李 忠 曾振基 古培總

（廣東省梅州市微生物研究所，廣東梅州514071）

20世紀(jì)90年代中期，梅州開始試驗(yàn)、示范推廣室內(nèi)袋料栽培靈芝技術(shù)，至今梅州及其周邊縣區(qū)形成了年栽培菌包近400萬(wàn)包、年產(chǎn)靈芝孢子粉30余噸、子實(shí)體近80 t的產(chǎn)業(yè)規(guī)模，成為廣東省袋料栽培赤靈芝最多的地區(qū)。

靈芝菌種是靈芝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)和前提，靈芝二級(jí)種制作是靈芝栽培前期的重要工作，對(duì)靈芝高產(chǎn)和優(yōu)質(zhì)起關(guān)鍵作用。筆者通過(guò)調(diào)查、試驗(yàn)和經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，對(duì)廣東省梅州市赤靈芝栽培中常用的二級(jí)種制作方法、二級(jí)種菌絲生長(zhǎng)情況、成本、優(yōu)缺點(diǎn)等進(jìn)行比較，以期為梅州及其周邊地區(qū)的靈芝栽培戶縮短生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本和提高經(jīng)濟(jì)效益提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株梅州本地靈芝種：由梅州市微生物研究所靈芝栽培基地分離培養(yǎng)，選一株菌絲濃白、健壯、無(wú)污染的作為試驗(yàn)菌株。

母種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯汁20%，葡萄糖2%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，瓊脂2%，加水至1000 mL；并以此培養(yǎng)基配方作為CK配方，進(jìn)行對(duì)比觀察。

1.2 梅州常用二級(jí)種（原種）培養(yǎng)基配方配方1：玉米粒99%，石膏1%（簡(jiǎn)稱玉米配方）；配方2：麥粒98%，石膏2%（簡(jiǎn)稱麥粒配方）；配方3：木屑74%，麩皮14%，玉米粉10%，石膏1.5%，糖0.5%（簡(jiǎn)稱木屑配方）。

1.3 常用二級(jí)種的制作

1.3.1 裝瓶滅菌 玉米粒（麥粒）配方制作方法[1-2]：玉米粒（麥粒）除雜、除壞，1%石灰水浸泡12 h后反復(fù)漂洗3～4次，清水再浸泡24 h，撈起后沸水煮20～30 min，顆粒無(wú)白心時(shí)即可撈起，晾干至表面無(wú)水，加入石膏混合拌勻，裝入750 mL透明廣口菌種瓶，裝至瓶高的2/3，每瓶折合干料150 g，封口待滅菌。

木屑配方制作方法[3～4]。按料∶水=1∶1.5加水與木屑拌好悶堆3～4 h后，再與輔料拌勻分裝到750 mL透明廣口菌種瓶中，裝至瓶高的2/3，每瓶折合干料130 g，封口待滅菌。

以上三種二級(jí)種培養(yǎng)料滅菌方法相同，121℃高壓滅菌1.5～2 h；常壓滅菌溫度達(dá)到100℃滅菌10～12 h，冷卻室自然冷卻后備用。

1.3.2 接種 均采用常規(guī)方法接種。待原種瓶的瓶?jī)?nèi)溫度下降到28℃時(shí)，利用無(wú)菌操作臺(tái)或無(wú)菌室及時(shí)接種。接種前，做好接種針等相關(guān)接種器材的滅菌、接種（室）環(huán)境的消毒和靈芝母種的挑選；接種時(shí)，一般采取兩人協(xié)作進(jìn)行，即一人解袋、封口，另一人接種，動(dòng)作要快，以防污染；接種后，做好相關(guān)詳盡接種記錄，做到有質(zhì)量問(wèn)題可追溯備查。

試驗(yàn)在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入平板尖端菌絲，每個(gè)配方各接10瓶，重復(fù)3次，25℃恒溫培養(yǎng)。

