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      10月了解弧菌很重要!多事之秋謹防弧菌感染,一文教你如何處理防控

      2017-11-02 02:15:39王維廈門科環(huán)海洋生物科技有限公司
      當(dāng)代水產(chǎn) 2017年10期
      關(guān)鍵詞:霍亂弧菌弧菌對蝦

      ■ 王維 (廈門科環(huán)海洋生物科技有限公司)

      10月了解弧菌很重要!多事之秋謹防弧菌感染,一文教你如何處理防控

      ■ 王維 (廈門科環(huán)海洋生物科技有限公司)

      6~10月是水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)病高峰期,水產(chǎn)人基本都應(yīng)該知道。同樣的,10月也是對蝦養(yǎng)殖的又一個關(guān)鍵時期。此時的晝夜溫差更大,更容易影響水生微生物的活動繁殖和種群更替,水質(zhì)更不容易穩(wěn)定和調(diào)理,污染物更易積聚也更難處理,而且水溫已經(jīng)降到適合細菌繁殖的范圍內(nèi),更容易感染養(yǎng)殖動物使其發(fā)病。這些對于剛剛從白露那里劫后余生的池塘而言,又是一個多事之秋。

      這個時期無論是南方的秋綿雨,長江區(qū)域突如其來的寒流,還是10月底華中、華東區(qū)域的霜后暖,亦或是冬棚養(yǎng)殖的初期階段都容易出現(xiàn)一個問題,就是弧菌感染。說起弧菌,這個概念一開始是從細菌病里分支出來的。其實直到2008年、2009年時對蝦養(yǎng)殖還基本都只是在提細菌病而已,后來慢慢才有弧菌一說,當(dāng)然那時開始就有了各種處理方案,其實大家都還是用常規(guī)細菌病的通用方法來處理的。而效果確實也差不了多少。很多時候都可以得到很好的解決,所以一直有好幾年都沒人刻意的留意弧菌會有多厲害。直到2012年之后,弧菌病越來越厲害,漸漸成為對蝦養(yǎng)殖界一個主流的發(fā)病原因之一,人們這才開始去針對性的檢測、研究以及防控。當(dāng)然,回顧以前,也有一種可能是以往發(fā)病厲害的那些病原很可能也是弧菌,只是當(dāng)時的檢測手段研究方向不對而已,這些現(xiàn)在我們就不得而知了,我們只需要知道的是,現(xiàn)在有這個條件,而且是非常簡易便捷廉價的手段能檢測常規(guī)的一些高致病性弧菌,從而給我們的處理防控提供及時的參考。

      1 弧菌簡介

      副溶血弧菌的綠色菌落

      感染副溶血弧菌后紅肝紅腸

      黑鰓

      紅腿

      弧菌感染導(dǎo)致的紅肝

      弧菌感染紅腳紅腿

      弧菌感染引發(fā)急性細菌性腸炎

      黃色菌落

      黃腿

      弧菌,是一類尾有鞭毛弧形菌體的革蘭氏陰性細菌的統(tǒng)稱。大多數(shù)為好氧菌(這一點是經(jīng)過筆者公司實驗研究證實的。至于很多報道有說是厭氧菌這是常識性錯誤,雖然一些種類是兼性厭氧的,但基本都可以在有氧條件下繁殖),部分種類有嗜鹽性。大多數(shù)弧菌代時不超過10min,所以其繁殖快(感染到發(fā)病相隔時間短)變異快(易產(chǎn)生耐藥性)。

      對蝦養(yǎng)殖常見的弧菌有:副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌、鰻弧菌、哈維氏弧菌等。有報道說坎貝氏弧菌、河弧菌和創(chuàng)傷弧菌也能感染對蝦,但未經(jīng)研究考證一般說得很少。

