AES-GPC-GC法同時(shí)測(cè)定貝類中47種有機(jī)氯及指示性多氯聯(lián)苯

目的：建立快速溶劑萃取-全自動(dòng)凝膠滲透色譜凈化-電子俘獲氣相色譜法(ASEGPC-GC)同時(shí)測(cè)定貝類中20種多氯聯(lián)苯(PCBs)、27種有機(jī)氯農(nóng)藥(OCPs)的分析方法。方法：樣品凍干后用快速溶萃取，經(jīng)全自動(dòng)凝膠滲透色譜系統(tǒng)凈化后，用兩條串聯(lián)毛細(xì)管色譜柱分離，電子俘獲檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：本方法采用保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量，同時(shí)分析47種化合物時(shí)，組分分離良好，線性范圍除氯菊酯、胺菊酯外在5～400μg/L濃度范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)＞0.997，方法的加標(biāo)回收率在75%～125%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%，檢出限在0.2～0.5μg/kg之間，基本上能滿足貝類樣品分析的要求。

多氯聯(lián)苯(Polychlorinated biphenyls，PCBs)和有機(jī)氯農(nóng)藥(Organochlofine pesticides，OCPs)是環(huán)境中難以降解的主要持久性有機(jī)污染物，具有脂溶性、持久性、疏水性等特點(diǎn)，極少量的殘留即可對(duì)生物體產(chǎn)生很強(qiáng)的致畸、致突變以及內(nèi)分泌干擾作用。由于其易在魚、蝦、貝等海產(chǎn)品中富集，對(duì)水產(chǎn)品安全及人類健康產(chǎn)生很大危害，近年來(lái)，大量學(xué)者正在積極開展近海區(qū)域環(huán)境及生物的有機(jī)污染調(diào)查工作。食品中測(cè)定多氯聯(lián)苯、有機(jī)氯農(nóng)藥的國(guó)標(biāo)方法各自獨(dú)立，前處理也各不相同且有的操作繁瑣、技術(shù)相對(duì)落后，目前尚沒有針對(duì)食品中PCBs和OCPs多組分同時(shí)分析的國(guó)標(biāo)方法，隨著調(diào)查研究工作的深入開展，開發(fā)海產(chǎn)品品中多組分的快速同時(shí)測(cè)定技術(shù)具有重要意義。

試驗(yàn)部分

儀器與試劑 7890B氣相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)，ECD檢測(cè)器；APLE-2000型加速溶劑萃取儀(北京吉天公司)；全自動(dòng)凝膠滲透色譜系統(tǒng)(美國(guó)J2 scientific公司)，配自動(dòng)進(jìn)樣器、凝膠凈化模塊和固相萃取模塊；氮吹儀(美國(guó)Orgnomation公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（美國(guó)SCILOGEX公司）；凍干機(jī)（美國(guó)hbconco公司），脫活石英毛細(xì)管柱連接器(美國(guó)Agilent公司)。正已烷、丙酮、二氯甲烷(農(nóng)殘級(jí)，美國(guó)Merck公司)；20種PCBs混合標(biāo)準(zhǔn)品：PCB28、PCB52、PCB101、PCBll8、PCBl38、PCBl53、PCBl80、PCBl98（中國(guó)農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所）PCBl8、PCB33、PCB44、PCB70、PCBl05、PCBl28、PCBl70、PCBl87、PCBl94、PCBl95、PCB199、PCB206（ACC）27種OCPs標(biāo)準(zhǔn)品：α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、p,p'-DDT、o,p'-DDT、p,p'-DDE、p,p'-DDD、六氯苯、七氯、環(huán)氧七氯、氯丹、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、滅蟻靈、五氯硝基苯、硫丹、除螨酯、丙烯菊酯、殺螨酯、胺菊酯、甲氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯（中國(guó)農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所）。使用時(shí)，所有標(biāo)準(zhǔn)品均用正己烷稀釋。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的氣相色譜圖

