不同麻醉方法對(duì)卵巢癌患者圍手術(shù)期T淋巴細(xì)胞亞群含量和IL-2水平的影響

王必銘，鄭翔

（浙江省臨海市第一人民醫(yī)院 麻醉科，浙江 臨海 317000）

不同麻醉方法對(duì)卵巢癌患者圍手術(shù)期T淋巴細(xì)胞亞群含量和IL-2水平的影響

王必銘，鄭翔

（浙江省臨海市第一人民醫(yī)院 麻醉科，浙江 臨海 317000）

目的 探討不同麻醉方法對(duì)卵巢癌患者圍手術(shù)期T淋巴細(xì)胞亞群含量和白細(xì)胞介素2（IL-2）水平的影響。方法 選取2013年1月-2016年12月該院行卵巢癌根治術(shù)的160例患者作為研究對(duì)象，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字法分為全身麻醉組和硬膜外麻醉組，每組80例。測(cè)量?jī)山M患者的外周血T淋巴細(xì)胞亞群含量及其相關(guān)細(xì)胞因子IL-2水平。結(jié)果 全身麻醉組與硬膜外麻醉組患者年齡、體重、手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、輸液量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。不同時(shí)間的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平有差異（P ＜0.05）；全身麻醉組的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于硬膜外麻醉組（P＜0.05）；全身麻醉組和硬膜外麻醉組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+變化趨勢(shì)有差異（P＜0.05）。不同時(shí)間的IL-2水平有差異（P＜0.05）；全身麻醉組的IL-2水平低于硬膜外麻醉組（P＜0.05）；全身麻醉組和硬膜外麻醉組的IL-2水平變化趨勢(shì)有差異（P＜0.05）。結(jié)論 硬膜外麻醉可減輕其對(duì)卵巢癌根治術(shù)患者圍手術(shù)期細(xì)胞免疫功能的抑制作用。

全身麻醉；硬膜外麻醉；卵巢癌；細(xì)胞免疫

卵巢癌為女性惡性腫瘤之一，卵巢癌根治術(shù)是卵巢癌的主要治療方法，但經(jīng)腹部卵巢癌涉及部位比較多，手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)，手術(shù)創(chuàng)傷大，對(duì)身體造成的創(chuàng)傷比較大，且術(shù)后疼痛可引起全身應(yīng)激反應(yīng)，過(guò)度的應(yīng)激反應(yīng)對(duì)機(jī)體免疫功能具有抑制作用[1]。麻醉方法對(duì)機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)和免疫功能的影響是可逆的、暫時(shí)的，選擇對(duì)圍手術(shù)期免疫反應(yīng)影響比較小的麻醉方法，對(duì)惡性腫瘤患者的術(shù)后康復(fù)具有積極作用[2-3]。本文對(duì)卵巢癌根治術(shù)患者采用全身麻醉和硬膜外麻醉，觀察2種麻醉方法對(duì)圍手術(shù)期細(xì)胞免疫功能的影響，為臨床治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2013年1月-2016年12月在浙江省臨海市第一人民醫(yī)院行卵巢癌根治術(shù)的160例患者作為研究對(duì)象。其中，年齡37～66歲，體重44～68 kg，美國(guó)麻醉醫(yī)師協(xié)會(huì)Ⅰ、Ⅱ級(jí)，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字法分為全身麻醉組和硬膜外麻醉組，每組80例。兩組患者簽署知情同意書(shū)，均經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 所有患者經(jīng)病理證實(shí)為卵巢癌患者，首次進(jìn)行卵巢癌手術(shù)，均進(jìn)行卵巢癌根治術(shù)者，術(shù)前未進(jìn)行放化療，資料完整，自愿參與研究。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 圍手術(shù)期有輸血，高血壓，精神疾病，其他惡性腫瘤，免疫性疾病及內(nèi)分泌性疾病，嚴(yán)重肝腎功能異常，長(zhǎng)期服用鎮(zhèn)痛藥。

1.2 研究方法

1.2.1 麻醉方法 ①全身麻醉組：患者采用丙泊酚1.5 mg/kg、芬太尼 2～3 μg/kg、咪唑安定 0.05 ms/kg和維庫(kù)溴銨0.12 mg/kg靜脈誘導(dǎo)。氣管插管后，持續(xù)泵注丙泊酚、瑞芬太尼，同時(shí)靜脈間斷注射維庫(kù)溴銨以維持麻醉深度。全身麻醉過(guò)程中麻醉深度以腦電雙頻指數(shù)檢測(cè)，麻醉深度指數(shù)維持在45～55；②硬膜外麻醉組：T12～L1和L2～3椎間隙硬膜外穿刺成功后 T12～L1向上置管 3 cm，L2～3向上置管 4 cm，回抽無(wú)腦脊液及血液時(shí)，注入0.5%羅哌卡因5～10 ml，麻醉平面控制在T4～T6。手術(shù)過(guò)程中，間隔1 h于硬膜外腔內(nèi)注入5 ml局部麻醉藥物，并輔助給予芬太尼1 μg/kg、咪唑安定0.05 mg/kg間斷靜脈注射。