      1.1 副溶血弧菌

      適溫范圍5~47℃,最適30~37℃;pH值適應(yīng)范圍7.4~8.5;嗜鹽性,適鹽范圍20‰~30‰,5‰以下影響生長;嚴格好氧。在TCBS(瓊脂弧菌培養(yǎng)基)上能形成直徑2~3mm的綠色粘滑菌落(接種環(huán)輕觸似口香糖質(zhì)感)。

      染病對蝦呈現(xiàn)體表暗紅色(紅體、紅腿、紅尾、紅腸、紅肝);肝臟腫大發(fā)黃,嚴重的出現(xiàn)萎縮(一般是慢性感染或小蝦);慢性感染的出現(xiàn)空腸空胃,爬邊,趴坑,瀕死的蝦出現(xiàn)離群水面漫游;不到5cm的小蝦會出現(xiàn)肝臟萎縮,體色有發(fā)白(也有發(fā)紅,但不會紅得太明顯),甲殼發(fā)軟,拖便甚至白便。慢性感染的會在放苗60d甚至40d之內(nèi)出現(xiàn)白便癥狀,即使處理好轉(zhuǎn)也會很長時間吃不起料來,大大影響生長速度。感染時間稍長的也很難發(fā)現(xiàn)前期癥狀(因為都是個別蝦爬邊,即使有漫游的也很快會下沉死亡,并被其它蝦分食),一旦看到死亡,往往已經(jīng)進入發(fā)病中后期,并且常伴隨肝臟萎縮、停食等嚴重癥狀,即使用藥對癥,也要相當(dāng)長一段時間才能處理好,這個漫長的時間,非??简烉B(yǎng)殖者或技術(shù)員的耐心和經(jīng)驗,所以大多數(shù)的養(yǎng)殖者最終都是以處理失敗或放棄治療而告終。而急性感染的池塘從出現(xiàn)發(fā)病到整塘嚴重死亡只有2~3d時間,若要處理,必須在一看到發(fā)病就開始用藥,稍一拖延或用藥不對,就會加重病情,還不如不搞直接賣蝦。另外,副溶血弧菌常會繼發(fā)或并發(fā)一些病毒?。ㄓ绕涫侨醵拘偷穆圆《静。?,從而導(dǎo)致大批量的死亡(死亡很大程度是因為副溶血弧菌的毒力影響)。

      1.2 溶藻弧菌

      適溫范圍17~42℃,最適25~32℃;pH值適應(yīng)范圍6~8.5;嗜鹽性,適鹽范圍5‰~50‰,淡水不生長;兼性厭氧,在有氧條件下也能生長;在TCBS上形成直徑2~3mm以上的黃色粘稠、光滑濕潤、邊緣整齊、圓形凸起的菌落,且接種環(huán)不易挑取。

      溶藻弧菌最早是從藻類里分離發(fā)現(xiàn)的,可與大多數(shù)藻類共生,對于環(huán)境而言,其少量存在時算是一種有益的微生物,有穩(wěn)定藻相水質(zhì)的作用,只有過多繁殖才會出現(xiàn)致病性,所以是海水養(yǎng)殖動物常見的條件致病菌之一。此病夏季多發(fā),對蝦從幼體(幼體菌血?。┑酱笪r(褐斑、細菌性爛鰓黑鰓、細菌性紅體、細菌性白斑)都能感染。感染對蝦呈現(xiàn)爛鰓、紅體、空腸空胃、肝臟腫大、甲殼潰爛等癥狀。此病是蝦苗幼體階段的主要疾病之一,對對蝦幼苗的存活率影響非常大。而到了養(yǎng)殖期間尤其是養(yǎng)殖中后期此病的發(fā)病幾率也非常高,尤其是海水養(yǎng)殖區(qū)域?qū)ξr爛黑鰓、對蝦紅腿病、細菌性白斑、褐斑病等都是常見高發(fā)疾病。既然是條件致病菌,在處理這個弧菌時就不能簡單的殺菌消毒,而是必須同時調(diào)理環(huán)境,若是忽視了環(huán)境的改善,即使短時間殺滅控制住弧菌的感染和蔓延,隨后也會很快復(fù)發(fā)。另外,有經(jīng)驗的養(yǎng)殖者應(yīng)該都知道,溶藻弧菌引發(fā)的如爛鰓、黑鰓、白斑、褐斑都是復(fù)發(fā)率非常高的富貴病。這些無論是環(huán)境改良、營養(yǎng)調(diào)理還是弧菌防控都必須方方面面做到位,否則不但病癥很難治愈,而且即使暫時搞好疾病也會很快就卷土重來。

