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腹瀉病人沙門(mén)菌的血清分布類(lèi)型和耐藥性狀況解析

陳琴,張瑞中,郭少燕

[目的]解析深圳市腹瀉病人沙門(mén)菌的血清分布類(lèi)型和耐藥性狀況，為臨床診療提供依據(jù)。[方法]選取本院2013年—2015年323例腹瀉病人作為研究對(duì)象，采用抗藥性試紙測(cè)定沙門(mén)菌對(duì)抗菌藥物的敏感程度。[結(jié)果]298株鑒定為血清型，25株不能確定類(lèi)型，在298株血清型菌株中劃分出60種血清類(lèi)型，共發(fā)現(xiàn)23種沙門(mén)菌，主要為腸炎沙門(mén)菌占42.3%，豬霍亂沙門(mén)菌占28.9%，鼠傷寒沙門(mén)菌占8.7%，羅生沙門(mén)菌占7.0%，斯坦利沙門(mén)菌占3.4%。沙門(mén)菌藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：菌株對(duì)頭孢噻肟敏感程度最大，達(dá)到92.6%，其次為頭孢曲松(90.6%)、頭孢拉定(88.9%)、頭孢哌酮(86.2%)，沙門(mén)菌對(duì)亞胺培南和氨芐西林的敏感程度較低。[結(jié)論]深圳市腹瀉案例主要由腸炎沙門(mén)菌和豬霍亂沙門(mén)菌構(gòu)成。高氣溫季節(jié)的感染率高于低氣溫季節(jié)，臨床應(yīng)依照藥物敏感結(jié)果選用抗菌藥物，應(yīng)首選頭孢噻肟。

深圳；腹瀉；沙門(mén)菌；血清型；抗藥性

沙門(mén)菌能夠引發(fā)人類(lèi)產(chǎn)生腹瀉以及食物中毒狀況，全世界每年有1 800萬(wàn)例沙門(mén)菌急性感染病人，其中致死病人達(dá)到68萬(wàn)例，世界衛(wèi)生組織已經(jīng)把該病羅列為存在重要影響的食物性傳播疾病。多年以來(lái)，沙門(mén)菌在深圳市基于食物中毒產(chǎn)生的病原菌中通常位居前列。此外，基于抗生素的不科學(xué)選取并且廣泛采用耐藥病株使得沙門(mén)菌發(fā)生多層級(jí)的耐藥狀況。自從1990年起，具備ACSSuT耐藥狀況的DT104模式屬傷寒沙門(mén)菌在歐美等國(guó)家迅速傳播，因而關(guān)于沙門(mén)菌檢測(cè)和抗藥性的研究非常重要。本研究針對(duì)2013年—2015年發(fā)生在深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院的腹瀉病人進(jìn)行沙門(mén)菌血清解析以及抗藥性分析，以了解本區(qū)域沙門(mén)菌分布以及耐藥情況，為臨床科學(xué)選取抗生素提供理論依據(jù)。

1 選材和方法

1.1 選材

1.1.1 菌體來(lái)源 從深圳市龍華區(qū)人民醫(yī)院2013年—2015年獲得臨床腹瀉疑似沙門(mén)菌感染病人323例，男163例，女160例；門(mén)診198例，臨床125例；年齡18 d至6歲。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料和質(zhì)量控制 亞硒酸胱氨酸增菌溶液[1]、沙門(mén)菌顯色培養(yǎng)基、革蘭陰性菌鑒別卡、12種抗藥性試紙以及水解酪蛋白瓊脂、沙門(mén)菌診療血清、Vitek 3 compack[2]、藥品敏感性試紙。質(zhì)量控制菌株選取抗生素敏感實(shí)驗(yàn)控制菌株ATCC25863和ATCC37969。

1.2 方法

1.2.1 菌株的鑒別和分類(lèi) 依照國(guó)家指標(biāo)GB 352 4889.4-2012進(jìn)行關(guān)于疑似沙門(mén)菌的菌株測(cè)定，選取智能化生化方式對(duì)沙門(mén)菌診斷血清進(jìn)行鑒定。

1.2.2 抗生素藥品的敏感性測(cè)定 選取瓊脂延展方法，根據(jù)美聯(lián)邦指定的臨床實(shí)驗(yàn)室規(guī)則委員會(huì)制定的準(zhǔn)則對(duì)抑菌群進(jìn)行判別。采用12種藥物敏感試紙，包含氨芐西林10 μg、頭孢拉啶30 μg、頭孢吡肟30 μg、頭孢噻肟30 μg、環(huán)丙沙星5 μg、氯霉素30 μg、鏈霉素10 μg、磺胺復(fù)合物300 μg、四環(huán)素30 μg、萘啶酸30 μg、慶大霉素30 μg、甲氧芐啶5 μg。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選取SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件[3]進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，構(gòu)成比比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 323株沙門(mén)菌血清分型結(jié)果

