馬 克，黃秀秀，戴色琴，倪登輝

（美豐農(nóng)化有限公司，浙江溫州 325011）

◆農(nóng)藥分析◆

7%咪鮮·吡蟲啉懸浮種衣劑高效液相色譜分析方法研究

馬 克，黃秀秀，戴色琴，倪登輝

（美豐農(nóng)化有限公司，浙江溫州 325011）

采用高效液相色譜，以甲醇和水（pH值3.0）為流動(dòng)相，使用Shim-pack VP-ODSC18不銹鋼柱和二極管陣列檢測(cè)器，在235 nm波長(zhǎng)下測(cè)定7%咪鮮·吡蟲啉懸浮種衣劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)。吡蟲啉和咪鮮胺標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.020和0.011，變異系數(shù)分別為0.40%和0.57%，平均回收率分別為99.88%和99.73%，線性相關(guān)系數(shù)均為1.000 0。

吡蟲啉；咪鮮胺；高效液相色譜；分析

吡蟲啉（imidacloprid）為新煙堿類殺蟲劑，其作用方式新穎，選擇性高，具有高效、廣譜的殺蟲活性。自1991年吡蟲啉投入市場(chǎng)以來，其已覆蓋全球幾乎所有國(guó)家，用于160多種作物。吡蟲啉具有內(nèi)吸性，因此，種子處理、土壤處理和葉面噴霧皆可[1-2]。咪鮮胺（prochloraz）為咪唑類殺菌劑，其低毒、高效，對(duì)子囊菌和半知菌引起的多種病害有效[3]。將吡蟲啉和咪鮮胺復(fù)配，擴(kuò)大了防治譜，病蟲兼治，對(duì)水稻惡苗病和水稻薊馬有良好的防治效果。兩者復(fù)配懸浮種衣劑的分析方法未見公開報(bào)道。本文建立了在同一液相色譜條件下，同柱分離吡蟲啉和咪鮮胺的方法。該方法操作簡(jiǎn)單、快速，重現(xiàn)性好。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和儀器

甲醇（色譜純）、水（新制2次蒸餾水）、冰乙酸（分析純）；吡蟲啉標(biāo)樣（98.5%）、咪鮮胺標(biāo)樣（98.7%），上海市農(nóng)藥研究所；7%咪鮮·吡蟲啉懸浮種衣劑（2%咪鮮胺＋5%吡蟲啉），由美豐農(nóng)化有限公司提供。

Shimadzu LC-20A高效液相色譜儀，具有二極管陣列檢測(cè)器，日本島津公司；Shimadzu LC-Solution色譜工作站；色譜柱：Shim-pack VP-ODSC18不銹鋼柱（150mm×4.6mm，5μm）；過濾器：濾膜孔徑0.45μm；AE 240電子天平；SK3200LH型超聲波振蕩器。

1.2 液相色譜操作條件

流動(dòng)相：甲醇＋水（用冰乙酸調(diào)至pH值3.0），體積比75∶25；流速：1.0m L/m in；檢測(cè)波長(zhǎng)：235 nm；進(jìn)樣量：5μL。保留時(shí)間：吡蟲啉約2.0m in、咪鮮胺約7.7m in（色譜圖如圖1、圖2）。

圖1 吡蟲啉、咪鮮胺標(biāo)樣HPLC譜圖

圖2 7%咪鮮·吡蟲啉懸浮種衣劑HPLC譜圖

1.3 測(cè)定及計(jì)算

1.3.1 溶液配制

稱取吡蟲啉標(biāo)樣約0.030 g、咪鮮胺標(biāo)樣約0.012 g（均精確至0.000 2 g），置于50m L容量瓶中，甲醇稀釋至刻度，超聲15m in，冷卻至室溫，用45μm濾膜過濾，得標(biāo)樣溶液。

稱取約0.62 g（精確至0.000 2 g）試樣于50m L容量瓶中，甲醇稀釋至刻度，超聲15m in，冷卻至室溫，用45μm濾膜過濾，得試樣溶液。

1.3.2 測(cè)定

在1.2條件下，待儀器穩(wěn)定后，注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣中有效成分峰面積相對(duì)變化＜1.5%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 計(jì)算

將試樣和標(biāo)樣溶液中吡蟲啉或咪鮮胺的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中吡蟲啉或咪鮮胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

試中：A1—標(biāo)樣溶液中，吡蟲啉或咪鮮胺峰面積的平均值；A2—試樣溶液中，吡蟲啉或咪鮮胺峰面積的平均值；m1—標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—標(biāo)樣中吡蟲啉或咪鮮胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