      1.3 霍亂弧菌

      適溫范圍20~45℃,最適37℃左右;pH值適應(yīng)范圍6.0~9.0;廣鹽性,適鹽范圍0‰~45‰;兼性厭氧(有氧條件一樣可以感染);在TCBS上形成直徑2~3mm以上的黃色菌落;霍亂弧菌的一些種類可以發(fā)光。

      霍亂弧菌(水產(chǎn)尤其是對蝦上主要是非01型霍亂弧菌)是非常普遍的一種弧菌,處理起來也見效甚微,筆者看來這有點類似大腸桿菌,一定數(shù)量之內(nèi)與對蝦屬于共生關(guān)系,只有在一定條件下,繁殖過多時才會引發(fā)病變。發(fā)病對蝦水面漫游、眼球腫脹(嚴重的直接潰爛至眼柄)。瀕死對蝦肌肉白濁。此病單獨致死的往往是很大規(guī)格的對蝦,本身死亡率并不大,往往是繼發(fā)或并發(fā)其他病菌致死。近幾年有發(fā)現(xiàn)一些小蝦若是感染過多霍亂弧菌會誘發(fā)嚴重的慢性腸炎,時間一長會引發(fā)拖便、水腸、細腸、甚至2個月內(nèi)就會出現(xiàn)白便甚至肝臟萎縮,是這幾年苗期偷死、白便、慢大的主要病因之一。

      1.4 鰻弧菌

      適溫范圍4~37℃,最適24~35℃;pH值適應(yīng)范圍5~11;嗜鹽性,適鹽范圍5‰~50‰,淡水不生長;兼性厭氧(在有氧條件下也能感染);在TCBS上形成1~2mm以上的黃色菌落。

      感染對蝦癥狀與副溶血弧菌非常類似:體紅、腿紅、尾紅、紅腸等。病蝦會出現(xiàn)有明顯的身體消瘦,頭胸甲心臟附近常出現(xiàn)白濁或發(fā)紅,嚴重的或長期感染的蝦還會出現(xiàn)爛鰓或黃黑鰓,腸道出現(xiàn)黃色粘液。鰻弧菌很少單獨感染對蝦,常是對蝦先感染或攜帶病毒(如IHHNV、白斑病毒、紅體病毒等),體質(zhì)下降之后環(huán)境又達到鰻弧菌繁殖的條件時才大量繁殖令對蝦致死,所以常會檢測到某種病毒和鰻弧菌同時存在,這也是鰻弧菌發(fā)病起來死亡非常嚴重的原因之一。所以想要治療,哪怕再及時也只是一句空話,因為時間上根本來不及,只能靠預(yù)防。

      1.5 哈維氏弧菌

      適溫范圍16~37℃,最適27~32℃;pH值適應(yīng)范圍6.0~9.5;嗜鹽性,適鹽范圍12‰~30‰,淡水不生長;好氧性;在TCBS上形成1~2mm以上的黃色菌落。