樣品前處理 貝類中脂肪含量比較低，大約2%左右，準(zhǔn)確稱取貽貝或牡蠣樣品10g，經(jīng)組織粉碎機(jī)勻漿，凍干后研磨成粉末狀裝入萃取池，以二氯甲烷+正己烷混合液(1∶l V/V)為萃取劑，進(jìn)行加速溶劑萃取。將萃取液用氮吹儀濃縮后進(jìn)全自動(dòng)凝膠滲透色譜系統(tǒng)凈化，所得溶液再經(jīng)弗羅里硅土小柱凈化后，氮吹濃縮后用正己烷定容進(jìn)GC-ECD檢測(cè)。

儀器分析條件

（1）加速溶劑萃取儀 提取試劑為二氯甲烷+正己烷(1∶l V/V)，系統(tǒng)壓力10Mpa，加熱溫度100℃，加熱時(shí)間300s，萃取時(shí)間180s，清洗體積為萃取池體積的40%，氮?dú)獯祾邥r(shí)間100s，循環(huán)2次。

（2）全自動(dòng)凝膠滲透色譜系統(tǒng) 流動(dòng)相為環(huán)己烷+乙酸乙酯(1∶l V/V)，流速5mL/min，GPC柱為Bio Beads S-X3填料的快速高效柱（300×20mm，200—400目多孔交聯(lián)聚苯乙烯聚合物），內(nèi)置式紫外檢測(cè)器，254nm固定波長(zhǎng)。

（3）色譜條件 進(jìn)樣口溫度280℃，ECD檢測(cè)器溫度320℃，不分流進(jìn)樣。尾吹為氮?dú)猓魉?7.6mL/min，載氣為氦氣，流速2.4mL/min。色譜柱類型：DB-1(30m×0.32mm×0.25μm)與HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)通過(guò)脫活毛細(xì)管柱連接器串聯(lián)。色譜柱升溫程序：80℃保持Omin，以80℃/min升至150℃，保持3min,以30℃/min升至185℃，保持16min，以70℃/min升至195℃，保持15min，以80℃/ min升至220℃，保持12min，以20℃/min升至250℃，保持8min，以80℃/min升至280℃，保持8min，以80℃/min升至300℃，保持0.5min。

結(jié)果與討論

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的氣相色譜圖見圖1

定性定量分析 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色譜圖中各組分的保留時(shí)間，對(duì)貝類樣品中的各組分進(jìn)行定性分析。采用標(biāo)準(zhǔn)系列峰面積計(jì)算法進(jìn)行定量分析。

方法的線性范圍和檢出限 配制多氯聯(lián)苯和有機(jī)氯農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,氯菊酯和胺菊酯靈敏度較低，配制濃度范圍為20～400μg/L，其他標(biāo)準(zhǔn)配制濃度范圍為5～400μg/L，在此范圍內(nèi)，多氯聯(lián)苯和有機(jī)氯農(nóng)藥均呈良好的線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)＞0.997。通過(guò)在樣品中添加混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定來(lái)確定方法的檢出限，根據(jù)3倍信噪比測(cè)得多氯聯(lián)苯和有機(jī)氯農(nóng)藥的檢出限在0.2～0.5μg/kg之間，滿足試驗(yàn)要求。

方法的精密度及準(zhǔn)確度 將貝類樣品平均分為三份，第一份不添加任何成分，第二份添加低濃度區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，第三份添加中等濃度區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，然后按上述方法方法進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)所測(cè)得的量與加入的量進(jìn)行比較，扣除樣品本底值算出回收率，結(jié)果顯示本方法的加標(biāo)回收率在加標(biāo)回收率在75%～125%之間，RSD＜10%，該方法準(zhǔn)確度和精密度良好，能滿足貝類樣品分析的要求。

本次試驗(yàn)以加速溶劑萃取法提取貝類中的47種PCBs和OCPs，全自動(dòng)凝膠滲透色譜系統(tǒng)凈化后以串聯(lián)毛細(xì)管色譜柱GC-ECD測(cè)定，方法快速、準(zhǔn)確、污染小，基本上能滿足國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)的要求。

□王克 陳霞 李滄區(qū)疾病預(yù)防控制中心