吳潔 黃慧 潘潔 馬怡 陳秀蘭

Dwyer測(cè)壓儀用于血站核酸實(shí)驗(yàn)室壓力測(cè)定的探討

吳潔 黃慧 潘潔 馬怡 陳秀蘭

目的 有效實(shí)時(shí)監(jiān)控核酸篩查實(shí)驗(yàn)室壓力梯度，對(duì)實(shí)驗(yàn)室原有安裝的壓力顯示系統(tǒng)進(jìn)行有效性驗(yàn)證，并防范由壓力系統(tǒng)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室污染。 方法 使用手持式Dwyer-477測(cè)壓儀檢測(cè)各個(gè)分區(qū)內(nèi)和相應(yīng)緩沖間的壓力，和屏顯壓力裝置比對(duì)，計(jì)算誤差率。檢測(cè)生物安全柜在未開啟和開啟兩種狀態(tài)下各個(gè)分區(qū)和緩沖間的壓力，分析生物安全柜的使用對(duì)核酸實(shí)驗(yàn)室整體壓力系統(tǒng)的影響。結(jié)果 Dwyer-477測(cè)壓儀與原有壓力檢測(cè)裝置相比，兩種壓力檢測(cè)方法誤差率范圍在10.0%~22.7%，在既定允許范圍內(nèi)，可以使用。生物安全柜在開啟后，對(duì)標(biāo)本制備室（2室）內(nèi)壓力影響較大，為避免污染，盡量在此狀態(tài)下不開啟門和交接窗，減少人員流動(dòng)。結(jié)論 Dwyer-477測(cè)壓儀具高精密度、攜帶方便、液晶數(shù)字顯示和可被校準(zhǔn)的優(yōu)點(diǎn)，一是可對(duì)屏顯系統(tǒng)定期檢查和校準(zhǔn)，更好的監(jiān)測(cè)整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的壓力分布，二是也可作為屏顯系統(tǒng)的備用設(shè)備，更好地防范核酸實(shí)驗(yàn)室污染，保障血液檢測(cè)質(zhì)量。

核酸檢測(cè) 血站 核酸實(shí)驗(yàn)室 Dwyer測(cè)壓儀 壓力檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室污染

采供血系統(tǒng)開展核酸檢測(cè)既能有效縮短窗口期，同時(shí)又能彌補(bǔ)ELISA法因病毒變異或隱匿而漏檢的缺陷，對(duì)降低輸血風(fēng)險(xiǎn)、保證血液安全具有重要的作用[1]。西方發(fā)達(dá)國家早在上世紀(jì)末就已經(jīng)開展病毒核酸篩查（NAT）[2]。國家衛(wèi)計(jì)委和財(cái)政部《關(guān)于做好血站核酸檢測(cè)工作的通知》中明確要求，2015年底血液篩查核酸檢測(cè)必須覆蓋全國。目前，全國的血站核酸篩查實(shí)驗(yàn)室正在快速建設(shè)中，本站核酸篩查實(shí)驗(yàn)室于2014 年通過省臨檢中心驗(yàn)收，在建設(shè)和驗(yàn)收過程中，防污染是實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中的重要問題[3]，而在眾多易污染因素中，最主要的是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染[4]。因此，對(duì)一個(gè)配備凈化空調(diào)的核酸實(shí)驗(yàn)室而言，通風(fēng)系統(tǒng)中的壓力控制就顯得尤為重要。在2015版《血站技術(shù)操作規(guī)程》（以下簡(jiǎn)稱規(guī)范）4.5.2中明確指出：擴(kuò)增后區(qū)域保持負(fù)壓狀態(tài)，其他區(qū)域保持正壓或常壓狀態(tài)，防止擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)入擴(kuò)增前區(qū)域。雖然本室在設(shè)計(jì)安裝時(shí)已配置了壓力液晶顯示裝置，但一方面需要對(duì)廠家安裝的壓力屏顯系統(tǒng)進(jìn)行有效性驗(yàn)證；另一方面也需要對(duì)壓力系統(tǒng)進(jìn)行持續(xù)監(jiān)控。因此，本室嘗試使用美國Dwyer-477手持式數(shù)顯壓力測(cè)量?jī)x（以下簡(jiǎn)稱Dwyer-477測(cè)壓儀）對(duì)實(shí)驗(yàn)室各區(qū)壓力進(jìn)行測(cè)量，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