1.2.2 血液標(biāo)本采集 分別于麻醉前、麻醉2 h、術(shù)后1 d、術(shù)后3 d、術(shù)后7 d抽取外周靜脈血，用于細(xì)胞免疫功能及其相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素2（Interleukin-2，IL-2）水平測(cè)定。

1.2.3 外周血T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定 采用流式細(xì)胞儀測(cè)定外周血 CD3+、CD4+、CD8+含量。Callios流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)Beckman公司，流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑均購(gòu)自美國(guó)BD公司。

1.2.4 血清IL-2水平測(cè)定 采用ELISA法測(cè)定血清IL-2水平。ELISA試劑盒購(gòu)自武漢三鷹公司，批號(hào)520013007。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)或重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

全身麻醉組和硬膜外麻醉組患者年齡、體重、手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、輸液量比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般情況比較 （n=80，±s）

表1 兩組患者一般情況比較 （n=80，±s）

組別 年齡/歲 體重/kg 手術(shù)時(shí)間/min 術(shù)中出血量/ml 輸液量/ml全身麻醉組 52.47±6.58 65.52±7.68 189.43±11.53 214.54±23.58 2314.35±154.37硬膜外麻醉組 53.14±6.23 66.07±6.95 191.24±12.05 211.39±21.37 2342.17±148.64 t值 1.088 0.932 1.213 0.939 0.498 P值 0.278 0.314 0.208 0.349 0.512

2.2 兩組患者淋巴細(xì)胞亞群比較

全身麻醉組與硬膜外麻醉組麻醉前、麻醉2 h、術(shù)后 1 d、術(shù)后 3 d 的 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果：①不同時(shí)間的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平有差異（F=35.426、28.435和41.243，均P=0.000）；②全身麻醉組和硬膜外麻醉組 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平有差異（F=65.324、57.427 和 66.429，均 P=0.000），全身麻醉組麻醉 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于硬膜外麻醉組；③全身麻醉組和硬膜外麻醉組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+變化趨勢(shì)有差異（F=21.425、18.536和19.264，均P=0.000）。見(jiàn)表2和圖1～5。

表2 兩組患者淋巴細(xì)胞亞群比較 （n=80，%，±s）

表2 兩組患者淋巴細(xì)胞亞群比較 （n=80，%，±s）

組別 免疫指標(biāo) 麻醉前 麻醉2 h 術(shù)后1 d 術(shù)后3 d 術(shù)后7 d全身麻醉組 CD3+ 62.14±7.68 54.36±6.57 48.98±6.72 52.46±6.42 61.93±7.92 CD4+ 42.02±6.13 31.28±6.84 26.32±5.98 31.27±6.31 41.88±6.19 CD8+ 25.41±2.32 25.27±2.17 25.33±2.15 25.16±2.37 25.48±2.19 CD4+/CD8+ 1.65±0.18 1.24±0.14 1.04±0.07 1.24±0.16 1.64±0.22硬膜外麻醉組 CD3+ 61.87±7.92 57.43±7.21 53.66±6.47 56.37±6.38 62.08±8.03 CD4+ 41.93±5.78 34.85±7.21 31.16±6.34 34.24±6.57 41.69±5.97 CD8+ 25.53±2.17 24.98±2.31 24.94±2.22 25.18±2.34 25.36±2.35 CD4+/CD8+ 1.64±0.32 1.40±0.24 1.25±0.02 1.36±0.11 1.64±0.43

圖1 全身麻醉組和硬膜外麻醉組CD3+變化趨勢(shì)

圖2 全身麻醉組和硬膜外麻醉組CD4+變化趨勢(shì)

圖3 全身麻醉組和硬膜外麻醉組CD8+變化趨勢(shì)

圖4 全身麻醉組和硬膜外麻醉組CD4+/CD8+變化趨勢(shì)

2.3 兩組患者細(xì)胞免疫相關(guān)細(xì)胞因子比較

圖5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)圖

圖6 全身麻醉組和硬膜外麻醉組IL-2變化趨勢(shì)

全身麻醉組與硬膜外麻醉組麻醉前、麻醉2 h、術(shù)后1 d、術(shù)后3 d的IL-2水平比較，采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果：①不同時(shí)間的IL-2水平有差異（F=23.425，P=0.000）；②全身麻醉組和硬膜外麻醉組IL-2水平有差異（F=38.241，P=0.000），全身麻醉組麻醉IL-2水平低于硬膜外麻醉組；③全身麻醉組和硬膜外麻醉組IL-2水平變化趨勢(shì)有差異（F=11.425，P=0.000）。見(jiàn)表 3 和圖 6。

