趙磊，于丹，趙賓

（1．四平市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 四平 136000；2．長(zhǎng)春長(zhǎng)生生物科技有限責(zé)任公司，吉林 長(zhǎng)春 130000）

氣相色譜法測(cè)定白花菜子中油酸的含量

趙磊1，于丹2，趙賓1

（1．四平市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 四平 136000；2．長(zhǎng)春長(zhǎng)生生物科技有限責(zé)任公司，吉林 長(zhǎng)春 130000）

目的：建立氣相色譜法測(cè)定白花菜子中油酸的含量。方法：采用毛細(xì)管色譜柱；載氣：氮?dú)?；氫火焰離子化檢測(cè)器；流速2.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度：280℃；柱溫箱溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：280℃；載氣流速：2.0 mL/min。結(jié)果：油酸在0.0981～0.981 mg/mL內(nèi)與峰面積具有良好的線性關(guān)系；加樣回收率均符合要求。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便快捷，準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，靈敏度高，可用于白花菜子的含量檢測(cè)。

白花菜子；油酸；氣相色譜；含量測(cè)定

白花菜子為白花菜科植物白花菜（Cleome gynandra L.）的種子，具有祛風(fēng)散寒、活血止痛的功效。常用于治療風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、痔瘡漏管等。其全草為一年生草本植物，生于低海撥田野、路邊、荒地，分布廣泛，資源豐富，嫩莖葉可供食用[1-3]。目前，尚無(wú)控制其含量測(cè)定的報(bào)道。在《中藥大辭典》（上冊(cè)）[7]1028頁(yè)白花菜子中，含有油酸成分，因此采用氣相色譜法測(cè)定其主要成分油酸，具有穩(wěn)定可控的效果。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫7890B氣相色譜儀，氫火焰離子化測(cè)器；氣相色譜柱為WondaCAP5 30 m×320 μm×0.25μm；BT125D型萬(wàn)分之一電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠）。

1.2 試劑與試藥

油酸對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：111621-200301）；白花菜子（河北安國(guó)藥材市場(chǎng)，經(jīng)鑒定為白花菜成熟的種子）；石油醚溶液60～90℃（天津康科德科技有限公司，批號(hào)：160118）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：WondaCAP5 30 m×320 μm×0.25 μm；載氣：氮?dú)猓贿M(jìn)樣口溫度：280℃；柱溫箱溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：280℃；載氣流速：2.0 mL/min；隔墊吹掃量：3 mL/min，尾吹：35 mL/min，儀器設(shè)定分流比：20∶1進(jìn)樣量：1 μL；檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器[4]。

2.2 溶液的制備

2.2.1 油酸對(duì)照品的制備 精密稱(chēng)取9.78 mg的油酸對(duì)照品，置10 mL容量瓶中，加入石油醚（60～90℃）溶液，稀釋至刻度，配置成濃度為0.978 mg/mL的對(duì)照品溶液，備用。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密稱(chēng)取白花菜子0.2504 g，置錐形瓶中，精密加入石油醚（60～90℃）溶液50 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，84℃加熱回流30 min，放冷，補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，既得[5]。

2.3 色譜圖

分別精密吸石油醚（60～90℃）溶劑、油酸對(duì)照品溶液、供試品溶液1 μL，注入氣相色譜儀分析，見(jiàn)圖1。

圖1 氣相色譜圖

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取供試品6份，按照“2.2.2”項(xiàng)下的配制方法制備溶液，并依照上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果油酸的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.81%。表明方法重復(fù)性良好[5]。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取油酸對(duì)照品溶液1 μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定其峰面積，RSD分別為0.86%（n＝6）。結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.6 線性關(guān)系

將油酸對(duì)照品置于10 mL容量瓶中，精密稱(chēng)取9.81 mg，稀釋至刻度采用石油醚（60～90℃）溶解，混勻。精密吸取溶液0.1，3，5，7，10 mL置10 mL容量瓶中，加石油醚（60～90℃）稀釋至刻度，混勻。注入氣相色譜儀，按照“2.1”色譜條件對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定，以橫坐標(biāo)（X）為濃度，縱坐標(biāo)（Y）為峰面積，峰面積（Y）對(duì)濃度（X）作為線性回歸方程，

