補陽還五湯治療缺血性中風(fēng)療效機制研究進(jìn)展

袁清潔 王嘉麟 賀立娟 邢佳 朱曉晨 王建偉 郭曉 高維 高東陽

郭凱航 郭蓉娟

補陽還五湯是治療中風(fēng)病的名方效方，首載于清代醫(yī)家王清任所著《醫(yī)林改錯》一書中。該方由生黃芪、當(dāng)歸尾、赤芍、地龍、川芎、紅花和桃仁等七味藥組成，凡中風(fēng)后正氣虧虛、氣虛血滯、脈絡(luò)瘀阻之證皆可用之。補陽還五湯原方重在補氣、輔以祛瘀、寓防于治。王清任提出中風(fēng)偏癱本源為“元氣虧損”，故方中黃芪用量獨重，五倍于其他活血藥用量總和，重在補氣匡扶元氣?！妒姥a齋醫(yī)書》亦云：“方以黃芪為君，當(dāng)歸為臣，若例以古法當(dāng)歸補血湯，黃芪五倍于當(dāng)歸，則二錢之歸宜君以一兩之芪。若四兩之芪即當(dāng)臣以八錢之歸。今則芪以二十倍于歸矣。大約欲以還五成之虧，有必需乎四兩者?！狈街信湮槭褂蒙倭炕钛鏊?，以使補氣而不壅滯，活血又不致傷正，尤宜于因虛致瘀者。中風(fēng)病凡辨證屬氣虛血瘀且以氣虛為主者可用，臨證尚需據(jù)血瘀程度多少調(diào)整諸活血化瘀藥之用量，總以益氣為主，化瘀為輔。補陽還五湯在維持中風(fēng)病后遺癥期的病情穩(wěn)定以及預(yù)防復(fù)中風(fēng)方面也有作用，寓防于治，王清任在《醫(yī)林改錯》中明確指出氣虛所致之中風(fēng)，無論初得還是病久，均可以補陽還五湯為基礎(chǔ)進(jìn)行加減應(yīng)用，而對諸如“肩膀脫落二、三指縫，胳膊曲而搬不直，腳孤拐骨向外倒，啞不能言一字”等纏綿難愈之癥，常服此方雖不能愈亦可保病不加重。病愈而氣虛尤在者，亦不能停藥，當(dāng)“或隔三、五日吃一付，或七、八日吃一付；不吃恐將來得氣厥之癥”[1]。補陽還五湯在中風(fēng)各期均可應(yīng)用，詳察病機、方證相應(yīng)是關(guān)鍵。中風(fēng)病病機雖然復(fù)雜，但證候要素多不外風(fēng)、火、痰、瘀、氣虛和陰虛陽亢六端[2]。凡中風(fēng)病見氣虛、血瘀者均可選用補陽還五湯，并據(jù)癥加減，若屬風(fēng)火痰陰虛者則不宜用。例如，中風(fēng)急性期多以標(biāo)實為主，若辨證不當(dāng)，易犯“虛虛實實”之戒，反致病轉(zhuǎn)危殆，正如《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》中云：“然王氏書中未言脈象如何，若遇脈之虛而無力者，其方原可見效，若其脈象實而有力，其人腦中多患充血，而復(fù)用黃芪之溫而升補者，以助其血愈上行，必至兇危立見，此固不可不慎也?！标P(guān)于中風(fēng)病急性期補陽還五湯的療效及安全性方面， Hao C等[3]對補陽還五湯治療急性缺血性中風(fēng)的臨床療效和安全性進(jìn)行了系統(tǒng)綜述和meta分析，最終共納入符合標(biāo)準(zhǔn)的19項隨機對照試驗，涉及1580名急性缺血性患者，結(jié)果顯示補陽還五湯可有效改善急性缺血性中風(fēng)患者的神經(jīng)功能缺損癥狀，且相對安全，但限于相關(guān)研究文獻(xiàn)質(zhì)量較差及缺乏足夠的安全性數(shù)據(jù)支持，目前仍不建議中風(fēng)急性期常規(guī)應(yīng)用補陽還五湯。

