朱文芳，沈建軍，韓 雙，付 濤，鄒愛(ài)民

(1.西安市長(zhǎng)安醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710016；2.第四軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710000)

血清NGAL、Cys-C、RBP聯(lián)合檢測(cè)對(duì)糖尿病腎損傷早期診斷的臨床意義

朱文芳1，沈建軍2，韓 雙1，付 濤1，鄒愛(ài)民1

(1.西安市長(zhǎng)安醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710016；2.第四軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710000)

目的 探討血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)和視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)聯(lián)合檢測(cè)在2型糖尿病腎功能損傷早期診斷中的臨床意義。方法 選擇2015年11月至2016年10月西安市長(zhǎng)安醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的220例2型糖尿病患者為觀察組，根據(jù)尿微量白蛋白與尿肌酐比值(ACR)將患者分為單純糖尿病(SDM)組83例、早期糖尿病腎病(EDN)組77例和臨床期糖尿病腎病(CDN)組60例，并選擇80例健康體檢者為對(duì)照組。采用膠乳免疫增強(qiáng)比濁法檢測(cè)血清Cys-C、RBP、NGAL，脲酶-谷氨酸脫氫酶法檢測(cè)血清尿素(UREA)，酶法檢測(cè)血清肌酐(CREA)，并對(duì)各組檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果 SDM組患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA與CREA檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；EDN組患者的血清NGAL、CysC及RBP檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，血清UREA與CREA比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；CDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組、SDM組及EDN組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。EDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP陽(yáng)性率分別為55.84%、59.74%、54.55%，均明顯高于SDM組的19.28%、16.87%、15.66，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而血清UREA、CREA陽(yáng)性率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；CDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA陽(yáng)性率高于EDN組和SDM組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；血清NGAL、CysC、RBP在SDM組、EDN組、CDN組聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為25.30%，68.83%，96.67%，均高于各單項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率；Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清NGAL、CysC、RBP與尿ACR檢測(cè)結(jié)果之間存在正相關(guān)(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。結(jié)論 血清NGAL、Cys-C和RBP可作為2型糖尿病患者腎損傷早期診斷的重要指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)可提高糖尿病腎病早期診斷的陽(yáng)性率，對(duì)臨床識(shí)別和早期診斷糖尿病腎病有重要臨床意義。

胱抑素C；血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白；血視黃醇結(jié)合蛋白；Ⅱ型糖尿??；糖尿病腎病

近年來(lái)，隨著生活水平不斷提高，2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)的發(fā)病率逐步上升，糖尿病腎病(diabetic nephropahy，DN)是其最常見(jiàn)的并發(fā)癥，也是T2DM患者致殘或致死的主要原因，由于其呈不可逆的進(jìn)行性發(fā)展導(dǎo)致腎功能損害甚至腎衰竭。因此，糖尿病患者在腎臟早期損傷時(shí)及時(shí)診斷并干預(yù)，具有重要的臨床意義。本文通過(guò)觀察血清NGAL、RBP、CysC檢測(cè)結(jié)果在2型糖尿病患者腎功能損傷不同時(shí)期的變化，探討其聯(lián)合檢測(cè)在DN早期診斷中的臨床意義。

表1 各組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較s)

表1 各組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05;與SDM組比較，aP＜0.05；與EDN組比較，bP＜0.05。

