郭巍 張婷

獻(xiàn)血者HIV篩查結(jié)果的回顧性分析及灰區(qū)設(shè)置的探討*

郭巍 張婷

目的 探討ELISA法的HIV篩查實(shí)驗灰區(qū)設(shè)置的必要性。方法 將2012~2016年獻(xiàn)血者初篩有反應(yīng)性的標(biāo)本送HIV確證實(shí)驗室進(jìn)行確證，初篩結(jié)果按S/CO值區(qū)間分組進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 2012~2016年共檢測獻(xiàn)血者標(biāo)本165 189例，雙試劑或單試劑雙孔復(fù)查有反應(yīng)性上報HIV確證實(shí)驗室630例，其中確證陽性96例；索林試劑初篩有反應(yīng)性標(biāo)本514例，115例S/CO值位于0.8~1.0區(qū)間的確證結(jié)果均為陰性；金豪試劑初篩有反應(yīng)性標(biāo)本239例，17例S/CO值位于0.8~1.0區(qū)間的確證結(jié)果均為陰性。結(jié)論 ELISA法的HIV篩查實(shí)驗沒有必要設(shè)置灰區(qū)。

人類免疫缺陷病毒 回顧性分析 灰區(qū)

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染引起的重大傳染病，因其對人體免疫系統(tǒng)的破壞，使得該病有較高的致死率。HIV主要經(jīng)血液傳播、性傳播和母嬰垂直傳播，其中血液傳播是其感染的重要途徑[1]。目前HIV初篩主要采用半定量檢測方法ELISA，該法根據(jù)臨界值（cut off值，本文用CO值表示）來判斷標(biāo)本是否有反應(yīng)性，低于CO值為陰性，高于CO值為陽性，但還有一部分處于CO值附近的標(biāo)本，其結(jié)果的陰陽性很難判斷。因此大多數(shù)實(shí)驗室設(shè)置了灰區(qū)范圍，處于灰區(qū)的結(jié)果被判定為有反應(yīng)性，該血液不能用于臨床。但目前血液供需矛盾日益增大，較高的假陽性率會加大血液浪費(fèi)?，F(xiàn)對2012~2016年本院獻(xiàn)血者HIV篩查結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，對灰區(qū)設(shè)置的必要性進(jìn)行探討。

材料與方法

1 材料

1.1 調(diào)查對象：本院2012年1月~2016年11月的無償獻(xiàn)血者標(biāo)本。獻(xiàn)血者年齡18~55周歲，均符合《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》。

1.2 試劑：HIV抗體抗原聯(lián)合診斷試劑盒（ELISA）來自意大利索林公司；HIV抗體診斷試劑盒（ELISA）來自北京金豪公司。試劑均在有效期內(nèi)使用，并由國家食品藥品監(jiān)督管理局批批檢合格。

1.3 儀器：Microlab STARlet全自動加樣儀（瑞士HAMILTON），Microlab F.A.M.E.全自動酶免分析儀（瑞士HAMILTON）。2 方法 使用兩種試劑對獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行平行實(shí)驗，檢測步驟、實(shí)驗有效性和結(jié)果判定按試劑說明書執(zhí)行，加樣及檢測分別由STAR全自動加樣儀和FAME全自動酶免分析儀自動完成?；覅^(qū)下限設(shè)置為cut off值的80%。兩種試劑（以下稱雙試劑）檢測結(jié)果的S/CO值均小于0.8，判為無反應(yīng)性；雙試劑檢測結(jié)果S/CO>0.8，判為有反應(yīng)性；一種試劑（以下稱單試劑）檢測結(jié)果S/CO>0.8，則用雙試劑分別進(jìn)行雙孔復(fù)試，只要其中一種試劑檢測結(jié)果S/CO>0.8，即判為有反應(yīng)性，否則為無反應(yīng)性。根據(jù)《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》[2]要求，判定為有反應(yīng)性的結(jié)果送HIV確證實(shí)驗室進(jìn)行WB試驗確證，確證結(jié)果以反饋報告單為依據(jù)。