一系列病理生理及生化反應(yīng)參與了腦梗死的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后，補陽還五湯在腦梗死不同病程分期療效靶點亦各有側(cè)重，現(xiàn)將近年來相關(guān)療效機制研究進(jìn)展綜述如下。

1 抗炎、抗栓

血清超敏C反應(yīng)蛋白(high-sensitivity C reactive protein, hsCRP)是一種非常敏感的全身性炎癥反應(yīng)標(biāo)志物，P-選擇素介導(dǎo)活化血小板和內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附，可促進(jìn)血栓的形成和發(fā)展，兩者共同參與了缺血性腦損傷過程。如葉青[4]對氣虛血瘀證急性腦梗死患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯可降低血清P-選擇素和hsCRP水平，進(jìn)而降低血小板活性、改善局部循環(huán)和抑制炎癥反應(yīng)。

腦缺血區(qū)常伴有急性炎癥的發(fā)生，白細(xì)胞介素-1(interleukin-1，IL-1)既可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，損傷內(nèi)皮功能，還可引起組織因子樣凝固活性增高，破壞凝血抗凝機制，易于形成血栓。白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)是其在血漿和組織液中的主要分泌形式。白細(xì)胞介素-1受體1(interleukin-1 receptor 1，IL-1R1)是IL-1β的受體，兩者結(jié)合后通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。細(xì)胞間黏附因子-1(intercellar adhesion molecule-1，ICAM-1)能夠促進(jìn)白細(xì)胞進(jìn)一步黏附、激活及浸潤，從而加重炎癥反應(yīng)。張淑萍等[5]研究表明補陽還五湯及其有效部位生物堿、苷通過抑制大鼠腦缺血2小時再灌注22小時腦組織IL-1β、IL-1R1、ICAM-1 mRNA 的表達(dá)，對缺血腦組織起保護作用。

IL-6在介導(dǎo)急性炎癥反應(yīng)方面具有重要的調(diào)節(jié)作用，生理狀態(tài)下其在腦組織中表達(dá)水平低，而在病理情況下高表達(dá)，可作為疾病損傷程度的良好指標(biāo)，其水平升高預(yù)示著疾病的嚴(yán)重性[6]。核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(nuclear factor-kappa B, NF-κB)可調(diào)節(jié)許多與炎癥有關(guān)的基因，是參與炎癥病理過程的重要蛋白分子。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)在腦缺血引起的白細(xì)胞浸潤和組織損傷中起重要作用。黃月芳等[7]對補陽還五湯防治急性腦梗死的作用機制進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺血再灌注大鼠造模后2周時血清及腦組織IL-6、NF-κB、TNF-α含量增加，補陽還五湯可顯著降低IL-6、NF-κB、TNF-α等炎癥因子水平，發(fā)揮抗炎腦保護的作用。

2 改善血液流變性

腦缺血損傷后紅細(xì)胞聚集性增加，變形能力降低，血液流變學(xué)發(fā)生明顯異常。吳東華[8]研究發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯可顯著改善腦梗塞急性期患者全血高切黏度、低切黏度以及紅細(xì)胞壓積等血液流變學(xué)指標(biāo)，從而對抗血小板的聚集和黏附、降低血液黏稠度和血管阻力，增加腦血流量。楊樺等[9]研究發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯與西藥聯(lián)合可明顯改善腦梗塞恢復(fù)期患者血液流變學(xué)及血脂各項指標(biāo)，較單用西藥常規(guī)治療效果顯著。另外，馮玉華[10]對中風(fēng)后遺癥期患者的研究也得出了一致的結(jié)果。

3 保護血腦屏障

基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)參與缺血性中風(fēng)后的炎癥反應(yīng)及血腦屏障破壞過程，其中研究較多的是基質(zhì)金屬蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3，MMP-3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)。鄭桂芝等[11]對120位氣虛血瘀型腦梗死急性期患者的研究顯示，補陽還五湯對患者血清MMP-9表達(dá)有抑制作用，對血管內(nèi)皮損傷有保護作用，從而促進(jìn)患者神經(jīng)功能恢復(fù)。藍(lán)艷[12]對68例氣虛血瘀型缺血性腦卒中急性期患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯臨床療效的發(fā)揮與降低血漿MMP-3和MMP-9水平有關(guān)。

