李莉華 何路軍 馬印圖

核酸檢測系統(tǒng)應用于血站血液篩查的使用前確認*

李莉華 何路軍 馬印圖

目的 回顧性分析華益美核酸檢測 （nucleic acid technology，NAT）系統(tǒng)應用于血站實驗室血液篩查的使用前確認的內(nèi)容和方法，為采供血單位順利開展核酸檢測提供參考。方法 按照《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》及《血站核酸檢測實驗室質(zhì)量保證指南》的要求進行使用前確認，主要包括檢測設備的安裝、運行、性能確認，實驗人員資質(zhì)和能力、試劑性能、核酸實驗室質(zhì)量體系文件、信息系統(tǒng)的確認，以及標本處置和風險評估等方面。結(jié)果 通過對華益美核酸檢測系統(tǒng)使用前的確認，為后續(xù)NAT有效、平穩(wěn)開展提供了文件化的證據(jù)，提高了血站實驗室核酸檢測的工作質(zhì)量。結(jié)論 有效開展核酸檢測系統(tǒng)使用前確認活動是常規(guī)核酸檢測的前提，是降低實際運行過程中風險的有效手段。

血站 核酸檢測（NAT） 血液篩查 實驗室管理 系統(tǒng)確認

根據(jù)我國《衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展“十二五”規(guī)劃》的要求，采供血機構(gòu)實現(xiàn)“到2015年底，血液篩查核酸檢測基本覆蓋全國”的工作要求，目前，國內(nèi)多數(shù)采供血機構(gòu)基本實現(xiàn)了NAT全覆蓋。使得NAT系統(tǒng)在獻血者血液篩查中得到極大的應用。NAT直接檢測病毒核酸，具有極高的靈敏度和特異性，操作技術(shù)要求高，檢測系統(tǒng)運行狀態(tài)的好壞直接關(guān)系到血液檢測的結(jié)果和質(zhì)量；特別是部分血站剛剛開展，對NAT實驗室的運行模式、系統(tǒng)確認等方面不熟悉，工作中存在盲點和誤區(qū)。因此，有效開展NAT系統(tǒng)使用前確認活動是常規(guī)NAT的前提，是降低實際運行過程中風險的有效手段。本文總結(jié)了華益美NAT系統(tǒng)應用于本實驗室血液篩查的使用前確認內(nèi)容和確認方法，為采供血單位順利開展核酸檢測提供參考。

1 依據(jù)與原則

1.1 NAT系統(tǒng)使用前確認的依據(jù) 核酸檢測系統(tǒng)使用前確認活動依據(jù)的規(guī)范和標準包括《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站核酸檢測實驗室質(zhì)量保證指南》等。

1.2 NAT系統(tǒng)使用前確認的基本原則 NAT設備作為血液篩查實驗室中大型關(guān)鍵設備之一，在正式投入運行前需按照《血站質(zhì)量管理規(guī)范》及《血站實驗室質(zhì)量管理規(guī)范》的要求進行使用前確認。而核酸檢測系統(tǒng)投入使用前開展的確認活動不僅包括設備的確認，其涵蓋范圍更廣泛。因此，確認活動結(jié)合核酸檢測的方法學特性宜遵循以下幾個原則。

1.2.1 多環(huán)節(jié)全面的原則 NAT系統(tǒng)的使用確認包括檢測設備的安裝、運行、性能確認，實驗人員資質(zhì)和能力、試劑性能、核酸實驗室質(zhì)量體系文件、信息系統(tǒng)的確認，以及標本處置的確認等方面。使用前確認活動應考慮到NAT體系相互關(guān)聯(lián)的多個環(huán)節(jié)。

1.2.2 可測量量化的原則 確認活動應通過可以測量的量化指標來證實檢測系統(tǒng)的應用是否符合預期，是否滿足檢測需求。

1.2.3 可操作適度的原則 NAT系統(tǒng)的確認活動既要結(jié)合其技術(shù)特點、實際情況，又要結(jié)合試劑盒使用說明書，確定適宜的確認范圍和深度，具有可操作性。

1.3 提出確認申請、制定確認計劃 NAT系統(tǒng)確認活動涉及采供血業(yè)務流程的多個相關(guān)部門，在向業(yè)務主管部門提出確認申請后，核酸實驗室主管負責各部門的溝通協(xié)調(diào)，制定確認計劃和確認方案。實驗室明確確認目的、對象，確認活動時間表，小組成員及分工等。制定確認方案，以確立各項確認內(nèi)容、所需材料、擬用的檢測方法、可接受標準、結(jié)果結(jié)論等。

2 確認與實施

確認實施階段是確認活動的重點環(huán)節(jié)，大部分的確認活動在此階段開展。根據(jù)確認方案中既定的確認內(nèi)容，實施各項確認，評估所得數(shù)據(jù)是否符合預期標準。以華益美NAT系統(tǒng)為例實施確認活動。

2.1 NAT設備安裝、運行確認

2.1.1 在NAT設備到貨前首先對實驗室是否具備安裝條件進行評估，具體核實的內(nèi)容見表1。

2.1.2 安裝確認（IQ）涉及工程質(zhì)量管理規(guī)范在設備安裝時的驗證［1］，檢查設備安裝是否正確，一般包括設備硬件和軟件的安裝。具體安裝確認內(nèi)容見表2。

2.1.3 運行確認（OQ）是檢查設備的各種參數(shù)設置和空載運行的可靠性和穩(wěn)定性，確保設備可在要求的范圍內(nèi)正確運行［2］。確認內(nèi)容見表3。

