鄭才玲，符春苗，邵運(yùn)祿

(海南省中醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570203)

?？诘貐^(qū)呼吸道病原體流行情況分析

鄭才玲，符春苗，邵運(yùn)祿

(海南省中醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570203)

目的 通過檢測呼吸道病原體抗體，了解?？诘貐^(qū)不同年齡、不同性別的發(fā)病和分布情況。方法 采集2015年1月至2016年5月海南省中醫(yī)院1 103例患者3 mL靜脈血，分離血清。使用間接免疫熒光法(IFA)檢測樣本血清中9種常見的呼吸道感染病原IgM抗體，對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 1 103例患者中非典型呼吸道病原抗體陽性323例(包括混合感染)，陽性率為29.28%(323/1 103)。陽性率最高的是肺炎支原體25.57%(282/1 103)，其次是乙型流感病毒3.35%(37/1 103)；混合型感染占1.27%(14/1 103)，主要是肺炎支原體合并其他非典型呼吸道病原體感染。非典型呼吸道病原感染陽性率嬰兒組為21.83%(55/252)、幼兒組為53.38%(79/148)、兒童組為40.97%(59/144)、少年組為60.00%(9/15)、青年組31.43%(22/70)、中老年組為13.71%(65/474)，各年齡組非典型呼吸道病原陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=123.36，P＜0.05)；病毒感染陽性率嬰兒組為2.38%(6/252)、幼兒組為8.11%(12/148)、兒童組為7.64%(11/144)、少年組為6.67%(1/15)、青年組為 1.43%(1/70)、中老年組1.69%(8/474)，各年齡組非典型呼吸道病毒陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.25，P＜0.05)。男性非典型呼吸道病原陽性率為21.64%(156/721)，女性陽性率為35.34%(135/382)，非典型呼吸道病原感染性別差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=24.14，P＜0.05)。結(jié)論 肺炎支原體和乙型流感病毒是導(dǎo)致?？诘貐^(qū)呼吸道感染的主要病原體，病原體感染在年齡組和性別間存在差異。少年組和幼兒組非典型呼吸道病原感染率最高，應(yīng)重點(diǎn)防治。

間接免疫熒光法；呼吸道感染；病原體；IgM

呼吸道感染是一種很常見的疾病，整年皆可發(fā)病，冬春時節(jié)多發(fā)。快速明確感染的病原學(xué)診斷，對于合理選擇抗生素、減少抗菌藥物的濫用、減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)、提高患者治愈率具有非常重要的意義。為了解呼吸道感染非典型病原體分布特點(diǎn)，對我院收治的呼吸道感染患者9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測進(jìn)行總結(jié)，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月至2016年5月期間在海南省中醫(yī)院診斷為呼吸道感染的患者1 103名，年齡0～82歲，男性721例，女性382例，主要來自呼吸科和兒科。將患者分為6組：嬰兒組(＜1歲)252例、幼兒組(1～3歲)148例、兒童組(4～12歲)144例、少年組(13～18歲)15例、青年組(19～44歲)70例、中老年組(44歲以上)474例。

1.2 方法 標(biāo)本采集靜脈血3 mL，用長沙鑫奧臺式高速離心機(jī)(GENIUS 16K)4 000 r/min離心5 min分離血清。采用間接免疫熒光法(IFA)同時檢測樣本血清中肺炎支原體(MP)、嗜肺軍團(tuán)菌1型(LPN-1)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、副流感病毒(PlV)等9種常見的呼吸道感染病原血清的IgM抗體。試劑采用西班牙VIRCELL公司的呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒。間接免疫熒光法檢驗(yàn)原理：基于待測樣本的抗體與吸附在載玻片上的抗原發(fā)生的反應(yīng)；樣本中存在的特異性抗體和抗原反應(yīng)，未與抗原結(jié)合的免疫球蛋白在洗滌步驟中除去；在下一步驟中，抗原-抗體復(fù)合物與熒光素標(biāo)記的抗人球蛋白反應(yīng)，用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。載玻片上有質(zhì)控孔、陽性對照、陰性對照，保證實(shí)驗(yàn)檢測質(zhì)量。操作和結(jié)果判斷嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。熒光顯微鏡使用上海光學(xué)儀器六廠XSP-63X。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 樣本陽性率 1 103例患者血清標(biāo)本中非典型病原體抗體陽性323例(包括混合感染)，陽性率為29.28%(323/1 103)；非典型病原體抗體陽性感染率最高的為肺炎支原體(MP)282例，陽性率為25.57%(282/1 103)，其次為乙型流感病毒(FluB)37例，陽性率為3.35%(37/1 103)，嗜肺軍團(tuán)菌1型(LPN-1)14例，陽性率為1.27%(14/1 103)，混合型感染14例，主要以肺炎支原體(MP)合并其非典型呼吸道病原體感染為主。未發(fā)現(xiàn)3種或3種以上的多重混合感染，見表1。