急性腦缺血時，MMPs可通過降解細(xì)胞外基質(zhì)，破壞內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接而增加微血管的通透性，引起血腦屏障破壞，誘發(fā)腦水腫。循環(huán)中的血管性血友病因子(von Willebrand factor，vWF)主要來自血管內(nèi)皮細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞受損時，血漿中vWF水平升高。vWF可加速血小板黏附、聚集，介導(dǎo)血小板釋放相關(guān)因子，干擾纖溶過程，促進(jìn)血管平滑肌纖維化、動脈粥樣斑塊及血栓形成，且與疾病的輕重呈正相關(guān)，vWF已被作為血管內(nèi)皮細(xì)胞損害的標(biāo)志物。王新高等[13]研究表明，補陽還五湯對大鼠腦缺血再灌注48小時后血腦屏障有保護作用，其機制可能與抑制MMP-9的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)有關(guān)。饒曉等[14]采用永久性腦缺血模型大鼠，并給予補陽還五湯灌胃6天，于第7天取材檢測，發(fā)現(xiàn)補陽還五湯療效機理可能是通過抑制 MMP-9、MMP-2、vWF的表達(dá)而保護血腦屏障，也可能是通過調(diào)控血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、vWF等內(nèi)皮活性因子，改善微循環(huán)，促進(jìn)腦血流的恢復(fù)，從而促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。

4 抗自由基損傷

在生物體內(nèi)自由基可產(chǎn)生一系列連鎖反應(yīng)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，丙二醛(malondialdehyde，MDA)是自由基損害膜結(jié)構(gòu)生成的最終產(chǎn)物，而超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)，能特異性地清除超氧陰離子自由基，抑制超氧自由基的氧化作用。MDA與SOD是評價機體氧化-抗氧化平衡體系的重要指標(biāo)。譚文聰?shù)萚15]研究顯示，補陽還五湯可提高全腦缺血15分鐘再灌注后大鼠血清及腦組織SOD活性，降低MDA含量，從而減輕缺血再灌注引起的腦損傷。

5 抗興奮性氨基酸毒性

興奮性氨基酸(excitatory amino acid，EAA)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，EAA包括谷氨酸(glutamate，Glu)、天冬氨酸(aspartic acid，Asp)等，興奮性氨基酸的毒性作用是腦缺血病理改變的主要起始環(huán)節(jié)。腦缺血時細(xì)胞外液EAA增高，Glu大量堆積將激活谷氨酸受體引起神經(jīng)元持續(xù)性去極化，Na+、Cl-以及水分向細(xì)胞內(nèi)流，導(dǎo)致細(xì)胞毒性水腫，引起神經(jīng)元急性損傷和遲發(fā)性壞死。邱呂軍等[16]研究顯示，補陽還五湯可使大鼠缺血再灌注損傷急性期不同時點的腦脊液中Glu、Asp含量降低，其保護作用機制可能與對抗腦缺血灌注損傷后EAA的升高有關(guān)。 Wang L等[17]研究發(fā)現(xiàn)，Glu、Asp等興奮性氨基酸在大鼠腦缺血后40分鐘釋放增加，且分別在缺血120分鐘和80分鐘時達(dá)到峰值，甘氨酸、牛磺酸、γ-氨基丁酸等抑制性氨基酸在缺血后也上升，且在120分鐘時達(dá)到峰值；補陽還五湯可減少興奮性氨基酸的水平并增加抑制性氨基酸的水平從而抵消興奮性毒性。Zhao LD等[18]發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注損傷引起腦脊液Glu含量增加和親代謝型谷氨酸受體1的表達(dá)升高，補陽還五湯可發(fā)揮抑制效應(yīng)。

