關(guān)節(jié)止痛膏中水楊酸甲酯、薄荷腦、樟腦含量測定的方法驗證

劉昶

【摘要】通過對《中國藥典》2015年版一部“關(guān)節(jié)止痛膏”【含量測定】方法進行系統(tǒng)適用性試驗、精密度試驗、檢出限、定量限、重復(fù)性試驗、準(zhǔn)確度試驗的驗證，確保檢驗方法對被檢物質(zhì)有足夠的專屬性和靈敏度，以及準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，并確定水楊酸甲酯、薄荷腦、樟腦的線性范圍、定量限。

【關(guān)鍵詞】水楊酸甲酯；薄荷腦；樟腦；關(guān)節(jié)止痛膏；方法驗證

1 試驗方法

1.1色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性

以聚乙二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱（30m*0.32mm*0.25um），柱溫為140℃，理論板數(shù)按萘峰計算不低于5000。

1.2校正因子測定

取萘適量，加乙酸乙酯制成每1ml含10mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另分別取樟腦對照品、薄荷腦對照品、水楊酸甲酯對照品各約10mg，置同一10ml容量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，吸取1ul注入氣相色譜儀，計算校正因子。

1.3測定法

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1uL，注入氣相色譜儀，測定。

1.4檢測限的確定

取一定濃度的對照品溶液，精密量取1ul注入氣相色譜儀，按上述色譜條件進行測定，滿足信噪比3：1為最低檢測限的要求。此時，樟腦、薄荷腦、水楊酸甲酯的濃度分別為2.5×10-4mg/ml、3.1×10-4mg/ml、6.3×10-4mg/ml，對應(yīng)的膏體濃度分別為0.0059mg/100cm2、0.0074mg/100cm2、0.015mg/100cm2。

1.5定量限的確定

取一定濃度的對照品溶液，精密量取1ul注入氣相色譜儀，按上述色譜條件進行測定，滿足信噪比10：1為定量限的要求。此時，樟腦、薄荷腦、水楊酸甲酯的濃度分別為8.3×10-4mg/ml、1.0×10-3mg/ml、2.1×10-3mg/ml，對應(yīng)的膏體濃度分別為0.020mg/100cm2、0.025mg/100cm2、0.050mg/100cm2。

1.6重復(fù)性試驗

取1批關(guān)節(jié)止痛膏，取供試品6份，依法測定。6次測定結(jié)果樟腦、薄荷腦、水楊酸甲酯含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.71%，0.16%，0.07%，該方法重復(fù)性良好。

1.7加樣回收率試驗（準(zhǔn)確度試驗）

采取全程加樣法。取6份已知含量的關(guān)節(jié)止痛膏105cm2，分別按照100%濃度精密添加水楊酸甲酯、薄荷腦、樟腦對照品混合溶液3ml，按含量測定方法測定。以下式計算回收率。

回收率=XX測得值-樣品中XX的量XX對照品加入量×100%

樟腦、薄荷腦、水楊酸甲酯平均回收率分別為102.8%、99.2%、103.5%，該方法準(zhǔn)確度滿足要求。

2 結(jié)論

該方法中水楊酸甲酯、薄荷腦、樟腦的最低檢測限分別為0.015mg/100cm2、0.0074mg/100cm2、0.0059mg/100cm2；水楊酸甲酯、薄荷腦、樟腦的定量限為0.050mg/100cm2、0.025mg/100cm2、0.020mg/100cm2；水楊酸甲酯的線性濃度范圍為0.060-2.42mg/ml，薄荷腦的線性濃度范圍為0.022-0.89mg/ml，樟腦的線性濃度范圍為0.12-4.96mg/ml。endprint