房真真 鞏天照(山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司,山東 濟(jì)寧 272000)
高效液相色譜法在抗生素類藥物分析中的應(yīng)用
房真真 鞏天照(山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司,山東 濟(jì)寧 272000)
高效液相色譜法隨著近些年來的飛速發(fā)展,以極高的研發(fā)與創(chuàng)新速度被應(yīng)用于當(dāng)前的藥物分析中。該種方法主要以超高的分離度和超高的敏捷度為主要特點(diǎn)。因此本文通過對高效液相色譜法的基本概論原理進(jìn)行分析,探究該種方法在當(dāng)前抗生素類藥物中的具體作用,以期來推進(jìn)藥物分析工作質(zhì)量的整體成效。
高效液相色譜法;抗生素類藥物;血藥濃度
高效液相色譜法是始于20世紀(jì)60年代所研發(fā)的一種現(xiàn)代化的藥物分析方法,此種分析方法有著較快的分析速度,并且分析的效率極高。正因高效液相色譜法的分析效率,被廣泛的應(yīng)用于當(dāng)前的藥物分析工作中,是當(dāng)前藥物分析領(lǐng)域較為重要的檢測方法及分析技術(shù)。該種方法簡稱為HPLC[1]。結(jié)合了經(jīng)典的液相色譜法以及相色譜法的基本原理,通過進(jìn)一步的研發(fā)得出的一種新型的液相色譜法。此種方法有著高壓、高速以及高效、靈敏的顯著特點(diǎn)。相較于氣相色譜法,此種方法要求試劑能制成溶液,且不需要?dú)饣?,因此在使用此種方法的過程中是不需要受到藥物揮發(fā)性的多方面限制[2]。在分析具有高沸點(diǎn)以及存在熱不穩(wěn)定性差和分子質(zhì)量較大的有機(jī)藥物時(shí),通常都選用高效液相色譜法進(jìn)行分析。此種方法已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于對藥物的組成、含量以及質(zhì)量的分析控制方面,因此本文對此種方法在抗生素類藥物分析中的主要作用進(jìn)行探究。
色譜法的基本分析原理是,當(dāng)藥物的流動(dòng)性中各個(gè)組成部分在經(jīng)過一定的固定相時(shí),由于固定相所產(chǎn)生的吸附、排斥、親和等作用,往往大小以及強(qiáng)弱程度是不同的,所以在固定相中所滯留的時(shí)間也存在一定差異,因此被稱之為色層或者層析法。此種方法有著如下特點(diǎn):在高壓狀態(tài)下壓力可以達(dá)到150-300KG/cm2的階段。高效的流速特點(diǎn),可以每米達(dá)到5000塔板的程度。同時(shí)還具有高靈敏度的檢測性能,消費(fèi)的樣品較少。因此高效液相色譜分析方法相較于經(jīng)典的液相色譜有著較快的分析速度,部分分析樣品甚至可以在5min之內(nèi)完成;有著高分辨率,可以使得固定相和的成分流動(dòng)達(dá)到分離的效果;靈敏度高的特點(diǎn),同時(shí)在分析過程中樣品的采集量較少,不容易使得色譜柱遭到一定的破壞,因此可以收集單一性的藥品樣本或者做為制備。
抗生素是由微生物或者其他方法所產(chǎn)生的化學(xué)類物質(zhì),在高度稀釋的情況下還具備一定的抑制成效,且消滅其他微生物存在的基本性能??股仡愃幬锓N類較多,在當(dāng)前的臨床應(yīng)用中較為廣泛,且依照化學(xué)類藥物的結(jié)構(gòu)性能存在諸多不同,可以被分為多種抗生素藥物類型。比如β-內(nèi)酰胺類抗生素藥物,比如青霉素以及頭孢;氨基糖苷類抗生素,比如新霉素、慶大霉素;四環(huán)素類抗生素藥物,比如環(huán)丙沙星等藥物。在對抗生素類藥物進(jìn)行分析的過程中,由于抗生素類藥物部分原因,在對其進(jìn)行分析、分離以及定量測量領(lǐng)域還存在諸多困難。通常使用微生物分析以及化學(xué)分析等方法,但是此類方法往往專一性較差。高效液相色譜法則對抗生素類藥物進(jìn)行分析時(shí),存在諸多優(yōu)勢。
四環(huán)素類抗生素藥物屬于廣譜性抗生素藥物,但是在發(fā)揮一定藥效的同時(shí)還會(huì)對人體產(chǎn)生較大的副作用。因此使用高效液相色譜在此類抗生素藥物進(jìn)行分析時(shí)有著較為重要的意義。相關(guān)研究通過使用AI3+用作柱前衍生的實(shí)踐,使用HPLC對其進(jìn)行分析,作為一種新型的分析檢測四環(huán)素類藥物方法。有相關(guān)研究表明在基于高效液相色譜的使用方法之上,使用超高效液相色譜對二極管陣列檢測器進(jìn)行抗生素類藥品檢測。使用TMBEHC C18的色譜柱(50mmX2.1mm,1.7mm),流動(dòng)相為-0.1%的甲酸水溶溶液,存在諸多梯度洗脫。經(jīng)過對樣品進(jìn)行反復(fù)的萃取之后,使用高效液相色譜方法進(jìn)行分析檢測,測量所得波長為268mm。與時(shí)間和紫外光譜進(jìn)行結(jié)合分析其定性,得出平均回收率以及相對標(biāo)準(zhǔn)差。經(jīng)過一系列的應(yīng)用分析結(jié)果,均表明使用高效液相色譜對抗生素類藥物進(jìn)行分析時(shí),存在較快的分離效果,且速度也相對較快。
除此之外阿奇霉素藥物是當(dāng)前臨床醫(yī)學(xué)中唯一一種應(yīng)用于氮雜十五元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素藥物。此種藥物相比于紅霉素,有著較為廣泛的抗菌譜,在使用中對患者體內(nèi)的肺炎病菌、b-內(nèi)酞胺酶病菌以及黏膜炎病菌都具備較強(qiáng)的抑制性能。此種藥物處于酸性的環(huán)境中有著較高的穩(wěn)定性能,且有著較好的吸收利用性等顯著特點(diǎn)。使用化學(xué)檢測方法對阿奇霉素進(jìn)行分析檢測時(shí),對于該藥物的分離以及PH值都存在較大的影響。但是通過使用高效液相色譜法,進(jìn)行檢測時(shí),則具備了較小的消耗性,分析時(shí)間較短,并且有著不可直接進(jìn)行分流以及質(zhì)譜的連用等諸多特點(diǎn)。
綜上所述,高效液相色譜法在當(dāng)前的臨床醫(yī)學(xué)中有著較大的使用成效。微柱液相色譜分析方法的相關(guān)研究也相對較為活躍。因此在藥物成分的藥性分析以及測量等諸多功能,都有著其他分析方法所不具備的優(yōu)勢。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷創(chuàng)新與研發(fā),檢測手段的逐步更新,高效液相色譜法在臨床醫(yī)學(xué)中會(huì)發(fā)揮著愈來愈重要的作用。
[1]汪建龍.高效液相色譜法在中藥分析中的應(yīng)用進(jìn)展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,20(16):2072-2074.
[2]印成霞.超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用研究[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(23):230-231.