2.1.1 沙門(mén)菌病人年齡分布 共采集323株疑似沙門(mén)菌菌株，通過(guò)檢驗(yàn)?zāi)軌蛘J(rèn)定298株為血清型，其余25株不能確定類(lèi)型，298株劃分為60種血清類(lèi)型，年齡主要在4歲以下，占98%，6歲以上人群患沙門(mén)菌感染腹瀉[4]的概率較小。見(jiàn)圖1。

圖1 2013年—2015年患沙門(mén)菌腹瀉病人年齡分布

2.1.2 沙門(mén)菌病人發(fā)病時(shí)間分布 從時(shí)間分布來(lái)看，沙門(mén)菌病人發(fā)病時(shí)間大多分布在6月～10月，占65%，2015年沙門(mén)菌腹瀉病人發(fā)病時(shí)間見(jiàn)圖2。

圖2 2015年沙門(mén)菌腹瀉病人發(fā)病時(shí)間分布

2.1.3 沙門(mén)菌類(lèi)型分布 本研究檢測(cè)出的沙門(mén)菌類(lèi)型有23種，其中分離數(shù)目在5株之上的血清類(lèi)型有6種[5]，排在前5位有腸炎沙門(mén)菌(42.3%)、豬霍亂沙門(mén)菌(28.9%)、鼠傷寒沙門(mén)菌(8.7%)、羅生沙門(mén)菌(7.2%)和斯坦利沙門(mén)菌(3.4%)。298株沙門(mén)菌類(lèi)型分布見(jiàn)表1。

表1 298株沙門(mén)菌群別及血清型分布情況

2.2 沙門(mén)菌藥物敏感性和抗藥性 沙門(mén)菌的抗藥性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：菌株對(duì)頭孢噻肟敏感度最大，達(dá)到92.6%，其次為頭孢曲松，敏感度為90.6%，對(duì)頭孢拉定的敏感度為88.9%，對(duì)頭孢哌酮的敏感程度為86.2%，沙門(mén)菌對(duì)亞胺培南和氨芐西林的敏感度較低[6]。沙門(mén)菌對(duì)氨曲南、氯霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟以及氨芐西林的抗藥程度[7]均超過(guò)16%，氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢曲松以及頭孢拉定的中介比例較低，亞胺培南、頭孢哌酮和氨曲南的中介比例較高。見(jiàn)表2。

表2 沙門(mén)菌藥物敏感性和抗藥性情況(n=298) 株(%)

2.3 沙門(mén)菌對(duì)藥物的抗藥性 10種抗菌藥物包括氨芐西林、亞胺培南、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢拉定、頭孢曲松、氨曲南、氯霉素、克拉維酸和鏈霉素。本研究選用8種245株沙門(mén)菌完成抗藥性實(shí)驗(yàn)，在298株沙門(mén)菌中抗藥性達(dá)到3種之上的沙門(mén)菌菌株為205株，占68.8%，各類(lèi)血清模式沙門(mén)菌的多層級(jí)抗藥性能存在差異，其中鼠傷寒類(lèi)型的沙門(mén)菌多重耐藥特性[8]層級(jí)以8抗藥性的菌株數(shù)目為主，腸炎類(lèi)沙門(mén)菌則以4抗藥性為主，乙型副傷寒類(lèi)沙門(mén)菌則以6抗藥性為主，而徹斯特沙門(mén)菌的多層級(jí)抗藥效能較輕。在抗藥性譜模式上產(chǎn)生ACSSuT和抗藥譜[9]，該抗藥譜包含氨芐西林、亞胺培南、頭孢哌酮、氨曲南和氯霉素等5類(lèi)以及更多種類(lèi)的抗藥性藥物的菌株達(dá)到143株。其中腸炎沙門(mén)菌抗藥程度較高，達(dá)45.2%。245株沙門(mén)菌對(duì)10種藥物均具有抗藥性，主要包含腸炎12株、豬霍亂10株、鼠傷寒1株。血清類(lèi)型沙門(mén)菌多層級(jí)抗藥率見(jiàn)表3。

表3 血清類(lèi)型沙門(mén)菌多層級(jí)抗藥率 %

3 討論

3.1 2013年—2015年腹瀉類(lèi)沙門(mén)菌血清型分布 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，深圳市腹瀉案例主要由腸炎沙門(mén)菌和豬霍亂沙門(mén)菌構(gòu)成，該現(xiàn)象和相鄰的江蘇省狀況類(lèi)似，但和國(guó)內(nèi)的其他區(qū)域存在一定差別，東南沿海區(qū)域主要以鼠傷寒沙門(mén)菌為主。