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1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2015年11月至2016年10月西安市長(zhǎng)安醫(yī)院內(nèi)分泌科收治的220例2型糖尿病患者作為研究對(duì)象，其中男性125例，女性95例，平均年齡54歲，所有患者均符合2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。研究[2]表明尿微量白蛋白與肌酐比值(ACR)測(cè)定是糖尿病早期腎損傷的敏感指標(biāo)。依據(jù)尿微量白蛋白與肌酐比值將2型糖尿病患者分為3組：(1)單純糖尿病(SDM)組：ACR≤30 mg/g，共83例(男性48例，女性35例)；(2)早期糖尿病腎病(EDN)組：300 mg/g≥ACR＞30 mg/g，共77例(男性42例，女性35例)；(3)臨床期糖尿病腎病(CDN)組：ACR＞300 mg/g，共60例(男 35例，女25例)。所有研究對(duì)象均排除冠心病、肝病、急慢性炎癥、妊娠、自身免疫性疾病、Ⅰ型糖尿病等繼發(fā)及原發(fā)性腎臟疾病。選擇同期性別、年齡匹配的健康體檢者80例(男性46例，女性34例，平均年齡52歲)作為對(duì)照組，各組間受檢者的性別、年齡等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法 各組受檢者均予入組次日早晨空腹采集靜脈血3 mL，3 000 r/min離心5 min分離血清待測(cè)，同時(shí)收集晨尿3 mL，3 000 r/min離心5 min，取上清液待測(cè)。采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)血清NGAL、RBP、CysC，參考范圍：NGAL 37～180 ng/mL，RBP 25～70 mg/L，CysC＜1.05 mg/L，采用酶法檢測(cè)血清尿素和肌酐，參考范圍：UREA男，3.1～8.0 mmol/L，女，3.1～8.8 mmol/L，CREA 男，57～97 μmol/L，女，41～81 μmol/L；同時(shí)采用透射比濁法檢測(cè)尿微量白蛋白及采用酶法檢測(cè)尿肌酐計(jì)算尿微量白蛋白與肌酐比值(ACR)，ACR=尿微量白蛋白/尿肌酐，ACR參考范圍0～30 mg/g；所有檢測(cè)項(xiàng)目均采用寧波美康技術(shù)股份有限公司試劑在TBA-120FR全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，各檢測(cè)項(xiàng)目均按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，組間多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，陽(yáng)性率比較采用χ2檢驗(yàn)，均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 SDM組血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；EDN組血清NGAL、CysC及RBP檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=25.63、30.12、21.62，P＜0.05)，而UREA與CREA差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.07、3.11，P＞0.05)；CDN組血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組、SDM組及EDN組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。血清NGAL、CysC、RBP的檢測(cè)結(jié)果隨著尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)的增高而升高，見(jiàn)表1。

2.2 血清NGAL、CysC、RBP檢測(cè)結(jié)果與尿ACR檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性 采用Pearson相關(guān)性分析，以ACR檢測(cè)結(jié)果為自變量，分別以血清NGAL、CysC、RBP檢測(cè)結(jié)果為因變量。相關(guān)性分析結(jié)果顯示血清NGAL、CysC、RBP與尿ACR檢測(cè)結(jié)果之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。

2.3 糖尿病患者各組血清生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率比較 血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA檢測(cè)結(jié)果超出正常參考值上線表示為陽(yáng)性，各項(xiàng)目的陽(yáng)性率計(jì)算公式為：陽(yáng)性率=各組內(nèi)陽(yáng)性例數(shù)/各組總例數(shù)×100%。EDN組血清NGAL、CysC、RBP陽(yáng)性率高于SDM組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，血清UREA、CREA陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2；CDN組血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA陽(yáng)性率高于EDN 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表 3；血清NGAL、CysC、RBP在SDM組、EDN組、CDN組聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為25.3%、68.83%、96.67%，均高于各單項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)陽(yáng)性率，且隨著并病情加重而增高。

表2SDM組與EDN組陽(yáng)性率比較[例(%)]

表3CDN組與EDN組陽(yáng)性率比較[例(%)]

3 討論

DN是T2DM主要慢性并發(fā)癥之一，近年來(lái)，隨著T2DM患病率的逐年上升，由此造成DN發(fā)病率劇增[2-3]。由于DN起病隱匿、缺乏典型的臨床表現(xiàn)，早期僅出現(xiàn)尿微量白蛋白增高[4]，故DN患者一旦出現(xiàn)蛋白尿，預(yù)示著腎病將呈進(jìn)行性發(fā)展。血清UREA、CREA是腎功能損傷的傳統(tǒng)指標(biāo)，在腎損傷時(shí)可升高，但由于腎臟具有強(qiáng)大的代償能力，血清UREA和CREA在腎損傷早期無(wú)明顯改變。本文結(jié)果顯示，對(duì)照組與單純糖尿病(SDM)組和早期糖尿病腎病(EDN)組的血清UREA與CREA檢測(cè)結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在臨床期糖尿病腎病(CDN)組有所增高，說(shuō)明血清UREA與CREA作為早期腎損傷的指標(biāo)靈敏性較差。目前臨床主要以UAER、CREA作為腎損害程度的評(píng)價(jià)以及腎衰竭的分期標(biāo)準(zhǔn)。因此，靈敏度與特異性高的生化指標(biāo)用于早期腎損害的臨床診斷，對(duì)于DN的早期發(fā)現(xiàn)和積極防治具有重要的臨床意義。