6 調(diào)控?zé)嵝菘说鞍?/h2>

熱休克蛋白(heat shock protein, HSP)是機體在遭受各種應(yīng)激后產(chǎn)生的一種應(yīng)激蛋白，對細(xì)胞具有保護作用，與缺血性腦損傷關(guān)系密切，其中熱休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)是缺血性腦損傷中一種判斷神經(jīng)細(xì)胞缺氧缺血及其程度的較為敏感的指標(biāo)。產(chǎn)生HSP70的細(xì)胞主要為星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞，正常腦組織幾乎測不到HSP70 mRNA或蛋白，而腦缺血可誘導(dǎo)HSP70 mRNA的表達(dá)。謝建軍等[19]從細(xì)胞與分子水平觀察探討了補陽還五湯對腦缺血再灌注后星形膠質(zhì)細(xì)胞及其所分泌HSP70蛋白基因表達(dá)的影響，結(jié)果顯示補陽還五湯可抑制急性腦缺血期星形膠質(zhì)細(xì)胞的過度表達(dá)，并可維持腦缺血損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖狀態(tài)，從而在腦缺血損傷后神經(jīng)功能的恢復(fù)中發(fā)揮重要作用。補陽還五湯對腦缺血損傷后神經(jīng)功能的保護作用可能與調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞及抑制缺血腦損傷HSP70基因的過度表達(dá)有關(guān)。

7 降同型半胱氨酸

血漿同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)水平是缺血性腦血管病的獨立預(yù)測因素之一，且伴高血壓者其缺血性腦血管病的再發(fā)風(fēng)險明顯升高[20]。趙光恒等[21]和武梅[22]對急性缺血性卒中患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，降低血清 Hcy 水平是補陽還五湯治療急性缺血性卒中療效機制之一。袁磊等[23]對60例缺血性中風(fēng)恢復(fù)期氣虛血瘀患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，補陽還五湯聯(lián)合常規(guī)治療可降低Hcy水平。

8 改善紅細(xì)胞膜ATP酶活性、糾正離子代謝紊亂

腦缺血后離子通道通透性異常和細(xì)胞內(nèi)外離子平衡紊亂是缺血性腦損傷的重要機制，而Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶在維持細(xì)胞Na+、Ca2+內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面具有重要意義。張柱權(quán)等[24]觀察了65例中風(fēng)后遺癥患者，發(fā)現(xiàn)加服補陽還五湯組較單純復(fù)方丹參注射液、三磷酸胞苷二鈉靜滴治療組總有效率高，且能提高患者紅細(xì)胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性，糾正離子代謝紊亂。

9 提高腦組織能量代謝

正常情況下機體儲存能量的方式是磷酸肌酸，當(dāng)能量不足時，磷酸肌酸在肌酸激酶催化下可釋放出能量。乳酸脫氫酶可使乳酸轉(zhuǎn)變?yōu)楸岫M(jìn)入檸檬酸循環(huán)來提供能量，其催化過程是可逆的，故乳酸含量的增加可誘發(fā)乳酸脫氫酶的合成。盧永康等[25]研究發(fā)現(xiàn)中風(fēng)后遺癥“氣虛血瘀”大鼠模型血糖及肌酸激酶較正常大鼠低，乳酸及乳酸脫氫酶則較正常大鼠高，經(jīng)補陽還五湯干預(yù)后，模型大鼠“氣虛血瘀”的狀態(tài)得以明顯改善，且血糖及肌酸激酶明顯升高，乳酸及乳酸脫氫酶則明顯降低，補陽還五湯可糾正模型大鼠體內(nèi)能量代謝障礙。另外，譚漢添等[26]研究發(fā)現(xiàn)與全腦缺血模型組大鼠相比，補陽還五湯湯劑治療組及聯(lián)合針刺治療組大鼠三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，ADP)、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(glucose transporter-1，GLUT1)、GLUT3含量均明顯上升，而一磷酸腺苷(adenosine monophosphate，AMP)含量均明顯下降，補陽還五湯可改善全腦缺血大鼠腦能量代謝。