結(jié)果

1 2012年1月~2016年11月共檢測獻(xiàn)血者標(biāo)本165 189例，其中雙試劑有反應(yīng)性或單試劑雙孔復(fù)查有反應(yīng)性上報630例，上報率（上報數(shù)/獻(xiàn)血人數(shù)）0.381%，陽性96例，陽性率（陽性數(shù)/獻(xiàn)血人數(shù)）0.058%，陽性上報率（陽性數(shù)/上報數(shù)）15.2%。每年的篩查結(jié)果見表1。

表1 2012~2016年HIV抗體篩查陽性及上報情況

2 按S/CO值區(qū)間分組，分別統(tǒng)計兩種試劑初篩有反應(yīng)性標(biāo)本的確證結(jié)果。索林HIV試劑檢測標(biāo)本有反應(yīng)性上報514例，陰性上報率（陰性數(shù)/上報數(shù)）79.2%，不確定上報率（不確定數(shù)/上報數(shù)）2.1%，陽性上報率（陽性數(shù)/上報數(shù)）18.7%，見表2。金豪HIV試劑檢測標(biāo)本有反應(yīng)性上報239例，陰性上報率57.5%，不確定上報率2.5%，陽性上報率39.8%，見表3。

表2 索林HIV抗體篩查及回報結(jié)果情況

表3 金豪HIV抗體篩查及回報結(jié)果情況

討 論

艾滋病是一種危害性極大的由HIV引起的全身性免疫缺陷病，感染后機(jī)體易感染各種疾病，病死率極高。自1981年在美國被發(fā)現(xiàn)以來，呈全球性傳播，近年來我國HIV感染人群逐漸增加，受感染者也從高危人群轉(zhuǎn)向普通人群[3，4]。本研究發(fā)現(xiàn)，自2012~2014年本地區(qū)獻(xiàn)血者HIV陽性率明顯增加，科室在2015年采用了網(wǎng)絡(luò)信息化管理，加強(qiáng)對反復(fù)頻繁獻(xiàn)血者的監(jiān)管，淘汰了一些隱匿的HIV攜帶人群，對于艾滋病傳播有了一定的控制。有研究表明，18~30周歲的未婚男性是目前艾滋病檢出陽性率最高的人群[5]。本研究也發(fā)現(xiàn)，確證陽性的96例標(biāo)本中，95例為男性，只有1例為女性，可能與男同性戀和吸毒有關(guān)。

從表1可以看出，不僅HIV的陽性率在增加，初篩實(shí)驗有反應(yīng)性的上報率也明顯增加，從2012年的0.336%增長到2016年的0.504%。為此本文分別將兩種試劑按S/CO值區(qū)間分組進(jìn)行回顧性分析。由表2可以看出，索林HIV試劑檢測結(jié)果位于S/CO值0.8~0.9區(qū)間和0.9~1.0區(qū)間的上報比例分別為11.7%和10.7%，且確證結(jié)果全為陰性，陽性上報率為0。在S/CO值1.1~1.2區(qū)間才開始出現(xiàn)4例不確定的確證結(jié)果，在S/CO值1.2～10.0區(qū)間才開始出現(xiàn)1例陽性確證結(jié)果，95例陽性確證結(jié)果均出現(xiàn)在S/CO值>10.0區(qū)間。由表3可以看出，金豪HIV試劑檢測結(jié)果位于S/CO值0.8~0.9區(qū)間和0.9~1.0區(qū)間的上報率分別為1.3%和5.9%，且確證結(jié)果全為陰性，陽性上報率為0。在S/CO值1.0~1.1區(qū)間才開始出現(xiàn)2例不確定的確證結(jié)果，95例陽性確證結(jié)果均出現(xiàn)在S/CO值>15.0區(qū)間。根據(jù)這些數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，S/CO值與陽性確證結(jié)果之間確實(shí)存在一定的相關(guān)性，兩種試劑檢測結(jié)果S/CO值0.8~1.0區(qū)間，也就是文中所設(shè)置的灰區(qū)范圍，確證結(jié)果無一例陽性。

很多實(shí)驗室的灰區(qū)是按cut off值的80%或70%設(shè)置的，也有些實(shí)驗室是按（1±2 CV）設(shè)置的[6]。有報道[7]灰區(qū)的設(shè)置對于HBV和HCV等的檢測，可以提高其檢出敏感性，但不適用于HIV檢測。

