C—myc在肺鱗癌、腺癌中的表達及其對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預測價值

吳媛媛　張菁華　秦策　柳志寶　李永生　高敬華

[摘 要] 目的：分析C-myc基因在肺鱗癌、腺癌中的表達及其對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預測價值，為肺鱗腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預測提供參考。方法：選擇51例肺鱗癌、45例肺腺癌及其癌旁組織標本，使用免疫組化法檢測標本原癌基因C-myc表達，并分析其與患者病理類型、組織分化程度、病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果：肺鱗癌組織C-myc陽性率為70.59%（36/51），高于癌旁組織的11.76%（6/51），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)肺鱗癌組織C-myc表達比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。肺腺癌組織C-myc陽性率為91.11%（41/45），高于癌旁組織的15.56%（7/45），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；不同臨床病理特征肺腺癌組織C-myc表達比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。肺腺癌C-myc陽性率高于肺鱗癌，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論：C-myc在肺鱗癌、腺癌病灶中陽性表達率均高于癌旁組織，其表達水平與肺鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)具有一定關(guān)聯(lián)。

[關(guān)鍵詞] C-myc；原癌基因；肺鱗癌；肺腺癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；預測

中圖分類號：R734.2 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2017）01-085-03

DOI：10.11876/mimt201701034

作為呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，肺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個多因素、多步驟、多階段和多基因改變的過程，癌基因激活、抑癌基因、DNA修復基因突變或缺失與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)聯(lián)[1]。C-myc是原癌基因myc家族中的一員，也是近年來分子生物學研究的熱點，既往研究發(fā)現(xiàn)，C-myc在子宮內(nèi)膜癌、胰腺癌、乳腺癌等多種腫瘤的生長、黏附、遷移中均扮演了重要角色[2-3]。但關(guān)于C-myc與肺癌關(guān)系的研究較為缺乏，因此，本研究選擇肺鱗癌、肺腺癌患者癌及癌旁組織標本，了解C-myc在肺鱗癌、腺癌中的表達及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標本選擇

51例肺鱗癌、45例肺腺癌患者，入選患者根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟頒布的肺癌TNM分期標準[4]臨床分期I～Ⅳ期，排除標本來源合并其他惡性腫瘤及系統(tǒng)性疾病者[5]。51例肺鱗癌患者中男29例，女22例，年齡46～71歲，平均（58.26±6.44）歲，組織分化程度：高分化15例，中分化19例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期24例，Ⅱ期14例，Ⅲ/Ⅳ期13例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性25例。45例肺腺癌患者中男24例，女21例，年齡43～75歲，平均（57.92±6.39）歲，組織分化程度：高分化13例，中分化15例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期11例，Ⅲ/Ⅳ期14例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性23例。

1.2 染色方法

取患者癌及癌旁2cm以上正常組織，標本均使用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，置于涂有多聚賴氨酸的防脫載玻片上，70℃恒溫烘烤2～3 h，而后采用二步法免疫組化染色[6]，操作方法嚴格按照通用型PV6000試劑盒（北京中杉生物試劑公司），抗C-myc單克隆抗體由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供，以PBS溶液代替一抗作為陰性對照，陽性對照由購買試劑公司提供。

1.3 結(jié)果判定

采取Garcia半定量法進行染色結(jié)果判定，隨機觀察10個高倍鏡視野，以陽性細胞（胞核或胞質(zhì)內(nèi)可見淡黃色至棕黃色顆粒）百分比計分：0分：未見陽性細胞；1分：陽性細胞百分比<25%；2分：陽性細胞百分比25%～50%；3分：陽性細胞百分比50%～75%；4分：陽性細胞百分比>75%。以著色強度計分：0分：未著色；1分：淡黃色染色；2分：棕黃色染色。陽性細胞百分比計分、著色強度計分的乘積為總分，根據(jù)總分判斷染色結(jié)果[7-8]：陰性：0～1分；陽性：2～8分（2～4分為弱陽性，5～8分為強陽性）。

1.4 統(tǒng)計學分析

對本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進行分析，C-myc表達陽性率以（n/%）表示，并采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 肺鱗癌及癌旁組織C-myc表達情況