表1 1 103例患者血清中9種病原體IgM檢測陽性率

2.2 非典型呼吸道病原體感染的性別分布 1 103例患者血清標(biāo)本中，男性非典型呼吸道病原感染陽性率為21.64%，女性感染陽性率為35.34%，非典型呼吸道病原感染性別差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=24.14，P＜0.05)。男性非典型呼吸道病毒感染陽性率為3.33%，女性感染陽性率為3.93%。非典型呼吸道病毒感染性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.26，P＞0.05)，見表2。

表2非典型呼吸道病原體感染的性別分布

2.3 非典型呼吸道病原體感染的年齡分布 非典型呼吸道病原感染陽性率分別為嬰兒組21.83%(55/252)、幼 兒 組 53.38%(79/148)、兒 童 組 40.97%(59/144)、少 年 組 60.00%(9/15)、青 年組 31.43%(22/70)、中老年組13.71%(65/474)，各年齡組非典型呼吸道病原陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=123.36，P＜0.05)。病毒感染陽性率嬰兒組2.38%(6/252)，幼兒組 8.11%(12/148)，兒童組 7.64%(11/144)，少年組6.67%(1/15)，青年組1.43%(1/70)，中老年組1.69%(8/474)。各年齡組非典型呼吸道病毒陽性率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.25，P＜0.05)，見表3。

表3非典型呼吸道病原體感染的年齡分布(例)

3 討論

呼吸道感染是一種很多見的疾病，整年皆可發(fā)病，春冬季節(jié)多發(fā)。呼吸道感染主要分為上呼吸道(大多數(shù)為病毒感染，少數(shù)因細(xì)菌引發(fā)的)以及下呼吸道感染。包括肺炎、支氣管擴(kuò)張、慢性支氣管炎等(多為衣原體、支原體、病毒、細(xì)菌、軍團(tuán)菌等引發(fā)的)。急性下呼吸道感染在我國是兒童尤其嬰幼兒多發(fā)病，并且死亡率在兒童疾病中也居第一位。呼吸道感染常見病因?yàn)椴《?，少?shù)由細(xì)菌引起，但細(xì)菌感染伴隨抗生素的廣泛應(yīng)用也逐漸減少，而病毒及非典型病原體感染逐漸增多。研究表明，呼吸道非典型病原體及病毒致病性強(qiáng)，發(fā)病急并且傳播較快，臨床常常會發(fā)生誤診誤斷以致造成抗生素濫用。當(dāng)機(jī)體被感染后，產(chǎn)生對抗抗原的抗體IgG和IgM，但I(xiàn)gM較先于IgG出現(xiàn)。故而采用間接免疫熒光法(IFA)進(jìn)行檢測非典型病原體及病毒IgM抗體。

3.1 非呼吸道病原體的感染情況及年齡分布 結(jié)果顯示：1 103例患者中，呼吸道病原體抗體呈陽性的有323例，占29.28%(323/1 103)；4種常見非典型病原體抗體陽性者293例，占26.56%，其中MP 282例，占25.57%，LPN-1 14例，占1.27%，COX 1例，占0.09%，CP 0例；五種常見的病毒抗體陽性有39例，占3.54%(39/1 103)；其中FluB 37例，占3.35%(37/1 103)。研究結(jié)果顯示MP是?？诘貐^(qū)呼吸道感染的主要病原體，其次是FluB。MP感染可發(fā)生在任何年齡段，以學(xué)齡前期和學(xué)齡期兒童尤為多見；MP是下呼吸道感染主要的致病性病原體，細(xì)菌性肺炎的1/3以上是由其引起的人類支原體肺炎，其病理變化由間質(zhì)性肺炎為主，在隱匿期內(nèi)到病癥緩和后數(shù)周患者都會有傳染性，經(jīng)口、鼻的分泌物使病原體通過飛沫以氣溶膠顆粒的形式在空氣中傳播[1]。臨床上需要明確病因、合理用藥，故相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室檢查十分重要[2-5]。近年來，國內(nèi)報道的由MP感染引起的小兒肺炎比例呈升高的趨勢。研究結(jié)果顯示，非典型病原體陽性多為MP感染，有282例，占25.57%，其中13例為混合型感染，均以MP合并其他非典型呼吸道病原體感染為主，占1.18%(13/1 103)。而混合感染中為MP合并FluB有9例，占0.82%(9/1 103)。本地區(qū)的MP檢出率高于廣東東莞地區(qū)的21.9%和北京地區(qū)的16.52%[6-7]。1～12歲的兒童為好發(fā)年齡，少年組和幼兒組非典型病原檢出率大于其他組，各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=123.36，P＜0.05)，這可能與患兒年齡小機(jī)體免疫力低有關(guān)。研究顯示1 103例呼吸道感染患者中檢測出14例LPN-1抗體陽性者，占1.27%，遠(yuǎn)低于瀘州地區(qū)的10.98%[8]。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)得出軍團(tuán)菌肺炎患者多數(shù)是住院患者，故軍團(tuán)菌肺炎是院內(nèi)感染的主要傳播途徑之一。流感病毒是一種在世界各地通常都會有的周期性的大流行，通過呼吸道傳播，是可引起人類及動物流行性感冒的病毒[9]，本次研究結(jié)果顯示FluB感染數(shù)為37例，僅占3.35%，單項(xiàng)感染為27例占2.45%；其中9例為合并MP感染，1例為合并ADV感染，表明FluB為兒童呼吸道感染的主要病毒，且在研究時間段內(nèi)，海口地區(qū)未發(fā)生大流行性感染。研究結(jié)果顯示肺炎衣原體、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、甲型流感病毒并未檢測出，可能和地區(qū)差異與流行因素或者是檢測方法有關(guān)，有待進(jìn)一步的研究。