材料與方法

1 環(huán)境 嚴(yán)格分區(qū)為3個(gè)房間的核酸篩查實(shí)驗(yàn)室：試劑耗材準(zhǔn)備間（1室）、標(biāo)本處理制備間（2室）和擴(kuò)增檢測(cè)間（3室）。

2 設(shè)備與材料 凈化空調(diào)系統(tǒng)（廠家余姚捷豐）、BSC-1500IIB2-X型生物安全柜（廠家濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司）、溫濕度計(jì)、美國Dwyer-477測(cè)壓儀（校準(zhǔn)標(biāo)號(hào)：915000615）。

3 方法與步驟

3.1 將Dwyer-477測(cè)壓儀送交計(jì)量局進(jìn)行壓力校準(zhǔn)，以測(cè)壓儀測(cè)得壓力作為參考標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 設(shè)定屏顯系統(tǒng)允許使用條件：房間內(nèi)誤差率≤10%；緩沖間內(nèi)由于壓力絕對(duì)值較小，誤差率設(shè)定≤25% 。以校準(zhǔn)后的Dwyer-477測(cè)壓儀測(cè)得值為標(biāo)準(zhǔn)，誤差率=測(cè)量值與屏顯值的差的絕對(duì)值/測(cè)量值*100% 。

3.3 啟動(dòng)Dwyer-477測(cè)壓儀，調(diào)零，連接塑料導(dǎo)管，檢查接口密閉性等準(zhǔn)備工作，備用。

3.4 開啟核酸實(shí)驗(yàn)室內(nèi)凈化空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)，20 min后記錄液晶顯示屏中各個(gè)房間和緩沖間的壓力，使用Dwyer-477測(cè)壓儀對(duì)3個(gè)分區(qū)及其緩沖間壓力進(jìn)行檢測(cè)并記錄。此為狀態(tài)1。

3.5 開啟生物安全柜，升起玻璃擋板至平時(shí)工作時(shí)高度，點(diǎn)擊“WM”模式，等待20 min。此為狀態(tài)2。記錄液晶顯示屏中各個(gè)房間和緩沖間的壓力。使用Dwyer-477測(cè)壓儀再次對(duì)試劑準(zhǔn)備間、標(biāo)本制備間和擴(kuò)增間3個(gè)房間及其緩沖間壓力進(jìn)行檢測(cè)并記錄。注意測(cè)量過程中，須在房間門關(guān)好后，等待3 min，待壓力穩(wěn)定后再行測(cè)量記錄。

3.6 在1年內(nèi)測(cè)量實(shí)驗(yàn)室壓力5次，持續(xù)用Dwyer-477測(cè)壓儀監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)分區(qū)的壓力。

結(jié)果

使用測(cè)壓儀檢測(cè)與屏顯比對(duì)的情況見表1，連續(xù)監(jiān)測(cè)不同狀態(tài)下3個(gè)分區(qū)內(nèi)壓力的結(jié)果見表2、3。

表1 使用測(cè)壓儀檢測(cè)與屏顯比對(duì)情況（單位 Pa）

表3 連續(xù)監(jiān)測(cè)3個(gè)分區(qū)內(nèi)壓力的統(tǒng)計(jì)表（單位 Pa）狀態(tài)2

討 論

血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室壓力系統(tǒng)功能正常是防止核酸實(shí)驗(yàn)室污染的重要保障，目前多數(shù)血站是依靠實(shí)驗(yàn)室本身的壓力表顯示實(shí)驗(yàn)室內(nèi)壓力。我室嘗試使用Dwyer-477壓力測(cè)量?jī)x，具有±0.1%高精密度、手持便于攜帶、液晶數(shù)字讀數(shù)等優(yōu)點(diǎn)。測(cè)量方法為測(cè)量者手持測(cè)壓儀站于被測(cè)房間內(nèi)，測(cè)壓儀連接的塑料長導(dǎo)管置于室外大氣壓內(nèi)，進(jìn)行測(cè)量讀數(shù)。測(cè)得值為房間內(nèi)壓力和外界大氣壓之間的差值。