10 促血管生成

腦缺血后新血管的生成對促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)具有重要作用。VEGF是調(diào)控腦缺血后血管生成最為重要的生長因子，VEGF及其受體(fetalliver kinase 1，F(xiàn)lk1)的表達(dá)上調(diào)能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)新生血管形成及側(cè)支循環(huán)建立。儲利勝等[27]研究顯示，補陽還五湯不僅能顯著提高肢體放置實驗成績，減少錯步次數(shù)和縮短粘膠揭除潛伏期，而且能顯著增加缺血周邊區(qū)血管生成和VEGF的表達(dá)。劉柏炎等[28]研究顯示補陽還五湯能改善模型大鼠的神經(jīng)功能缺失癥狀，增強VEGF、Flk1表達(dá)，提高VEGF蛋白水平。

除VEGF/Flk信號系統(tǒng)外，Angiopoietins/Tie-2 receptor信號系統(tǒng)在促進(jìn)血管生成方面也發(fā)揮了重要作用。VEGF/Flk信號系統(tǒng)主要與腦缺血急性期血管生成相關(guān)，而Angiopoietins/Tie-2 receptor系統(tǒng)與腦缺血晚期血管網(wǎng)絡(luò)的維持有關(guān)[29]。血管生成素-1(angiopoietin-1，Ang-1)信號通過其受體酪氨酸激酶Tie-2發(fā)揮促進(jìn)血管生成和血管重塑的作用。Shen J等[30]研究顯示補陽還五湯可顯著減輕神經(jīng)功能紊亂、梗死灶體積及缺血后的腦萎縮，顯著增加缺血半暗帶區(qū)微血管密度和Ang-1的表達(dá)量。

此外，整合素是重要的細(xì)胞黏附分子，整合素αvβ3(integrinαvβ3，ITGαvβ3)通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、活化、遷移和存活來調(diào)節(jié)血管新生。Zhenqiang Zhang等[31]研究顯示補陽還五湯可增加VEGF、ITGαvβ3的表達(dá)，并能增加缺血腦區(qū)微血管密度，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。

11 促神經(jīng)發(fā)生

生理情況下神經(jīng)干細(xì)胞多局限于側(cè)腦室的室管膜下區(qū)和海馬齒狀回顆粒細(xì)胞下區(qū)，且多處于靜息狀態(tài)。補陽還五湯能促進(jìn)腦缺血大鼠海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞增殖和存活，如儲利勝等[32]研究顯示，缺血后第8、35天，補陽還五湯組大鼠海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞數(shù)及存活的神經(jīng)干細(xì)胞與模型組比較顯著增多，可見補陽還五湯能促進(jìn)海馬齒狀回內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞增殖與存活。

大部分NSCs都要經(jīng)過一定距離的遷移才能抵達(dá)它們發(fā)揮功能的部位，遷移是NSCs發(fā)育成熟的必經(jīng)階段。腦損傷后NSCs向病灶處遷移是其參與神經(jīng)組織再生修復(fù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[33]?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1，SDF-1)是目前已知的干細(xì)胞最強大的趨化劑，廣泛且穩(wěn)定地表達(dá)于腦、心臟、肝等組織中，缺血性腦損傷可引起SDF-1表達(dá)上調(diào)，并主要通過與其受體CXCR4結(jié)合，調(diào)節(jié)內(nèi)源性NSCs的遷移[34]。蘇曉慧等[35]研究顯示，補陽還五湯治療3周可明顯上調(diào)中動脈阻塞大鼠側(cè)腦室SDF-1蛋白表達(dá)，補陽還五湯能促進(jìn)MCAO大鼠缺血側(cè)NSCs遷移，其可能機制是通過上調(diào)SDF-1蛋白的表達(dá)水平實現(xiàn)的。

蛋白質(zhì)組學(xué)是從整體水平研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)及其自身特有的活動規(guī)律，可從整體活動的角度來揭示和闡明生命活動的基本規(guī)律。朱立華等[36]選用蛋白質(zhì)組學(xué)從整體、動態(tài)、網(wǎng)絡(luò)的水平上對補陽還五湯抗腦缺血的機制進(jìn)行研究，結(jié)果表明補陽還五湯在腦缺血中期表現(xiàn)為清除異常蛋白質(zhì)同時促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)再生，后期以促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)再生為主。

