王安波 孫 思 楊 梅 汪 儉 劉文峰

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心,貴州凱里 556000)

動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

王安波 孫 思 楊 梅 汪 儉 劉文峰*

(黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心,貴州凱里 556000)

概述了動(dòng)物源性食品中獸藥殘留測(cè)定的常用方法，分別描述了各類檢測(cè)方法的特點(diǎn)及研究現(xiàn)狀，以期為研究相關(guān)檢測(cè)新技術(shù)提供借鑒。

獸藥殘留 檢測(cè)技術(shù) 研究進(jìn)展

獸藥是當(dāng)代畜禽疾病預(yù)防及治療中不可缺少的一環(huán)，獸藥殘留的檢測(cè)，為畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了有力地保證，國(guó)際上通用的做法是先“快速初篩”，再進(jìn)行“確證測(cè)定”。近年來，大量研究者投入精力在針對(duì)動(dòng)物源性食品中獸藥殘留開發(fā)有力的分析檢測(cè)技術(shù)、方法或設(shè)備上，取得了矚目的研究進(jìn)展。

1 快速初篩方法

獸藥殘留快速篩查的方法有：酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELSA）、膠體金免疫層析法（Gold immunochromatography assay，GICA）、生物傳感器、高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）、薄層色譜法（thin-layer chromatography，TIC）等。

ELISA方法是在酶的高效催化作用下抗原抗體特異性結(jié)合的一種免疫反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)，方法操作簡(jiǎn)單。有學(xué)者比較了ELISA與HPLC在動(dòng)物產(chǎn)品中，四環(huán)素類、磺胺類、氯霉素、黃曲霉和呋喃它酮代謝物檢測(cè)結(jié)果，RSD為1.8%～7.6%，表現(xiàn)出了較高的敏感度與準(zhǔn)確性[1]。

GICA是將膠體金作為標(biāo)記物的免疫層析方法，固相載體一般為條狀層析材料，體積小，攜帶方便，不需儀器，幾分鐘內(nèi)即可得到結(jié)果。目前，檢測(cè)氯霉素、克倫特羅、萊克多巴胺、孔雀石綠、三聚氰胺、慶大霉素的GICA試紙條都已面世。

生物傳感器是將生物的某種活性物質(zhì)置于換能表面，將其與分析物所產(chǎn)生的信號(hào)轉(zhuǎn)化，進(jìn)而測(cè)得分析物含量和濃度。其在四環(huán)素、土霉素及克倫特羅殘留的檢測(cè)應(yīng)用上響應(yīng)快，易于操作，更能適應(yīng)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)，已成功應(yīng)用于動(dòng)物源性食品中頭孢類、氟喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類等的殘留檢測(cè)。

HPLC法是通過色譜柱將溶于流動(dòng)相的各組分與固定相發(fā)生作用強(qiáng)弱不一，導(dǎo)致滯留時(shí)間各異，從而達(dá)到分離檢測(cè)的目的方法。HPLC有各種不同性能的柱子以及不同種類的檢測(cè)器，成了目前大多數(shù)獸藥殘留快速篩查的常規(guī)分析方法。近年來超高效液相色譜的技術(shù)開發(fā)，以其更高效、靈敏、準(zhǔn)確的性能逐漸廣泛地應(yīng)用于獸藥殘留分析檢測(cè)。

TIC方法是由薄層平板、紫外線燈作為主要儀器構(gòu)成，與柱色譜分離原理相同，可用肉眼直接評(píng)價(jià)，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，具有較好的分離性和專一性。雖應(yīng)用范圍不及HPLC，但因其試劑耗費(fèi)少，色譜直觀性強(qiáng)，大量應(yīng)用于中獸藥快速篩查。

2 確證測(cè)定方法

色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是確證檢測(cè)重要手段。將能高效分離地色譜技術(shù)和定性能力強(qiáng)大的質(zhì)譜檢測(cè)儀器合二為一，是距今為止獸藥殘留分析領(lǐng)域中最強(qiáng)大的定性、定量工具。主要包括：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography-mass spectrography，GC-MS）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（Liquid chromatography - mass spectrometry，LC-MS）高效毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用（High performance capillary electrophoresis，mass spectrometry，CE-MS）。

GC-MS檢測(cè)時(shí)，樣品瞬間被高溫氣化，經(jīng)色譜柱分離，進(jìn)入MS檢測(cè)器，常用于目標(biāo)物的痕量分析。目前，已經(jīng)建立了豬肉組織中β-興奮劑類、雌二醇、稀雌酚等激素類獸藥殘留檢測(cè)方法，回收率、檢出限、RSD值等技術(shù)指標(biāo)均能達(dá)到要求[2]。但GC-MS不適合分析沸點(diǎn)高、極性大的多數(shù)獸藥，使得GC-MS在獸藥分析中應(yīng)用受限。

LC-MS通過液相色譜進(jìn)行分離，適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、大分子及強(qiáng)極性的獸藥殘留分析，也是目前獸藥殘留檢測(cè)中檢測(cè)能力最強(qiáng)大的儀器。目前，LC-MS已被應(yīng)用于磺胺類、氯霉素類、喹諾酮類、四環(huán)素類、氨基糖苷類等幾乎所有種類的獸藥殘留分析。

CE-MS法是基于毛細(xì)血管的分離通道，在高壓電場(chǎng)的誘導(dǎo)下各成分遷移速率各異，實(shí)現(xiàn)分離，與質(zhì)譜聯(lián)用，方法敏感度好、結(jié)果可靠。Blasco等[3]應(yīng)用CE-MS檢測(cè)乳中2中喹諾酮類和6種磺胺類獸藥殘留，回收率＞78%，RSD＜15%。將CE-MS法應(yīng)用于激素、抗生素、抗菌藥物及違禁藥品等殘留檢測(cè)也是近年來的熱門研究方向。

3 結(jié)語

隨著獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)的不斷更新和完善，檢測(cè)方法也不斷向著快速、精確、高效的方向發(fā)展。開發(fā)通用性的樣品制備方法、簡(jiǎn)化前處理步驟、進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度和檢測(cè)范圍，從而降低成本，對(duì)提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量具有重要的意義。

[1] 徐偉，程鳳科，孟銀，等.酶聯(lián)免疫吸附法在獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用[J].中國(guó)家禽，2013，34（10）：59-61.

[2] 王麗娜，陳曉輝，畢開順.GC-MS法測(cè)定豬肉中雌激素類藥物殘留量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，27（6）：466-469.

[3] Blasco Cristina，Piro Yolanda，Andreu Vicente. Analytical method for simultaneous determination of pesticide and veterinary drug residues in by CE-MS[J].Electrophoresis，2009，30（10）：1698-1707.

王安波（1991-），男，助理獸醫(yī)師，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)工作。

劉文鋒（1969-），男，農(nóng)業(yè)推廣研究員，從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)工作。