      哈維氏弧菌一般感染苗種階段的對蝦,除非池塘環(huán)境較差、水源問題較大或體質(zhì)很差的小蝦(200條以內(nèi))才會感染。所以一般養(yǎng)殖池塘里較少遇到,而大多數(shù)都是在苗廠或淡化暫養(yǎng)池中出現(xiàn),是蝦苗的熒光病的菌原之一。染病小蝦游動彈跳乏力,漫游于水體中下層,最終也是死于池底(也是早期偷死癥的病原之一)。哈維氏弧菌是典型的發(fā)光細菌之一,嚴重感染或瀕死的小蝦會出現(xiàn)身體發(fā)光(一開始是口器、鰓部和生殖腺部位發(fā)光,之后慢慢進入體內(nèi)尤其是頭胸部,最后蔓延全身)的現(xiàn)象。要注意,哈維氏弧菌很容易對抗生素產(chǎn)生耐藥性,在有抗生素污染的水源區(qū)域,一旦感染就很難控制。

      2 弧菌的檢測

      養(yǎng)殖一線一般通過TCBS(瓊脂弧菌培養(yǎng)基,即硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基)來做弧菌培養(yǎng)檢測。其配方成份為:酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、硫代硫酸鈉10g/L、枸櫞酸鈉10g/L、牛膽粉5g/L、牛膽酸鈉3g/L、蔗糖20g/L、氯化鈉10g/L、檸檬酸鐵1g/L、麝香草酚蘭0.04g/L、瓊脂15g/L。培養(yǎng)基pH值為8.6±0.1,保存溫度為25℃。做弧菌培養(yǎng)前稱取8.9g,煮沸溶解于100mL蒸餾水中, 冷至60℃左右時,傾入無菌培養(yǎng)皿,自然冷卻即可得到一個弧菌培養(yǎng)皿。檢測時用接種環(huán)沾取樣品在TCBS上劃線,之后放入恒溫箱,設(shè)定32~35℃,培養(yǎng)12~36h即可得到檢測結(jié)果。

      TCBS上常見有3種顏色,分別為:綠色——副溶血弧菌、河流弧菌;黃色——溶藻弧菌、霍亂弧菌、哈維弧菌、鰻弧菌;黑色——腸桿菌科(如沙門氏菌。因其能代謝產(chǎn)生的硫化物能和培養(yǎng)基里的鐵離子反應(yīng)生成黑色物質(zhì))。

      而TCBS上出現(xiàn)的菌落數(shù)量也可以定量的說明,樣品大概的弧菌的數(shù)量。

      3 弧菌的處理

      處理弧菌一直是這幾年來對蝦養(yǎng)殖界廣泛研究討論的話題,方法不是沒有,而是非常多,以前處理細菌感染的絕大多數(shù)方法其實都是有一定作用的。只是現(xiàn)在的養(yǎng)殖中存在幾點問題,如下文所示。

      大多數(shù)傳統(tǒng)殺菌手法都是好壞通殺,這會導(dǎo)致本來就惡化的環(huán)境(絕大多數(shù)的弧菌都是在環(huán)境很差時才爆發(fā)的)進一步變差,往往是弧菌還沒完全殺滅,魚蝦就已經(jīng)頂不住環(huán)境壓力。

      很多時候即使暫時可把多數(shù)弧菌給殺滅,依然會因為惡劣的環(huán)境導(dǎo)致有益菌群很難正常繁殖起來,占據(jù)優(yōu)勢,而缺乏有益菌群的水體環(huán)境,時間一長又會被弧菌慢慢繁殖起來占據(jù)優(yōu)勢。所以弧菌的復(fù)發(fā)率是相當(dāng)高。

      由于很多弧菌代時很短,繁殖速度極快,很容易對藥物產(chǎn)生耐藥性,所以往往之前用得有效的藥物,第2次或第3次使用時就效果減半甚至完全沒有藥效。因此處理弧菌得經(jīng)常各種藥物交替使用。