肺鱗癌組織C-myc陽性率為70.59%（36/51），高于癌旁組織的11.76%（6/51），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)肺鱗癌組織C-myc表達比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2 肺腺癌及癌旁組織C-myc表達情況

肺腺癌組織C-myc陽性率為91.11%（41/45），高于癌旁組織的15.56%（7/45），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、組織分化程度、TNM分期肺腺癌組織C-myc表達比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.3 肺腺癌及肺鱗癌C-myc表達情況

肺腺癌C-myc陽性率為91.11%，高于肺鱗癌的70.59%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

3 討論

C-myc是原癌基因myc家族中的一員，位于8號染色體，主要發(fā)揮刺激細胞增殖、誘導細胞凋亡作用。動物實驗證實，C-myc過度表達可造成細胞脫離正常有絲分裂軌道，并誘導靜止期細胞進入細胞分裂期，進而引發(fā)細胞增殖速度上升，導致腫瘤發(fā)生[9]。與此同時，諸多研究表明，C-myc表達的變化與胃癌、胰腺癌等惡性腫瘤的增殖及分化狀態(tài)具有密切關(guān)聯(lián)，其表達產(chǎn)物在細胞生長、分化及惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮的調(diào)節(jié)作用也已得到證實[10-11]。

本研究就C-myc在肺鱗癌、腺癌中的表達進行了觀察，結(jié)果表明，無論是肺鱗癌還是肺腺癌，癌組織中C-myc陽性率均明顯高于癌旁組織，說明C-myc參與了腫瘤的形成過程。C-myc原癌基因表達的方式以基因擴增、過表達為主，其異常表達往往在癌變早期即發(fā)生，并通過影響細胞生長代謝、周期變化、惡性轉(zhuǎn)化以及刺激血管增生、加劇基因不穩(wěn)定型，啟動腫瘤發(fā)生、促進癌性增生[12-13]。

C-myc異常激活的機制包括染色體易位、基因突變、基因擴增、DNA的甲基化等，是導致原癌基因異常高表達、促進細胞惡性轉(zhuǎn)化的主要原因[14]。最新研究發(fā)現(xiàn)，C-myc在細胞凋亡過程中亦扮演了重要角色，其過度表達、不適時表達均可造成細胞凋亡加劇，但生長因子存在時，激活擴增的C-myc往往以促增殖作用為主，而細胞內(nèi)基因調(diào)控失衡的加劇亦使得細胞分化進一步抑制，為細胞惡性轉(zhuǎn)化創(chuàng)造了一定條件[15-16]。本研究結(jié)果亦顯示，C-myc異常高表達與肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)具有密切關(guān)聯(lián)，說明C-myc陽性肺鱗癌患者具有更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險，但與肺腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)無明顯相關(guān)性，考慮與肺腺癌普遍伴隨著C-myc表達上調(diào)有關(guān)[17]。表明，C-myc不僅在肺鱗癌、腺癌的發(fā)生過程中發(fā)揮了重要作用，也是促使肺鱗癌細胞浸潤、轉(zhuǎn)移的重要基因，因此，可以認為，早期檢測肺鱗癌患者病灶組織C-myc表達能夠預測或了解其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)，為治療策略的制定與調(diào)整提供一定參考，但C-myc表達情況無法預測肺腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)。

Tsai等[18]發(fā)現(xiàn)，病灶組織C-myc陽性肺癌患者，其5年生存率明顯低于C-myc陰性者，考慮與C-myc陽性者病灶惡性表型轉(zhuǎn)化能力更強、腫瘤細胞增殖速度較快有關(guān)，該研究結(jié)果亦說明根據(jù)C-myc表達情況有望預測患者生存質(zhì)量，關(guān)于這一方面的研究，有待日后大樣本、長期隨訪加以觀察。

綜上所述，C-myc在肺鱗癌、腺癌病灶中陽性表達率均高于癌旁組織，其在肺鱗癌發(fā)生發(fā)展、腫瘤細胞的惡性轉(zhuǎn)化中扮演了重要角色，且與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)聯(lián)，根據(jù)C-myc表達情況預測肺鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、評估預后質(zhì)量，有望為臨床診治提供一定參考，值得進一步深入研究。

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