雖然我室在核酸篩查實(shí)驗(yàn)室每個(gè)房間內(nèi)，均安裝壓力感應(yīng)裝置，在實(shí)驗(yàn)室外部有液晶顯示屏，用以顯示實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部壓力，經(jīng)測(cè)量對(duì)比，發(fā)現(xiàn)液晶顯示屏顯示的壓力并不完全和Dwyer-477測(cè)壓儀相符，見表1，誤差率范圍在10.0%~22.7%，誤差率較高的主要集中在緩沖區(qū)：10.0%~22.7%，房間內(nèi)誤差率較?。?.9%~8.6%，符合既定要求，屏顯系統(tǒng)可以使用。存在誤差率的原因，可能一方面是測(cè)量工具差異，另一方面是房間內(nèi)測(cè)壓點(diǎn)位不同造成的?？紤]到Dwyer-477測(cè)壓儀是經(jīng)市計(jì)量所校準(zhǔn)，其結(jié)果更具有可信度，因此我室定期使用Dwyer-477測(cè)壓儀校準(zhǔn)屏顯的結(jié)果。同時(shí)考慮到屏顯系統(tǒng)壓力讀取的方便性，直接讀取屏顯結(jié)果，用于監(jiān)測(cè)每日實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的壓力，為實(shí)驗(yàn)室的壓力系統(tǒng)提供了可靠保障。

在狀態(tài)1的情況下，即生物安全柜未開啟時(shí)，3個(gè)分區(qū)房間內(nèi)壓力呈現(xiàn)出壓力梯度變化：1室壓力>2室壓力>3室壓力，其中3室壓力始終為負(fù)壓，保證在門開啟狀態(tài)下，氣流方向是向內(nèi)的，以便將帶出的污染減小到最低程度[5]，這點(diǎn)也符合規(guī)范要求。1室緩沖間壓力均小于1室內(nèi)壓力，且1室內(nèi)為正壓，保證了1室內(nèi)為潔凈區(qū)。2室和3室都屬于污染區(qū)，2室正壓3室負(fù)壓，且緩沖間壓力都大于相應(yīng)房間內(nèi)壓力，防止污染物通過緩沖區(qū)。

在狀態(tài)2的情況下，3個(gè)分區(qū)房間內(nèi)壓力也呈現(xiàn)出壓力梯度 1室壓力>2室壓力>3室壓力。由于生物安全柜為全排型，開啟后2室內(nèi)壓力降低，這時(shí)該區(qū)不再處于正壓或常壓狀態(tài)。緩沖區(qū)經(jīng)過測(cè)試仍然為微正壓狀態(tài)，表3中均值為1.9Pa，可防止污染物通過緩沖區(qū)。表1和表3均顯示1區(qū)和3區(qū)也受到生物安全柜開啟的影響，壓力均有所下降，這與我室凈化空調(diào)的新風(fēng)系統(tǒng)管路設(shè)計(jì)有關(guān)：我室3個(gè)房間共用1個(gè)凈化空調(diào)系統(tǒng)，新風(fēng)在管道中通過初效、中效過濾器后，管道分為3路，分別供給1、2、3室，再通過高效過濾器后進(jìn)入3個(gè)房間。在進(jìn)風(fēng)風(fēng)機(jī)功率不變的前提下，隨著進(jìn)入2室的新風(fēng)速度的增加，進(jìn)入1、3室的新風(fēng)速度理論上是降低的。因此，房間內(nèi)壓力也是相應(yīng)降低。經(jīng)過檢測(cè)，1區(qū)仍然為正壓，保持了該區(qū)的潔凈度，也符合規(guī)范要求。值得一提的是，在使用生物安全柜時(shí)，為避免實(shí)驗(yàn)室污染，2區(qū)和3區(qū)之間的傳遞窗盡量不要開啟。