Y＝15.347X，r＝0.9991，

線性范圍為0.0981～0.981 mg/mL。結(jié)果表明，呈現(xiàn)出良好線性關(guān)系[6]。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，按照“2.1”色譜條件分別作3，6，9，12，24 h的色譜圖，測(cè)定其穩(wěn)定性，油酸的峰面積RSD為0.86%，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明樣品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定，該方法穩(wěn)定性良好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取已知含量的供試品6份，分別依次精密加入用石油醚（60～90℃）配置成濃度1.01 mg/mL的油酸對(duì)照品5 mL，按供試品氣相色譜方法及色譜條件制備，計(jì)算其加標(biāo)回收率。結(jié)果表明，6份油酸的總回收率為96.91%，RSD值為1.29%，平均回收率為95.78%，RSD值為1.67%，該方法準(zhǔn)確率高，見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.9 樣品含量測(cè)定

按“2.1”色譜條件測(cè)定市售三批供試品溶液，樣品中百分含量值測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 三批樣品含量測(cè)定結(jié)果 （%）

3 討論

3.1 供試品溶液的制備采用石油醚回流提取，應(yīng)采用補(bǔ)足減失質(zhì)量法，因?yàn)榛亓髦袝?huì)有溶劑損失。

3.2 進(jìn)樣口溫度：280℃；柱溫箱溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：280℃，效果較好。

3.3 曾采用槲皮素作為對(duì)照品，采用液相色譜進(jìn)行定量測(cè)定，結(jié)果未檢出槲皮素。見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道[7]油酸在白花菜子中含量較高，因此采用氣相色譜法，作為測(cè)定油酸的定量依據(jù)。

[1]馮文.白花菜子藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的探討[J].中國(guó)藥物評(píng)價(jià),2014,31(4):196-198.

[2]耿紅梅,王艷,高煥君,等.白花菜子化學(xué)成分的初步研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(3):560-561.

[3]耿紅梅,苗慶峰,呂海燕.等.白花菜子揮發(fā)油抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2012,23(1):58-59.

[4]伍乃英,葉崇義,董小平.氣相色譜法測(cè)定辛香止痛散中薄荷腦和冰片含量[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1996,27(3):167-171.

[5]趙磊,鄧瑩,李巖,等.GC法同時(shí)測(cè)定利膽排石片中厚樸酚及和厚樸酚含量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2014,3(3):237-238.

[6]王天亮,諸葛俊.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定活絡(luò)酊中樟腦、薄荷腦的含量[J].中成藥,2010,32(9):1644-1646.

[7]南京中醫(yī)藥大學(xué)編委會(huì).中藥大辭典(上冊(cè))[S].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2006:1028.

本文編輯：張鈺

Determination of Oleinic Acid Content in Cleome gynandra Seeds by Gas Chromatography

Zhao Lei1, Yu Dan2, Zhao Bin1

(1. Siping Institute for Food and Drug Control, Jilin Siping 136000, China; 2.Changchun Changsheng Biotechnology Limited Liability Company, Jilin Changchun 130000, China)

Objective：To develop a gas chromatography (GC) method for determination of oleic acid content in Cleome gynandra seeds. Methods：Capillary column was adopted serving nitrogen as carrier gas. Hydrogen flame ionization detector was used. The flow rate was 2 mL/min, while the inlet temperature was 280℃, the column temperature was 250℃, the detector temperature was 280℃, and the flow rate of carrier gas was 2.0 mL/min. Results：The oleic acid at a concentration of 0.098 1～0.981 μg/mL showed good linear relationship to the peak area. The recovery rate of samples met the relevant requirements. Conclusion：The developed method is simple, rapid, accurate, reproducible and sensitive, which may be used for determination of oleic acid content in Cleome gynandra seeds.

Cleome gynandra Seed; Oleic Acid; Gas Chromatography (GC); Content Determination

TS227；O657.7＋1

A

10.3969/j.issn.2096-3327.2017.04.008

2017-02-08

趙磊，男，碩士，副主任藥師。研究方向：色譜與光譜。通訊作者E-mail：zhaolei0433@sina.com