2.2 實驗人員資質(zhì)和能力確認 與血清學檢測比較，NAT技術(shù)含量高、操作復雜，要求實驗人員具備熟練的操作能力，以減少NAT無效運行，避免報告發(fā)放周期延長。因此，操作人員能力和資質(zhì)的確認也自然成為NAT過程確認的重要組成部分［3］。此次華益美NAT系統(tǒng)的人員培訓工作本著少人次多循環(huán)的原則，以保證實驗人員能更多地獨立操作、獨立處理問題?；趯嶒炄藛T除需要具備一定的基礎理論和基本知識外，更重要的是需要具備熟練的操作能力和應急處理能力，以及血液檢測過程控制和質(zhì)量管理理念和技能［4］，培訓內(nèi)容應結(jié)合NAT實驗室特點，涉及理論、實際操作、流程控制以及應急處理等方面，最后采用理論加操作相結(jié)合的考核方式對培訓效果、人員資質(zhì)進行評估。

2.3 NAT系統(tǒng)性能確認 性能確認（PQ）是通過模擬檢測實驗的方式，進行設備的試運行，確認設備是否符合實驗要求［2］。國際輸血協(xié)會（International Society Blood Transfusion，ISBT）指出IQ、OQ、PQ是設備確認的3個連續(xù)階段，并對具體操作進行了說明［5］。本實驗室實施性能確認旨在對已安裝調(diào)試完畢的華益美NAT系統(tǒng)（設備與試劑）進行評估，確保檢測性能符合產(chǎn)品說明書標準。見表4。

2.4 NAT實驗室體系文件的確認 我中心實驗室自2009年將NAT應用于血液篩查，采用Procleix TIGRIS NAT系統(tǒng)和上海浩源NAT系統(tǒng)進行檢測，NAT實驗室的質(zhì)量管理已納入中心質(zhì)量體系中，建立了相應的體系文件。根據(jù)《血站核酸檢測實驗室質(zhì)量保證指南》要求：實驗室應采用經(jīng)過評估和確認的NAT標準操作規(guī)程進行操作。本次確認活動由實驗人員與廠方工程師配合完成編寫華益美檢測系統(tǒng)SOP 及相關(guān)管理程序，重新構(gòu)建NAT實驗室體系文件。

表1 實驗室安裝NAT設備前評估的內(nèi)容

表2 華益美核酸檢測系統(tǒng)安裝確認內(nèi)容

表3 華益美NAT系統(tǒng)運行確認內(nèi)容

表4 華益美NAT系統(tǒng)性能確認主要內(nèi)容

2.5 信息系統(tǒng)的確認 血液篩查實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）覆蓋了整個血液檢測過程對流程、設備、人員、試劑、耗材、記錄、環(huán)境監(jiān)控等各環(huán)節(jié)的管理和控制，無論是新建還是在用系統(tǒng)的修改都應該實施全面的確認活動［6］。本實驗室在啟用新NAT系統(tǒng)前，對核酸相關(guān)信息系統(tǒng)進行了確認，包括軟件添加物料、設備、檢測方法、設備接口，采集服務配置，文件生成，數(shù)據(jù)傳輸，報告審核簽發(fā)等系列內(nèi)容。

2.6 風險評估 NAT系統(tǒng)投入使用前首先對其相關(guān)過程進行風險評估，對可能存在的風險采取措施使之處于可接受范圍內(nèi)。如設備運行的安全控制、故障處理、核酸試劑的庫存管理、檢測報告時限，實驗人員再培訓等方面進行風險評估并制定措施。

2.7 形成確認報告 我中心實驗室在華益美NAT系統(tǒng)使用前開展了一系列確認活動，所有測試結(jié)果有效，各個確認項目達到各自可接受標準，證實該系統(tǒng)在本實驗室的使用性能與預期一致，可以常規(guī)開展檢測。本次確認活動有效。

3 結(jié)語 《血站質(zhì)量管理規(guī)范》中規(guī)定：建立和實施確認程序，對新的或有變化的過程、程序、設備、軟件、試劑或其他關(guān)鍵物料進行系統(tǒng)檢查，以保證在正式使用前符合預期的使用要求［7］。隨著規(guī)范在血站系統(tǒng)的有效實施，確認工作越來越多地應用到血站質(zhì)量管理活動中，成為實驗室質(zhì)量管理體系不可或缺的要素。本次開展的華益美NAT系統(tǒng)使用前確認活動，為后續(xù)NAT有效、平穩(wěn)開展提供了文件化的證據(jù)，也為其他血站實驗室實施NAT系統(tǒng)的確認工作提供參考，以達到深化認識持續(xù)改進的目的。

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4 鄭靜，姚鳳蘭，冷禪，等.血站核酸檢測實驗室人員培訓模式探討 [J].中國輸血雜志，2012，25（6）：528-529.

5 ISBT.Guidelines for validation of Automated Systems in Blood Establishments [J].2nd ed Vox Sanguinis， 2010，98：1-19.

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7 中華人民共和國衛(wèi)生部.血站質(zhì)量管理規(guī)范[S].2006-4-25.

R457.1+2 R392.11

C

1671-2587（2017）02-0198-04

2016-10-12）

（本文編輯：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.031

*本課題受河北省衛(wèi)生和計劃生育委員會指令性課題（No. IL-20140122）資助

050071 石家莊，河北省血液中心（李莉華，何路軍）；解放軍白求恩國際和平醫(yī)院輸血科（馬印圖）

李莉華（1971–），女，河北石家莊人，副主任檢驗師，學士，主要從事輸血相關(guān)傳染病檢測研究，（E-mail）15931096399@163.com。

馬印圖，男，副主任技師，主要從事臨床輸血風險控制研究，（E-mail）13722793663@163.com。