1.4 觀察測(cè)定方法培養(yǎng)過(guò)程中，觀察并記錄菌絲定植能力、菌絲生長(zhǎng)的整齊度、菌絲長(zhǎng)勢(shì)和顏色等；待菌絲全部長(zhǎng)到瓶肩部時(shí)開始沿菌絲生長(zhǎng)邊緣劃線，測(cè)量并計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度、記錄滿瓶時(shí)間等，最后對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試二級(jí)種培養(yǎng)料中靈芝菌絲的生長(zhǎng)情況觀察發(fā)現(xiàn)，靈芝菌種在三種二級(jí)種培養(yǎng)料中的定植能力都很強(qiáng)，菌絲生長(zhǎng)整齊度都還是比較好的。從表1中可以看出，靈芝菌絲生長(zhǎng)速度，依次為玉米配方＞麥粒配方＞木屑配方＞CK配方，除菌絲生長(zhǎng)速度與CK配方差異十分顯著之外，其他三者之間的差異不顯著。菌絲生長(zhǎng)速度的不同導(dǎo)致滿瓶天數(shù)也不同，但總體上三個(gè)配方的菌絲長(zhǎng)勢(shì)好、生長(zhǎng)速度快，菌絲濃密雪白。

2.2 成本計(jì)算食用菌生產(chǎn)在控制污染率的情況下，降低成本、提高經(jīng)濟(jì)效益也是食用菌生產(chǎn)者考量的重要因素。生產(chǎn)一萬(wàn)袋靈芝菌包，比較應(yīng)用三種不同配方所需成本見表2。

由表2可以看出，在靈芝生產(chǎn)中三種料靈芝二級(jí)種生產(chǎn)成本（包括人工、水電和原材料成本等）略不同，生產(chǎn)萬(wàn)袋三級(jí)種所需二級(jí)種數(shù)量和總成本也有一定的差異，但人工成本是一樣的，且占總成本的大部分。因此，很多靈芝生產(chǎn)栽培戶不太考慮原材料成本，主要還是要考慮人工成本，以方便快捷、省時(shí)省工來(lái)安排靈芝二級(jí)種生產(chǎn)。

表1 靈芝菌株在供試二級(jí)種培養(yǎng)料中的生長(zhǎng)情況

表2 靈芝二級(jí)種不同配方的成本計(jì)算

表3 三種配方制作靈芝二級(jí)種的優(yōu)缺點(diǎn)分析

3 小結(jié)與討論

通過(guò)制作方法、菌絲生長(zhǎng)情況和成本核算等綜合分析對(duì)比，可以看出三種靈芝二級(jí)種配方各有優(yōu)缺點(diǎn)（表3）。

從目前來(lái)看，梅州及其周邊地區(qū)在靈芝生產(chǎn)過(guò)程中，玉米配方和麥粒配方因其營(yíng)養(yǎng)豐富、菌絲生長(zhǎng)健壯、轉(zhuǎn)接率高、發(fā)菌快、接種簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，普遍被靈芝生產(chǎn)大戶所采用。但菌種氣生菌絲較多、菌絲易老化，不耐存放，且制作方法較繁瑣，需要一定的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)。而木屑配方因其取材容易、制作簡(jiǎn)便、成本低、相對(duì)耐存放等優(yōu)勢(shì)，也被不少靈芝生產(chǎn)戶所喜歡，但生產(chǎn)周期較長(zhǎng)，轉(zhuǎn)接工作量較大，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。筆者需要指出的是，以棉子殼為主的培養(yǎng)基配方也是靈芝二級(jí)種制備的上好選擇，但梅州地區(qū)作為非產(chǎn)棉區(qū)，來(lái)源靠外運(yùn)且不穩(wěn)定，成本較高，當(dāng)?shù)毓睫r(nóng)基本上不采用此配方，故本試驗(yàn)中未作為常用二級(jí)種配方。

以上僅是參考廣東梅州室內(nèi)赤靈芝栽培常用二級(jí)種配方所作比較，不同地區(qū)可能略有差異，菇農(nóng)可根據(jù)本地區(qū)實(shí)際情況選擇最適宜的二級(jí)種配方開展赤靈芝生產(chǎn)。