品是否存在微生物超標(biāo)問題。比如,在黃曲霉毒素檢測方面,運(yùn)用高效液相色譜法和質(zhì)譜法進(jìn)行食品檢測,最低檢測限可達(dá)0.02μg/kg,回收率則在77%-102%范圍內(nèi)。在農(nóng)獸藥殘留檢測方面,運(yùn)用高效液相色譜法可完成熱穩(wěn)定性差和沸點高的農(nóng)藥殘留檢測,使用的色譜柱通常為C18或C8,聯(lián)合使用的檢測器包含熒光檢測器、紫外檢測器等。比如,聯(lián)合使用高效液相色譜法和紫外檢測器,可完成除蟲脲、氟苯脲等蔬菜中苯甲酰脲類農(nóng)藥殘留量的測定。此外,還可以利用高效液相色譜法與質(zhì)譜法完成水果、蔬菜等多種食品中四溴菊酯殘留檢測。在獸藥檢測方面,聯(lián)合使用高效液相色譜法和質(zhì)譜法,則能完成多種磺胺類藥物殘留的測定,檢出限在1.0-4.5μg/L的范圍內(nèi),回收率在92%-100%之間,具有準(zhǔn)確、方便和快速等檢測優(yōu)勢。
通過分析可以發(fā)現(xiàn),由于具有檢測靈敏度高、分離效能高和分析速度快等優(yōu)點,高效液相色譜法在食品營養(yǎng)成分、添加劑和有毒有害物質(zhì)檢測等方面得到了廣泛應(yīng)用,所以能夠為食品安全提供更多保障。而相信隨著該項技術(shù)的不斷發(fā)展,其未來也將在食品檢測領(lǐng)域獲得更好的發(fā)展前景。
(作者單位:南京漢欽食品有限公司)