水酶法提取葡萄籽油和蛋白質(zhì)的研究

李丹丹，楊宏志，梁 英，朱 磊

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 食品學(xué)院，黑龍江 大慶 163319)

油脂加工

水酶法提取葡萄籽油和蛋白質(zhì)的研究

李丹丹，楊宏志，梁 英，朱 磊

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 食品學(xué)院，黑龍江 大慶 163319)

為充分利用葡萄釀酒后的副產(chǎn)物，對(duì)水酶法提取葡萄籽中的油脂和蛋白質(zhì)的工藝進(jìn)行優(yōu)化，并研究不同干燥方法和提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響。結(jié)果表明：最優(yōu)提取條件為纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、胰蛋白酶質(zhì)量比2∶1∶2∶1、pH 6.5、料液比1∶9、酶解時(shí)間9 h，在此條件下，葡萄籽油提取量為99.47 mg/g，蛋白質(zhì)提取量為74.86 mg/g，蛋白質(zhì)提取率為57.58%；不同干燥方法對(duì)水酶法提取葡萄籽油的提取量和理化性質(zhì)影響顯著，從油的提取量、品質(zhì)和成本考慮，在生產(chǎn)中應(yīng)優(yōu)先選擇風(fēng)干的干燥方式；與傳統(tǒng)方法相比，水酶法提取的葡萄籽油品質(zhì)更好，并可以直接得到副產(chǎn)物蛋白質(zhì)，但是提取效率不夠理想，有待進(jìn)一步研究。

水酶法；葡萄籽油；蛋白質(zhì)；提取量；理化性質(zhì)

Abstract：In order to make full use of byproducts of grapes after brewing,the extraction processes of oil and protein from grape seeds by aqueous enzymatic method were optimized,and the effects of different drying and extraction ways on the extraction amount and physicochemical properties of grape seed oil were investigated.The results showed that the optimal extraction conditions were obtained as follows: mass ratio of cellulose,pectinase,xylanase and trypsin 2∶1∶2∶1,pH 6.5,ratio of material to liquid 1∶9 and enzymolysis time 9 h.Under these conditions,the extraction amount of grape seed oil,extraction amount and extraction rate of protein were 99.47,74.86 mg/g and 57.58%,respectively.Different drying ways had obvious influences on the extraction amount and physicochemical properties of grape seed oil.Consideration from extraction amount of oil,quality and cost,air drying should be preferred in production.Compared with traditional methods,the quality of grape seed oil extracted by aqueous enzymatic method was better,and the protein byproducts could be obtained directly.However,the extraction efficiency was not ideal enough,which need further studies.Keywords：aqueous enzymatic method; grape seed oil; protein; extraction amount; physicochemical property

葡萄籽中含有大量的脂類、蛋白質(zhì)和多酚類物質(zhì)[1]。葡萄籽油占葡萄籽質(zhì)量的14%～17%，含有大量以亞油酸為主的不飽和脂肪酸、植物甾醇和白藜蘆醇等生物活性成分，還含有多種維生素和礦物質(zhì)[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)，葡萄籽油可以清除沉積的血清膽固醇[4-5]，促進(jìn)前列腺素合成[6]，還有營(yíng)養(yǎng)腦細(xì)胞、調(diào)節(jié)神經(jīng)功能等作用[7]。葡萄籽油主要應(yīng)用于食品營(yíng)養(yǎng)、醫(yī)療保健以及日用化妝品等領(lǐng)域。葡萄籽制油后的餅粕中含有13%～16%的蛋白質(zhì)[8]，富含18種氨基酸，包括人體必需的8種氨基酸[9]，是一種優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)資源，因此可利用葡萄籽蛋白生產(chǎn)復(fù)合蛋白，應(yīng)用于功能食品和保健藥品等領(lǐng)域。目前，葡萄籽的開發(fā)利用已經(jīng)引起國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注，但主要集中在葡萄籽抗氧化物質(zhì)的提取和利用，而有關(guān)葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取利用報(bào)道較少。