通過高效液相色譜二極管陣列檢測(cè)器，對(duì)吡蟲啉和咪鮮胺標(biāo)樣溶液進(jìn)行掃描。吡蟲啉在212 nm處吸收最大，在264 nm處也有較大的吸收。咪鮮胺最大吸收波長(zhǎng)在203 nm附近，在240 nm附近也有較大的吸收。綜合兩者吸收波長(zhǎng)，并考慮溶劑干擾因素，將檢測(cè)方法的波長(zhǎng)定為235 nm。

色譜柱則選擇常用的Shim-pack VP-ODSC18反相柱，并依據(jù)吡蟲啉和咪鮮胺的理化性質(zhì)，以甲醇和水為流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)以甲醇和水（體積比75︰25，水用冰乙酸調(diào)至pH值為3.0）為流動(dòng)相，流速為1.0m L/m in時(shí)，2種有效成分的峰形尖銳、對(duì)稱，且保留時(shí)間適中，樣品中2種有效成分與雜質(zhì)能得到較好的分離。

2.2 分析方法精密度實(shí)驗(yàn)

從同一試樣中稱取5個(gè)樣品，在1.2色譜操作條件下進(jìn)行分析，結(jié)果見表1。測(cè)得吡蟲啉和咪鮮胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差值分別為0.020和0.011，變異系數(shù)分別為0.40%和0.57%。

表1 分析方法精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 分析方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

在已知含量的試樣中加入一定量的吡蟲啉和咪鮮胺標(biāo)樣，在1.2操作條件下進(jìn)行分析，結(jié)果見表2。吡蟲啉和咪鮮胺添加回收率為99.88%和99.73%。

表2 分析方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 方法的線性關(guān)系曲線

對(duì)1.3.1中配制的標(biāo)樣溶液進(jìn)樣檢測(cè)，進(jìn)樣量分別設(shè)為1,3,5,7,9μL（LC-20A配備SIL-20AC自動(dòng)進(jìn)樣器），每個(gè)進(jìn)樣體積設(shè)2針平行樣，測(cè)定峰面積。以峰面積（mAu）為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量（μg）為橫坐標(biāo)，得兩者線性回歸方程。吡蟲啉和咪鮮胺線性回歸方程分別為y=1 259 262.549 4 x-981.975（圖3）和y=610 263.363 2 x-1 014.925（圖4）。兩者線性相關(guān)系數(shù)（R2）均為1.000 0。

圖3 吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖4 咪鮮胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

3 結(jié)論

本方法能同時(shí)測(cè)定吡蟲啉和咪鮮胺含量，且所有組分在10m in內(nèi)均能完全出峰，無雜峰影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方法對(duì)吡蟲啉和咪鮮胺復(fù)配制劑進(jìn)行同柱分析，具有定量準(zhǔn)確，重復(fù)性好，分析速度快，線性關(guān)系良好，操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，是較為理想的分析方法。

[1]華純.淺議吡蟲啉的劑型[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2007,6(4):11-13.

[2]柏亞羅.噻蟲嗪和吡蟲啉伯仲之間新煙堿類殺蟲劑因其而精彩[DB/OL].(2016-06-15) [2016-10-11].http://www.agroinfo.com. cn/news_detail_7134.htm l.

[3]喬琳,侯紅敏,朱愛東,等.咪鮮胺在小麥田中的殘留消解與膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2015,14(3):43-46.

（責(zé)任編輯：顧林玲）

Analysis M ethod of Prochloraz＋I(xiàn)m idacloprid 7%FS by HPLC

MA Ke,HUANG Xiu-xiu,DAISe-qin,NIDeng-hui
(Zhejiang Maifon AgriculturalChem icalsCo.,Ltd.,ZhejiangWenzhou 325011,China)

A method for separation and quantitative analysis of prochloraz+im idacloprid 7%FS was described by HPLC,usingmethanol and water asmobile phase,on Shim-pack VP-ODSC18column at235 nm wavelength.The results showed that the standard deviations of imidacloprid and prochloraz were 0.020 and 0.011,the variation coefficientswere 0.40%and 0.57%,the average recoverieswere 99.88%and 99.73%,respectively.

imidacloprid;prochloraz;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.03.009

2016-10-11

馬克（1988—），男，浙江省溫州市人，助理工程師。研究方向：農(nóng)藥分析與檢測(cè)。E-mail：50568491@qq.com