3.2 非典型呼吸道病原體感染的性別分布 1 103例患者中男性患者721例，占65.37%，女性患者382例，占34.63%，男性＞女性，男女性患者的病毒檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，說明本地區(qū)病毒引起的呼吸道感染無性別差異；但男女性患者的非典型病原檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，說明在?？诘貐^(qū)有非典型病原的呼吸道感染是有型別差異的，并且女性多于男性與國內(nèi)其他地區(qū)有差異[10]。

3.3 研究存在的問題和不足之處 (1)調(diào)查時間較短，故不能分析季節(jié)因素對呼吸道感染有怎樣的影響以及呼吸道病毒感染的逐年情況；(2)由于患者家屬因經(jīng)濟(jì)原因或者是癥狀好轉(zhuǎn)后，未等第2次抽血檢測就已經(jīng)出院，所以不能連續(xù)監(jiān)測患者呼吸道感染的情況，不能追蹤觀察以評估預(yù)后；(3)因患者在入院以前服用過藥物，故會影響結(jié)果；(4)由于操作或者是脂血的原因，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

綜上所述，海口地區(qū)呼吸道感染患者非典型病原體的陽性率、病原體構(gòu)成等與其他地區(qū)相比有很多不同點(diǎn)。臨床醫(yī)生可以根據(jù)本地區(qū)病原體的感染特點(diǎn)，為本地區(qū)患者制定合理的預(yù)防措施，為臨床診斷和治療提供了重要依據(jù)。間接免疫熒光法對呼吸道病原體檢測快速、能確定致病因子、穩(wěn)定、準(zhǔn)確性高、還能發(fā)現(xiàn)混合感染，適于門診或住院患者檢查，值得推廣。

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Analysis of the prevalence of respiratory pathogens in Haikou.ZHENG Cai-ling,FU Chun-miao,SHAO Yun-lu.

Department of Clinical Laboratory,Hainan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Haikou 570203,Hainan,CHINA

Objective To understand the incidence and distribution of different age and sex in Haikou area by detecting the antibody of respiratory pathogens,and to evaluate the value of indirect immunofluorescence technique in the diagnosis of respiratory infection.Methods The venous blood of 3 mL were collected from 1 103 cases of patients and serum was prepared.Indirect immunofluorescence assay(IFA)was used to detect 9 kinds of common respiratory tract infections IgM antibodies,and the results were statistically analyzed.Results In 1 103 patients,323 cases of atypical respiratory pathogens were positive(including mixed infection)with the positive rate of 29.28%(323/1 103).The highest positive rate was 25.57%(282/1 103)of Mycoplasma pneumoniae,followed by 3.35%of influenza B virus(37/1 103);Mixed infection was mainly Mycoplasma pneumoniae combined with other atypical respiratory pathogens infection,accounted for 1.27%(14/1 103).The positive rate of atypical respiratory infection in infant group,young children group,children group,juvenile group,youth group,middle and elderly age group were 21.83%(55/252),53.38%(79/148),40.97%(59/144),60%(9/15),31.43%(22/70),13.71%(65/474),respectively.There was significant difference in the positive rates of atypical respiratory pathogens among different age groups(χ2=123.36,P＜0.05).The virus infection rate in infant group,young children group,children group,juvenile group,youth group,middle and elderly age group 2.38%(6/252),8.11%(12/148),7.64%(11/144),6.67%(1/15),1.43%(1/70),1.69%(8/474),respectively.There was significant difference in the positive rate of respiratory virus among different age groups(χ2=23.25,P＜0.05).The positive rate of atypical respiratory tract infection in male and female groups were respectively 21.64%(156/721)and 35.34%(135/382).There was significant difference between the different gender groups in the atypical respiratory tract infection(χ2=24.14,P＜0.05).Conclusion Mycoplasma pneumoniae and influenza B virus are the main pathogens of respiratory tract infection in Haikou area.There are differences among the age groups and gender groups in pathogen infection.The incidence rate of atypical respiratory tract infection is the highest in infant and children,and we should focus on the prevention and treatment for that.

Indirect immunofluorescence method;Respiratory tract infections;Pathogens;IgM

R56

A

1003—6350（2017）19—3172—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.19.025

鄭才玲。E-mail：499415974@qq.com

2017-02-08)