葡萄籽油的傳統(tǒng)提取方法是壓榨法和溶劑萃取法。壓榨法效率低、能耗大、蛋白質(zhì)易變性，而溶劑萃取法的缺點(diǎn)是雜質(zhì)多和溶劑殘留[10]。水酶法是近年新興的一種提油工藝，以機(jī)械和酶解為主要手段使植物細(xì)胞壁破碎，通過(guò)酶降解油料細(xì)胞中的脂蛋白和脂多糖等復(fù)合體來(lái)破壞油料在磨漿等過(guò)程中形成的包裹在油滴表面的脂蛋白膜，從而釋放油脂，提高游離油提取量[11]。水酶法提油工藝最早被用于椰子，隨后又逐漸用于油菜籽、棉籽、葵花籽、可可和棕櫚油等[12]。水酶法可以在溫和條件下同時(shí)提出油籽中的油脂和蛋白質(zhì)，較大程度上避免了對(duì)油脂和蛋白質(zhì)的破壞。因此，與傳統(tǒng)方法相比，水酶法提取的葡萄籽油品質(zhì)更好、蛋白質(zhì)變性程度更小、色澤更加透明澄清[13]。水酶法由于酶解在水相中進(jìn)行，磷脂進(jìn)入水相，因而不需要脫膠處理，不僅能減少化學(xué)精煉的步驟，還能提高葡萄籽油的品質(zhì)[14]。

本文通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化水酶法提取葡萄籽油和蛋白質(zhì)的工藝條件，并探討不同干燥方法和提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響，以期為葡萄副產(chǎn)物的充分利用以及工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 原料與試劑

山葡萄籽，取自黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院釀酒皮渣；果膠酶(酶活≥500 U/mg)、纖維素酶(酶活≥0.3 U/mg)、胰蛋白酶(酶活≥2 500 U/mg)、木聚糖酶(酶活≥2 000 U/mg)，購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；考馬斯亮藍(lán)G-250、牛血清白蛋白，分析純，購(gòu)于阿拉丁公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

FA100高速萬(wàn)能粉碎機(jī)；HH-8數(shù)顯恒溫水浴鍋；TG1650-WS離心機(jī)；2WAJ阿貝折射儀；HH-6旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，日本東京理化公司；DHG-9245A鼓風(fēng)干燥箱；721分光光度計(jì)；pHS-25數(shù)顯pH計(jì)；FA2004N電子分析天平。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品預(yù)處理

將葡萄籽原料中的果皮和果肉殘?jiān)入s質(zhì)盡量除去，漂洗干凈，平均分成3組，分別用風(fēng)干(20.℃)、烘干(50.℃)、凍干(-60.℃)的方法干燥葡萄籽，恒重后用高速萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40目篩，-20.℃密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 葡萄籽中油脂和蛋白質(zhì)的提取

水酶法：稱取3.00 g葡萄籽，按料液比1∶7加入0.05 mol/L檸檬酸緩沖液，調(diào)節(jié)pH為6.5，再加入1%復(fù)合酶(纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、胰蛋白酶質(zhì)量比2∶1∶2∶1)，45.℃酶解7 h，升溫至90.℃，滅酶5 min 后冷卻至室溫。以3 900 r/min的轉(zhuǎn)速離心，吸取上層清油。為提高葡萄籽油的提取量，用凍融法反乳化乳狀液，即將酶解液反復(fù)冷凍、解凍、離心，直至上層沒(méi)有油層為止，稱量油脂質(zhì)量，再吸取水層，用考馬斯亮藍(lán)G-250法[15]測(cè)定蛋白質(zhì)含量，分別計(jì)算葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量。參照GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中的凱氏定氮法測(cè)定葡萄籽粗蛋白質(zhì)含量，計(jì)算蛋白質(zhì)提取率。

索氏提取法：稱取3.00 g葡萄籽，放入自制濾紙筒中，脫脂線封口，將濾紙筒放入索氏提取裝置內(nèi)，按料液比1∶8加入石油醚，60.℃水浴提取3 h，結(jié)束后將提取液移入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，30.℃減壓蒸餾除去溶劑，將旋蒸后的油放入30.℃的鼓風(fēng)干燥箱中進(jìn)行烘干，直至恒重，計(jì)算葡萄籽油提取量。