影響實(shí)驗(yàn)室內(nèi)壓力的因素有很多，包括：通風(fēng)設(shè)備、生物安全柜使用、房間和緩沖間氣密性的穩(wěn)定性等[5]。我室使用Dwyer-477壓力測(cè)量?jī)x已有一段時(shí)間，使用時(shí)有幾點(diǎn)需要注意：1是測(cè)量時(shí)機(jī)，無論是狀態(tài)1還是狀態(tài)2，都需要在整個(gè)通風(fēng)系統(tǒng)壓力穩(wěn)定后進(jìn)行測(cè)量。進(jìn)入房間或緩沖間，關(guān)門后也需要等待2~3 min。2是測(cè)量點(diǎn)位，在導(dǎo)管足夠長的情況下，盡量在房間內(nèi)多測(cè)幾個(gè)點(diǎn)位，然后取平均值，減小隨機(jī)誤差。3是定期檢查門或窗的氣密性，隨著實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)間延長，連接門縫的膠條也容易損壞或脫落，應(yīng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)更換。

壓力屏顯系統(tǒng)可作為每日工作前的一個(gè)檢查項(xiàng)目，而本次使用的Dwyer-477測(cè)壓儀具有攜帶方便和可被校準(zhǔn)的優(yōu)點(diǎn)，一是可對(duì)屏顯系統(tǒng)定期檢查和校準(zhǔn)，更好地監(jiān)測(cè)整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的壓力分布；二是也可作為屏顯系統(tǒng)的一個(gè)備用設(shè)備，畢竟醫(yī)用電子產(chǎn)品都有一定的故障率，故障成因也很復(fù)雜[6]。核酸篩查實(shí)驗(yàn)室中的壓力控制系統(tǒng)只是實(shí)驗(yàn)室防污染控制的一個(gè)方面，要全面防范實(shí)驗(yàn)室污染，還需要平時(shí)從細(xì)節(jié)做起，加強(qiáng)污染防范意識(shí)，一旦發(fā)現(xiàn)及時(shí)查找原因[3]，這樣才能更好地保障臨床用血安全。

1 蔡明翠，吉克春農(nóng)，郭豫川，等. 核酸檢測(cè)在血液篩查中的重要作用[J]. 臨床血液學(xué)雜志，2015，28（4）：339-341.

2 Hourfar MK，Jork C，Sehottstedt V，et al．Experience of German Red Cross blood donor services with nucleic acid testing：results of screening more than 30 million blood donations for human immuno deficiency virus-1，hepatitis C virus，and hepatitis B virus[J]．Transfusion，2008，48（8）：1558-1566．

3 顏秀娟，邱昌文，石慶秋，等. 核酸血液篩查污染控制措施[J]. 中國輸血雜志，2012，25（8）：807-808.

4 冷嬋，王中梅，于磊，等．血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別、評(píng)估及控制方法探討[J]．中國輸血雜志，2011，24（7）：547-550．

5 牛維樂，蘇莉. 生物安全實(shí)驗(yàn)室壓力波動(dòng)的原因和控制措施的探討[J]. 制冷空調(diào)與電力機(jī)械，2008，29（1）：72-74.

6 袁家平，張宗禮，徐文斌，等. 醫(yī)用電子儀器故障原因統(tǒng)計(jì)分析[J]. 醫(yī)療衛(wèi)生裝備，1996，3：41-43.

R392.11

A

1671-2587（2017）03-0301-03

2016-12-18）

（本文編輯：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.03.026

241000 安徽省蕪湖市中心血站

吳潔（1981–），男，安徽涇縣人，主管技師，主要從事實(shí)驗(yàn)室管理及檢驗(yàn)工作，（Tel）18155366032（E-mail） 893493499@qq.com。