CysC是胱氨酸蛋白酶抑制劑，由機(jī)體有核細(xì)胞產(chǎn)生，廣泛存在于各種組織中，經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)而被清除，并在近曲小管重吸收，其產(chǎn)生速率穩(wěn)定且濃度不受年齡、性別、飲食及其他病理變化等因素影響[5]，是反映腎小球?yàn)V過(guò)率的理想指標(biāo)。RBP經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)，由腎小管全部重吸收和降解。文獻(xiàn)報(bào)道，RBP對(duì)于早期腎功能的評(píng)價(jià)具有積極的臨床價(jià)值[6]。NGAL是診斷急性腎損傷(AKI)最有效的標(biāo)志物之一[7]，作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)或上皮細(xì)胞受到損傷刺激時(shí)，NGAL才被誘導(dǎo)并且在受損的腎小管高表達(dá)[8]，可能參與了DM發(fā)展為DN的過(guò)程。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在T2DM中，NGAL水平隨著尿微量白蛋白的水平增加而增加，這種變化出現(xiàn)在T2DM腎病的早期[9]，提示在T2DM中NGAL可作為DN早期腎損傷診斷依據(jù)。

本文結(jié)果顯示，血清NGAL、CysC、RBP檢測(cè)結(jié)果在EDN組明顯升高，并且EDN組患者血清NGAL、CysC、RBP陽(yáng)性率明顯高于SDM組。在SDM組、EDN組、CDN組血清NGAL、CysC、RBP聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為25.3%，68.83%，96.67%，均高于各單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)陽(yáng)性率，且血清NGAL、CysC、RBP與尿微量白蛋白/尿肌酐比值(ACR)為正相關(guān)，證明血清NGAL、CysC、RBP檢測(cè)結(jié)果的升高與EDN的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

文獻(xiàn)報(bào)道，30%～50%的T2DM患者會(huì)發(fā)生DN[10]，聯(lián)合檢測(cè)血清NGAL、CysC、RBP既能反映腎小球病變，又能反映腎小管病變，對(duì)DN的早期診斷具有重要的臨床意義。

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Value of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein,Cystatin C and

retinol binding protein in the early diagnosis of diabetic renal injury.ZHU Wen-fang1,SHEN Jian-jun2,HAN Shuang1,FU Tao1,ZOU Ai-min1.1.Department of Clinical Laboratory,Chang,an Hospital,Xi'an 710016,Shaanxi,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,Tangdu Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi'an 710000,Shaanxi,CHINA

Objective To investigate the clinical significance of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein(NGAL),Cystatin C(Cys-C)and retinol binding protein(RBP)in the early diagnosis of renal function impairment in type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods From November 2015 to October 2016,220 patients with T2DM who admitted to Department of Endocrinology of Chang,an Hospital were selected as the observation group.According to urinary albumin creatinine ratio(ACR),these patients were divided into diabetes mellitus(SDM)group(n=83),early diabetic nephropathy(EDN)group(n=77),and clinical stage of diabetic nephropathy(CDN)group(n=60),and 80 healthy persons were chosen as the control group.Serum Cys-C,RBP and NGAL were detected by latex immunoassay,and serum urea(UREA)was detected by urease glutamate dehydrogenase method.Serum creatinine(CREA)was detected by enzyme method,and the results of each group were compared and analyzed.Results There was no significant difference between the SDM Group and the control group in serum NGAL,CysC,RBP,UREA and CREA detection results(P＞0.05);there was significant difference between the EDN Group the control group in serum NGAL,CysC and RBP detection results(P＜0.05),while there was no significant difference in UREA and CREA(P＞0.05);there were significant differences in serum NGAL,CysC,RBP,CREA and UREA results in the CDN group versus those in the control group,SDM group and EDN group(P＜0.05).Serum NGAL,CysC and RBP positive rates in the EDN group were 55.84%,59.74%,54.55%,respectively,which were significantly higher than corresponding 19.28%,16.87%,15.66%in the SDM group(P＜0.05),while there was no significant difference in the positive rates of serum UREA and CREA(P＞0.05);serum NGAL,CysC,RBP,UREA,CREA in the CDN group were significantly higher than those in the EDN group and SDM group(P＜0.05);the combined detection positive rate of serum NGAL,CysC,RBP in the SDM group,EDN group,CDN group were 25.30%,68.83%,96.67%,respectively,which were significant higher than those of the single detection results.Pearson correlation analysis showed that there was a positive correlation be-tween the serum levels of NGAL,CysC,RBP and urinary ACR test results(P＜0.05).Conclusion Serum NGAL,Cys-C and RBP can be used as the type 2 diabetic kidney important indexes in early diagnosis of injury.Combined detection of these indexes can improve the positive rate of early diagnosis of diabetic nephropathy,and has important significance for clinical identification and early diagnosis of diabetic nephropathy.

Cystatin C(CysC);Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL);Serum retinol binding protein(RBP);Type 2 diabetes mellitus(T2DM);Diabetic nephropathy

R587.2

A

1003—6350（2017）19—3169—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.19.024

2017-03-28)