1.2.3 葡萄籽油、蛋白質(zhì)提取量和蛋白質(zhì)提取率的計(jì)算

葡萄籽油提取量=葡萄籽油質(zhì)量/葡萄籽質(zhì)量

蛋白質(zhì)提取量=水相蛋白質(zhì)含量×水相體積/葡萄籽質(zhì)量

蛋白質(zhì)提取率=水相蛋白質(zhì)含量×水相體積/葡萄籽中粗蛋白質(zhì)質(zhì)量×100%

1.2.4 葡萄籽油理化性質(zhì)的測(cè)定

酸值按GB/T 5530—2005方法測(cè)定，碘值按GB/T 5532—2008方法測(cè)定，過(guò)氧化值按GB/T 5538—2005方法測(cè)定，皂化值按GB/T 5534—2008方法測(cè)定，不皂化物含量按GB/T 5535—2008方法測(cè)定，折光指數(shù)按GB/T 5527—1985方法測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 pH對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

以風(fēng)干葡萄籽為原料，按1.2.2中水酶法，僅將變量pH設(shè)為3.5、4.5、5.5、6.5、7.5、8.5，其他參數(shù)不變，結(jié)果見圖1。

由圖1可知，pH對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量有顯著影響。葡萄籽油提取量隨著pH的升高呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)pH小于6.5時(shí)，隨著pH升高，酶活性不斷增強(qiáng)，葡萄籽油提取量逐漸增大。當(dāng)pH為6.5時(shí)，葡萄籽油提取量達(dá)到最大值(88.56 mg/g)。由此可知，4種酶在pH為6.5時(shí)，綜合活性最強(qiáng)，對(duì)葡萄籽的作用最佳。隨著pH繼續(xù)增大，酶活性減弱，導(dǎo)致葡萄籽油提取量降低。而蛋白質(zhì)提取量在pH 3.5～7.5的范圍內(nèi)，隨著pH升高逐漸增大，當(dāng)pH達(dá)到7.5時(shí)，蛋白質(zhì)提取量達(dá)到最大值(79.94 mg/g)；隨后pH繼續(xù)升高，蛋白質(zhì)提取量反而下降，提取液顏色加深，此時(shí)溶液變?yōu)閺?qiáng)堿性，蛋白質(zhì)過(guò)度水解導(dǎo)致提取量降低。因此，水酶法提取葡萄籽油的最佳pH為6.5，提取葡萄籽中蛋白質(zhì)的最佳pH為7.5。

注：不同字母代表相同指標(biāo)間有顯著差異(α≤0.05)。下同。

圖1pH對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

2.1.2 酶配比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

以風(fēng)干葡萄籽為原料，按1.2.2中水酶法，僅將變量酶配比(纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、胰蛋白酶質(zhì)量比)設(shè)為1∶1∶1∶1、1∶1∶1∶2、1∶1∶1∶3、2∶1∶2∶1、2∶1∶2∶2、2∶1∶2∶3，其他參數(shù)不變，結(jié)果見圖2。

圖2 酶配比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

細(xì)胞壁由碳水化合物(纖維素，半纖維素和果膠多糖)和蛋白質(zhì)構(gòu)成。纖維素的存在阻止了酶進(jìn)入蛋白質(zhì)中，而在長(zhǎng)時(shí)間的酶解作用下，纖維素酶和果膠酶會(huì)使蛋白酶更容易進(jìn)入到蛋白質(zhì)中并促進(jìn)降解[16]。所以根據(jù)葡萄籽的結(jié)構(gòu)，利用纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶和蛋白酶的協(xié)同作用來(lái)提高葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量。由圖2可知，酶配比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響存在顯著差異。在不同酶配比中，葡萄籽油提取量較高的3種酶配比為1∶1∶1∶1、2∶1∶2∶1、2∶1∶2∶2。其中在酶配比為2∶1∶2∶1時(shí)，葡萄籽油提取量最大，達(dá)到88.23 mg/g；而在酶配比為1∶1∶1∶3 時(shí)，葡萄籽油的提取量最低，為70.46 mg/g。在復(fù)合酶總添加量相同的條件下，纖維素酶和木聚糖酶所占比例越大，葡萄籽油提取量越高，而胰蛋白酶的添加量越多則葡萄籽油提取量越低。在復(fù)合酶的作用下，葡萄籽中的蛋白質(zhì)也同時(shí)得到釋放。蛋白質(zhì)提取量較高的3種酶配比是2∶1∶2∶1、2∶1∶2∶2、2∶1∶2∶3，在酶配比2∶1∶2∶2時(shí)，蛋白質(zhì)的提取量最高，達(dá)到78.64 mg/g；而在酶配比為1∶1∶1∶1時(shí)，蛋白質(zhì)的提取量最低，為55.51 mg/g。