12 抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡多發(fā)生在輕、中度缺血的腦區(qū)，即半暗區(qū)，而缺血半暗區(qū)的轉(zhuǎn)歸在腦缺血預(yù)后中占關(guān)鍵地位。Caspase系統(tǒng)在凋亡過程中起重要作用，凋亡的最后過程是通過Caspase的激活而實現(xiàn)的，其中Caspase-3是參與凋亡的Caspase級鏈反應(yīng)最終效應(yīng)子，在蛋白酶級聯(lián)切割過程中處于核心位置。任巖等[37]研究顯示補陽還五湯可下調(diào)Caspase-3表達(dá)而抑制大鼠腦缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。劉海娟等[38]的研究表明補陽還五湯可通過抑制全腦缺血72小時海馬神經(jīng)細(xì)胞的凋亡而減輕神經(jīng)功能損傷。

綜上所述，補陽還五湯既可通過抗炎、抗栓、改善血液流變性、保護血腦屏障、降同型半胱氨酸、促血管新生等血管相關(guān)機制改善腦組織血液供應(yīng)，預(yù)防復(fù)發(fā)，也可通過抗自由基損傷、抗興奮性氨基酸毒性、調(diào)控?zé)嵝菘说鞍住⒏纳萍t細(xì)胞膜ATP酶活性、糾正離子代謝紊亂、提高腦組織能量代謝、促神經(jīng)發(fā)生、抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡等機制對抗缺血缺氧等應(yīng)激引起的腦組織損傷。然而，目前研究尚存在某些問題亟待解決。臨床研究多著眼于缺血性中風(fēng)某一病程階段的某一機制研究，雖然對中風(fēng)不同分期的療效機制研究取得一定進(jìn)展，但在不同分期以哪些機制為主，關(guān)鍵靶點為哪些，哪些機制為輔，尚缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的研究。動物實驗雖可對腦缺血再灌注動物模型不同的病程時點進(jìn)行研究，但研究也多局限于某一或某幾種機制。中藥復(fù)方療效的發(fā)揮涉及多靶點調(diào)節(jié)的綜合效應(yīng)，臨床研究尚需探索能夠更好地針對多靶點機制的研究方法，基因組學(xué)、蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)技術(shù)的應(yīng)用或可提供更多的思路。動物試驗以疾病模型為基礎(chǔ)，但目前尚缺少較為公認(rèn)的病證結(jié)合動物模型，這就為基于辨證論治的臨床確有療效中藥復(fù)方的基礎(chǔ)研究帶來了困難，如何研制出符合中醫(yī)辨證論治特點的病證結(jié)合動物模型是目前研究的熱點也是難點。

補陽還五湯是由多種單味藥物配伍組合而成的中藥復(fù)方，其發(fā)揮療效的根本在于其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。近年提出方證代謝組學(xué)是中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究的系統(tǒng)方法學(xué)，有望開啟中藥方劑療效機制研究的嶄新篇章。王喜軍[39]明確提出在方劑對應(yīng)證候/病有效的狀態(tài)下的體內(nèi)物質(zhì)分析才能發(fā)現(xiàn)與臨床療效相關(guān)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。補陽還五湯對應(yīng)的是氣虛血瘀證，對中醫(yī)氣虛血瘀證的客觀正確診斷，闡釋氣血血瘀證的生物學(xué)本質(zhì)，發(fā)現(xiàn)氣虛血瘀證的生物標(biāo)記物，建立臨床療效的生物評價體系，是評價補陽還五湯臨床療效進(jìn)而發(fā)現(xiàn)其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的基本前提，也是基于中醫(yī)臨床經(jīng)驗創(chuàng)新藥物的決定性環(huán)節(jié)，而且任何超越于證候、方劑的單一的研究過程，都將與方劑的有效性失之交臂。

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