      綜合上述幾點,我們一般處理弧菌都最好用化學(xué)類、中藥、和生物制劑搭配使用,比如三黃散(或大黃)配聚維酮碘;過硫配過碳酸鈉;蛭弧菌配乳酸菌。這3個搭配方案算是現(xiàn)在市場上用起來比較好用的。若是嚴重感染的甚至可以先連續(xù)用2~3次大黃+碘,配合晚上干撒過硫+過碳(顆粒粉劑都可,最好是各一半),這樣搭配處理2~3d后再用蛭弧菌配乳酸菌或芽孢或光合菌殺菌的同時補充水體有益菌相。若是懷疑體內(nèi)感染弧菌的(紅腸、紅肝明顯),可以拌喂中藥+聚維酮碘1~2d,之后拌喂蛭弧菌+芽孢或乳酸菌2~3d。注意內(nèi)服無論哪個搭配方案都不能太長時間,超過3d就可能會影響腸胃正常消化吸收功能。

      4 注意

      弧菌有強毒株和弱毒株之分,多數(shù)弧菌在一定數(shù)量以內(nèi)其實是不會對宿主有太大危害的。但若是環(huán)境變了,哪怕是弱毒株也可能慢慢復(fù)壯或是突變?yōu)閺姸局?。而這才是弧菌真正的危險之處。所以哪怕是完全正常的養(yǎng)殖情況下,若是檢測發(fā)現(xiàn)弧菌超標(biāo)也得適當(dāng)?shù)挠盟幙刂埔幌拢悦馊纹浞敝陈油蝗皇裁磿r候變異成為強毒株就為時晚矣。同時即使用藥后明顯減少弧菌數(shù)量或發(fā)病癥狀得到緩解,也不能忽視環(huán)境的調(diào)理。處理弧菌問題,其實最根本的還是對環(huán)境的恢復(fù)正常。

      很多弧菌都是好氧的,即使兼性厭氧的弧菌絕大多數(shù)也能在有氧條件下感染對蝦。這也就是為何我們經(jīng)??吹酵撬盟n的池塘更易爆發(fā)弧菌病的原因。

      多數(shù)弧菌的代謝產(chǎn)物在水溫超過38℃時毒性會大大降低。但在一定水溫范圍內(nèi)(20~37℃),弧菌的毒性是隨著水溫升高而升高的,而且高溫能提高弧菌的易感性,大大縮短發(fā)病時間。

      環(huán)境的污染會促進弧菌的變異和抗藥性的產(chǎn)生(如霍亂弧菌、哈維氏弧菌)。同時水體的富營養(yǎng)化程度越大越能促使細菌、病毒并發(fā)感染的幾率升高。

      弧菌能在池底淤泥、泥沙、池壁上附著潛伏很長時間,甚至一些能頂過清塘消毒這些相對惡劣的環(huán)境。所以有發(fā)過弧菌的池塘或養(yǎng)殖區(qū)域,清塘消毒必須嚴格操作,用藥得加大劑量,同時用藥處理的時間也得留夠。

      弧菌檢測培養(yǎng)時間不能超過48h,否則顏色會變化,甚至是相反,如霍亂弧菌時間長了就會漸漸變成藍綠色,而副溶血弧菌的綠色也會慢慢變淺到看不清是綠色。

      很多弧菌是廣鹽性的,并非人們以前認為的必須要有一定鹽度才繁殖。而事實證明,近幾年很多淡水區(qū)域已經(jīng)越來越頻繁的開始爆發(fā)嚴重的弧菌疾?。ㄈ缃衲甑柠}城、贛榆、湖南)。作為養(yǎng)殖者這一點不得不防。

      相對甲殼類而言弧菌也并非一無是處,弧菌在幾丁質(zhì)物質(zhì)循環(huán)里扮演非常重要且?guī)缀跏遣豢商娲慕巧?。幾乎所有的弧菌都能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶,能幫助自然界處理成千上萬的甲殼、皮毛等廢物。對于機體而言也正是因為弧菌的這些代謝產(chǎn)物能促進一些營養(yǎng)物質(zhì)的分解和消化。所以和大腸桿菌一樣,弧菌也不能完全殺滅干凈。

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