2.1.3 料液比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

以風(fēng)干葡萄籽為原料，按1.2.2中水酶法，僅將變量料液比設(shè)為1∶3、1∶5、1∶7、1∶9、1∶11，其他參數(shù)不變，結(jié)果見圖3。

圖3 料液比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

料液比對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量有顯著影響。緩沖液可以浸潤(rùn)葡萄籽，使其細(xì)胞溶脹，結(jié)構(gòu)受到破壞，則油和蛋白質(zhì)游離出來(lái)，從而提高葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量。由圖3可知，隨著料液比的增加，葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量整體呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明緩沖液越多，提取的葡萄籽油和蛋白質(zhì)越多。當(dāng)料液比達(dá)到1∶9時(shí)，曲線上升幅度明顯減小，兩者的提取量基本趨于穩(wěn)定，說(shuō)明葡萄籽油和蛋白質(zhì)已經(jīng)被完全提取，而且料液比過(guò)大不利于油水分離?？紤]到節(jié)約資源和降低成本，最佳料液比選擇為1∶9。

2.1.4 酶解時(shí)間對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

以風(fēng)干葡萄籽為原料，按1.2.2中水酶法，僅將變量酶解時(shí)間設(shè)為3、5、7、9、11 h，其他實(shí)驗(yàn)參數(shù)不變，結(jié)果見圖4。

由圖4可知，酶解時(shí)間對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響比較明顯。葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增大。酶解時(shí)間越長(zhǎng)，酶與底物作用越充分，反應(yīng)越徹底，得到的葡萄籽油和蛋白質(zhì)越多。當(dāng)酶解時(shí)間達(dá)9 h時(shí)，曲線趨于平穩(wěn)，說(shuō)明葡萄籽反應(yīng)完全。油脂在空氣中暴露的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)影響油脂的品質(zhì)，所以從油脂的品質(zhì)和節(jié)約成本方面考慮，確定9 h為最佳酶解時(shí)間。

圖4 酶解時(shí)間對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量的影響

2.2 水酶法提取葡萄籽油和蛋白質(zhì)的正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，選取酶配比、pH、料液比、酶解時(shí)間4個(gè)因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，每個(gè)因素設(shè)置3個(gè)水平，選用正交實(shí)驗(yàn)L9(34)設(shè)計(jì)，以確定酶解條件的最佳組合。因素水平見表1，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析見表2，葡萄籽油方差分析見表3，蛋白質(zhì)方差分析見表4。

由表2可知，各因素對(duì)葡萄籽油提取量的影響程度順序?yàn)椋篈>B>D>C，即酶配比>pH>酶解時(shí)間>料液比。最佳因素水平的組合為A2B2C2D2，即酶配比為2∶1∶2∶1、pH 6.5、料液比1∶9、酶解時(shí)間9 h，在此條件下葡萄籽油的提取量最高，經(jīng)3次平行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證平均可達(dá)到99.47 mg/g。各因素對(duì)葡萄籽中蛋白質(zhì)提取量影響程度順序?yàn)椋築>C>A>D，即pH>料液比>酶配比>酶解時(shí)間。最佳因素水平的組合為 A3B3C2D2，即酶配比2∶1∶2∶2、pH 7.5、料液比1∶9、酶解時(shí)間9 h，在此條件下葡萄籽蛋白質(zhì)提取量最高，可達(dá)到83.26 mg/g，蛋白質(zhì)提取率達(dá)64.05%。因本文以葡萄籽油為主要研究對(duì)象，蛋白質(zhì)為副產(chǎn)物，所以確定葡萄籽油和蛋白質(zhì)提取的最優(yōu)條件為酶配比(纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、胰蛋白酶質(zhì)量比)2∶1∶2∶1、pH 6.5、料液比1∶9、酶解時(shí)間9 h，在此條件下，葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量分別為99.47 mg/g和74.86 mg/g，蛋白質(zhì)提取率為57.58%。由表3和表4可知，酶配比、pH、料液比、酶解時(shí)間對(duì)葡萄籽油和蛋白質(zhì)的提取量均有極顯著影響。