3.2 腹瀉沙門(mén)菌發(fā)生的季節(jié)和年齡特點(diǎn) 從圖中可看出：腹瀉病人發(fā)病時(shí)間多在6月～10月，占發(fā)病總數(shù)的65%，提示溫度為腹瀉類(lèi)沙門(mén)菌增殖的一個(gè)主要因素。研究結(jié)果表明：1月沙門(mén)菌感染病例較少，占2.3%，2月～4月沙門(mén)菌感染病例逐步增多，但該時(shí)段的發(fā)病率總體較低，占22.3%，5月～6月呈現(xiàn)沙門(mén)菌感染發(fā)病的小高峰，占13.0%，7月～9月沙門(mén)菌感染病例達(dá)到高峰，占42.0%。9月～10月沙門(mén)菌感染病例逐步下降，11月～12月沙門(mén)菌感染病例數(shù)較少。4歲以下的幼兒占98%，超過(guò)6歲的人群患沙門(mén)菌感染腹瀉的概率較小。

3.3 兒童腹瀉沙門(mén)菌抗感染治療分析 美聯(lián)邦抗生素抗藥性監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，23.7%的非傷寒類(lèi)型的沙門(mén)菌最少包含1類(lèi)及其以上的抗生素，其中最為多見(jiàn)的為多重抗藥譜，ACSSuT+抗藥譜[10]。本研究發(fā)現(xiàn)：298株沙門(mén)菌對(duì)3類(lèi)以上的抗菌藥物的耐藥性高達(dá)205株，抗藥性達(dá)到68.8%，說(shuō)明該區(qū)域的沙門(mén)菌菌株包含多層級(jí)的抗藥狀況。鼠傷寒沙門(mén)菌為耐藥層級(jí)最為重要的血清類(lèi)型，并且在抗藥性譜模式上，產(chǎn)生ACSSuT和抗藥譜，本研究結(jié)果和山東省的研究結(jié)果類(lèi)似[11]。本研究中沙門(mén)菌對(duì)于頭孢類(lèi)抗生素敏感度在86%以上，因而頭孢類(lèi)抗菌藥依舊是臨床治療沙門(mén)菌感染的首選藥物，但長(zhǎng)時(shí)間采用3代或者4代的頭孢菌素易獲得超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株，因而在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，若要完全治愈沙門(mén)菌感染應(yīng)當(dāng)聯(lián)合用藥。

3.4 深圳市腹瀉病人沙門(mén)菌實(shí)驗(yàn)啟示 在現(xiàn)有的農(nóng)牧業(yè)以及養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展中主要選取抗生素作為養(yǎng)殖材料并且混合添加劑等物質(zhì)防范家禽傳染病，長(zhǎng)時(shí)間選用抗生素的結(jié)果使得菌類(lèi)獲得耐藥特性，尤其是多層級(jí)耐藥特性，而該類(lèi)耐藥菌類(lèi)依照各類(lèi)方式反饋到人類(lèi)身上。美國(guó)食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)2012年相關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示：在養(yǎng)殖業(yè)中選取的抗生素大約3 000萬(wàn)磅，而該年實(shí)現(xiàn)人類(lèi)病癥醫(yī)療選取的抗生素大約為800萬(wàn)磅。此外，科研者針對(duì)美國(guó)市面上售賣(mài)的生肉實(shí)現(xiàn)抗藥菌株的檢驗(yàn)，結(jié)果顯示80.5%的火雞肉、68.5%的豬肉以及56.2%的牛肉有耐藥菌類(lèi)，并且具有抗藥性質(zhì)的沙門(mén)菌檢出率較高，72%的火雞肉類(lèi)被檢測(cè)得到包含最少兩種抗生素的抗藥性沙門(mén)菌。當(dāng)前，食品中對(duì)沙門(mén)菌的抗藥性程度較高，因而對(duì)現(xiàn)實(shí)醫(yī)療實(shí)踐具有較高的價(jià)值。

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AnalysisofserumdistributionanddrugresistanceofSalmonellaindiarrheapatients

ChenQin，ZhangRuizhong，GuoShaoyan

(People’s Hospital of New District Longhua District Shenzhen,Guangdong 518109 China)

R473.57

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.32.040

1009-6493(2017)32-4170-03

陳琴，護(hù)師，本科，單位：518109，深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院；張瑞中、郭少燕單位：518109，深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院。

信息陳琴,張瑞中,郭少燕.腹瀉病人沙門(mén)菌的血清分布類(lèi)型和耐藥性狀況解析[J].護(hù)理研究，2017，31(32)：4170-4172.

2016-08-31；

2017-10-16)

(本文編輯 范秋霞)