本研究建議，ELISA法的HIV篩查實(shí)驗可以不設(shè)置灰區(qū)，或根據(jù)試劑說明書要求設(shè)置灰區(qū)?；覅^(qū)范圍設(shè)置過大，并不能提高試劑的敏感性，且HIV初篩結(jié)果假陽性率升高，不但會造成血液浪費(fèi)，也會造成獻(xiàn)血者的心理負(fù)擔(dān)，不利于改善目前血荒的狀態(tài)，與文獻(xiàn)[8]的觀點(diǎn)一致。建議采供血機(jī)構(gòu)增加敏感性更高的核酸檢測，既可以縮短HIV檢測的窗口期，又能夠有效避免血液浪費(fèi)。

1 Uzun B，Gunger S，Demirci M. Seroprevalence of transfusion transmissible infections among blood donors in western part of Turkey： A six-year study[J]. Transfus Apher Sci，2013，49（3）：511-515.

2 中國疾病預(yù)防控制中心. 中國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范[S].北京：中國疾病預(yù)防控制中心，2015：15-18.

3 楊思忠，馮秋霞，侯云，等. 青島地區(qū)無償獻(xiàn)血人群HIV篩查結(jié)果回顧性調(diào)查[J]. 中國輸血雜志，2015，28（4）：428-430.

4 王東，鄧雪蓮，臧亮，等.大連地區(qū)無償獻(xiàn)血者人群中HIV感染者流行病學(xué)特征分析[J].中國輸血雜志，2013，26（8）：746-747.

5 董麗，曹誼，張輝，等.2002-2013年蘇州市無償獻(xiàn)血者HIV感染情況分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，52（35）：106-108.

6 黃啟強(qiáng)，張子茵，謝炳龍，等.ELISA法檢測HBsAg的灰區(qū)設(shè)置思路研究[J].現(xiàn)代診斷與治療，2015，26（12）：2753-2754.

7 魏蘭華. ELISA法檢測抗-HIV實(shí)驗中灰區(qū)設(shè)置的探討[J].臨床輸血與檢驗，2015，16（6）：566-681.

8 岳獻(xiàn)榮，孟毓，親小敏.從無償獻(xiàn)血者HIV確證結(jié)果探討灰區(qū)的設(shè)置[J].醫(yī)學(xué)檢驗，2015，21：189-190.

9 蔡云玲，刁麗波，洪汾.抗-HIV檢測結(jié)果分析及灰區(qū)設(shè)置探討[J].中國輸血雜志，2015，28（9）：1142-1143.

10 周普輝，李勇，李俊明.54例抗-HIV抗體初篩陽性結(jié)果的回顧性分析[J].實(shí)驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2011，29（1）：43-44.

Retrospective Analysis of HIV Screening Results Among Blood Donors and the Establishment of Grey Area

GUO Wei，ZHANG Ting.
Department of Blood Transfusion，Chinese PLA General Hospital，100853

Objective To discuss the necessity of grey area in HIV screening experiment of ELISA. Methods The blood sample which was reactive in the preliminary screening from 2012 to 2016 were sent to the HIV confirmation laboratory. The results of preliminary screening were analyzed retrospectively according to S/CO value. Result From 2012 to 2016，165189 cases blood donors were detected. 630 cases were reported to HIV confirmation laboratory by double reagent reactive or single reagent was double reactivity. Positive results were confirmed in 96 cases.514 cases were reactive in the reagent of Sorin. 115 cases of S/CO value in the 0.8-1.0 interval were negative. 239 cases were reactive in the reagent of Jinhao. 17 cases of S/CO value in the 0.8-1.0 interval were negative. Conclusion To set the grey area in the HIV screening test by ELISA is unnecessary.

HIV Retrospective analysis Grey area

R193.2 R373

A

1671-2587（2017）03-0281-03

2017-01-05）

（本文編輯：王虹）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.03.020

*本課題受解放軍總醫(yī)院扶持基金項目（No.2015FC-TSYS-1037） 資助

100853 北京解放軍總醫(yī)院輸血科

郭巍（1987–），女，河北保定人，檢驗師，學(xué)士，（E-mail）626673531@qq.com。

張婷，女，碩士，主要從事臨床輸血工作，（E-mail）zhangting810626@163.com。