表1 因素水平

表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

表3 葡萄籽油的方差分析

注：**代表差異極顯著(α≤0.01)。下同。

表4 蛋白質(zhì)的方差分析

2.3 不同干燥方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響

3種干燥方法得到的葡萄籽按1.2.2中水酶法提取葡萄籽油，不同干燥方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響見表5。

表5 不同干燥方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響

注：不同字母代表相同指標(biāo)間有顯著差異(α≤0.05)。下同。

由表5可知，不同干燥方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)均有顯著影響。從提取量上來(lái)看，烘干葡萄籽所得葡萄籽油的提取量是最高的，風(fēng)干次之，凍干明顯低于前兩者，因?yàn)榈蜏靥幚聿焕谟椭艹?。從理化性質(zhì)上來(lái)看，烘干酸值最高，凍干最低?？梢姼稍餃囟葘?duì)葡萄籽油的酸值影響較大，原料干燥溫度越高，提取的葡萄籽油酸值越大。油脂長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中會(huì)發(fā)生酸敗，其中游離脂肪酸含量越高，則酸值越大，表明該油脂的品質(zhì)越差[17]。碘值越低，說(shuō)明雙鍵減少，油脂氧化的程度越高。3種干燥方法所得葡萄籽油碘值最高的是凍干，其次是風(fēng)干，烘干顯著低于前兩者，說(shuō)明高溫促進(jìn)葡萄籽油氧化，對(duì)葡萄籽油中的不飽和脂肪酸有破壞作用。氫過(guò)氧化物不穩(wěn)定，極易分解成小分子化合物，如醛、酮、酸等，因此過(guò)氧化值不能反映油脂的氧化程度,只能反映油脂的氧化速度[18]。烘干所得葡萄籽油的氧化速度最快，風(fēng)干次之，凍干最慢，說(shuō)明高溫能加速油脂的氧化。皂化值越高，說(shuō)明脂肪酸相對(duì)分子質(zhì)量越小，親水性越強(qiáng)，易失去油脂的特性；皂化值越低，則脂肪酸相對(duì)分子質(zhì)量越大或含有較多的不皂化物[19]。烘干所得葡萄籽油的皂化值最高，凍干最低，說(shuō)明高溫能產(chǎn)生較多的低相對(duì)分子質(zhì)量的脂肪酸。不皂化物是指油脂中高級(jí)脂肪醇、甾醇和碳?xì)浠衔锏炔荒芘c氫氧化鈉或氫氧化鉀起皂化反應(yīng)的物質(zhì)，其含量越高，油脂的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值就越高，3種干燥方法所得葡萄籽油的不皂化物含量均小于等于0.5%。油脂折光指數(shù)隨其組成中脂肪酸碳數(shù)和雙鍵數(shù)增加而增大，折光指數(shù)較低說(shuō)明發(fā)生氧化，而烘干葡萄籽提取的油的折光指數(shù)最低。綜上可知，烘干葡萄籽油的提取量雖高，但是由于葡萄籽油中不飽和脂肪酸在高溫加熱下更容易發(fā)生氧化，游離脂肪酸增多導(dǎo)致酸值上升，因而烘干所得葡萄籽油的品質(zhì)比風(fēng)干和凍干的相對(duì)較差。而凍干葡萄籽油提取量雖低，但凍干使葡萄籽保持在低溫真空狀態(tài)下干燥，盡量避免了葡萄籽油氧化，所以凍干所得葡萄籽油的酸值和過(guò)氧化值最低，品質(zhì)最好。風(fēng)干的葡萄籽油提取量與烘干相近，而理化性質(zhì)介于烘干和凍干之間，且風(fēng)干耗能少、容易操作，適合大規(guī)模生產(chǎn)。

2.4 不同提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響

以風(fēng)干葡萄籽為原料，按1.2.2中水酶法和索氏提取法提取葡萄籽油，不同提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響見表6。

由表6可知，不同提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響顯著。傳統(tǒng)的索氏提取法獲得的葡萄籽油提取量比水酶法高，但提取過(guò)程中可能會(huì)存在溶劑殘留。水酶法提取葡萄籽油的酸值、皂化值和過(guò)氧化值明顯低于索氏提取法，碘值和折光指數(shù)明顯比索氏提取法高，這主要是因?yàn)樗阜ǖ奶崛l件比較溫和，避免了長(zhǎng)時(shí)間高溫所導(dǎo)致的葡萄籽油氧化，降低了游離脂肪酸的含量。綜上，雖然水酶法提取的葡萄籽油提取量明顯低于索氏提取法，但水酶法提取葡萄籽油的氧化程度明顯低于索氏提取法，所以水酶法提取的葡萄籽油品質(zhì)更好，而且提取溫度較低，更加節(jié)約能源。

表6 不同提取方法對(duì)葡萄籽油提取量和理化性質(zhì)的影響

3 結(jié) 論

根據(jù)單因素和正交實(shí)驗(yàn)，水酶法提取葡萄籽油和蛋白質(zhì)的最佳工藝參數(shù)為：纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、胰蛋白酶質(zhì)量比2∶1∶2∶1，pH 6.5，料液比 1∶9，酶解時(shí)間9 h。在最佳條件下，葡萄籽油提取量達(dá)到99.47 mg/g，蛋白質(zhì)的提取量為74.86 mg/g，蛋白質(zhì)提取率為57.58%。不同干燥方法對(duì)水酶法提取葡萄籽油的提取量和理化性質(zhì)均有顯著影響。從提取量來(lái)看，烘干葡萄籽的提取量最高，風(fēng)干次之，凍干最低。從酸值、碘值、過(guò)氧化值、皂化值、折光指數(shù)等理化指標(biāo)來(lái)看，以凍干葡萄籽為原料提取的葡萄籽油氧化程度最低，烘干最高，風(fēng)干居中，說(shuō)明預(yù)處理溫度對(duì)葡萄籽油的氧化有顯著影響。與傳統(tǒng)的索氏提取法相比，水酶法提取葡萄籽油的提取量較低，但氧化程度也較低，說(shuō)明水酶法提取的葡萄籽油品質(zhì)較優(yōu)。

水酶法不僅可以提取出優(yōu)質(zhì)的葡萄籽油，還能直接得到副產(chǎn)物蛋白質(zhì)，既節(jié)能環(huán)保，又得到優(yōu)質(zhì)營(yíng)養(yǎng)資源，但是提取效率不夠理想。如果將水酶法和傳統(tǒng)方法結(jié)合，先用水酶法預(yù)處理，再利用溶劑法等傳統(tǒng)方法提取，可以最大限度地提取出葡萄籽中的油脂。

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Aqueousenzymaticextractionprocessofoilandproteinfromgrapeseeds

LI Dandan,YANG Hongzhi,LIANG Ying,ZHU Lei

(College of Food Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Daqing 163319,Heilongjiang,China)

TS224.4;TS229

A

1003-7969(2017)09-0028-06

2017-03-14;

2017-05-23

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(3101828)；大慶市指導(dǎo)性科技計(jì)劃項(xiàng)目(zd-2016-108)；黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)引進(jìn)人才科研啟動(dòng)計(jì)劃資助項(xiàng)目(XYB2013-16)

李丹丹(1992)，女，碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物的活性研究(E-mail)dandan.349382650@hotmail.com。

梁 英，教授，博士(E-mail)liangying-64@163.com；朱 磊，講師，博士(E-mail)zhulei610@163.com。