表3 兩組患者IL-2水平比較 （n=80，pg/ml，±s）

表3 兩組患者IL-2水平比較 （n=80，pg/ml，±s）

組別 麻醉前 麻醉2 h 術(shù)后1 d 術(shù)后3 d 術(shù)后7 d全身麻醉組 13.53±2.46 10.12±4.36 7.47±4.01 8.89±3.94 13.42±2.53硬膜外麻醉組 13.61±2.52 10.03±4.42 8.78±4.27 11.18±4.06 13.49±2.47

3 討論

卵巢癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，對(duì)女性患者的健康造成嚴(yán)重危害，手術(shù)治療是卵巢癌的首選治療方法。手術(shù)創(chuàng)傷和麻醉對(duì)機(jī)體非特異性免疫功能具有抑制作用。惡性腫瘤患者在受到手術(shù)創(chuàng)傷等刺激時(shí)，機(jī)體可產(chǎn)生一系列神經(jīng)內(nèi)分泌改變，手術(shù)應(yīng)激引起的神經(jīng)內(nèi)分泌改變對(duì)細(xì)胞免疫具有抑制作用，增加圍手術(shù)期惡性腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)[4-5]；且術(shù)后疼痛刺激傳達(dá)到中樞神經(jīng)系統(tǒng)也對(duì)細(xì)胞免疫產(chǎn)生抑制作用，應(yīng)激反應(yīng)引起的兒茶酚胺、前列腺素、內(nèi)源性皮質(zhì)類固醇激素的增加也引起免疫系統(tǒng)功能紊亂[6-8]。

在人體胚胎期和初生期，骨髓中前T細(xì)胞或多能干細(xì)胞遷移至胸腺內(nèi)，在胸腺激素的作用下，分化成為具有免疫活性的T細(xì)胞，成熟T細(xì)胞經(jīng)血液分布到外周免疫器官，并經(jīng)血液、淋巴管、組織液等再循環(huán)發(fā)揮細(xì)胞免疫功能[9-10]。CD3+分子是鑒定T細(xì)胞的重要標(biāo)志，CD4+分子對(duì)T細(xì)胞亞群具有鑒別作用，CD8+分子分布在殺傷性T淋巴細(xì)胞和抑制性T淋巴細(xì)胞表面，在T細(xì)胞亞群鑒別中具有重要作用，CD4+/CD8+是重要的免疫參數(shù)，其比值降低預(yù)示患者患嚴(yán)重疾病或者疾病預(yù)后不良[11-13]。本文對(duì)全身麻醉和硬膜外麻醉對(duì)卵巢癌患者圍手術(shù)期細(xì)胞免疫功能的影響進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組患者麻醉2 h、術(shù)后 1 d、術(shù)后 3 d 時(shí) CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平降低，術(shù)后 7 d 時(shí) CD3+、CD4+、CD4+/CD8+恢復(fù)至麻醉前水平；兩組患者麻醉2 h、術(shù)后1 d、術(shù)后3 d、術(shù)后7 d時(shí)CD8+水平與麻醉前比較無(wú)差異；全身麻醉組麻醉2 h、術(shù)后 1 d、術(shù)后 3 d 時(shí) CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于硬膜外麻醉組，兩組術(shù)后7 d時(shí)CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較無(wú)差異。由此可見(jiàn)，卵巢癌的手術(shù)和麻醉對(duì)圍手術(shù)期細(xì)胞免疫具有不同程度的抑制作用，該抑制作為一過(guò)性的，其中硬膜外麻醉對(duì)圍手術(shù)期細(xì)胞免疫的抑制作用較全身麻醉小，原因可能為全身麻醉大量全麻藥對(duì)機(jī)體的影響比較大，且氣管插管作為有害刺激，增加術(shù)中應(yīng)激反應(yīng)，而硬膜外麻醉對(duì)機(jī)體的影響比較小，且無(wú)氣管插管刺激[14]。

IL-2是促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖、分化、成熟的主要細(xì)胞因子，由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生[15-16]，本研究對(duì)全身麻醉和硬膜外麻醉對(duì)卵巢癌患者圍手術(shù)期IL-2水平的影響進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組患者麻醉2 h、術(shù)后1 d、術(shù)后3 d時(shí)IL-2水平下降，術(shù)后7 d時(shí)IL-2水平恢復(fù)至麻醉前水平；全身麻醉組麻醉術(shù)后3 d時(shí)IL-2水平低于硬膜外麻醉組，麻醉前、麻醉2 h、術(shù)后1 d、術(shù)后7 d時(shí)兩組IL-2水平無(wú)差異。由此可見(jiàn)，卵巢癌的手術(shù)和麻醉可降低圍手術(shù)期IL-2水平，其中全身麻醉患者血清IL-2水平下降較硬膜外麻醉患者顯著，表明硬膜外麻醉對(duì)T淋巴細(xì)胞相關(guān)因子IL-2水平的影響比較小，有利于維持細(xì)胞因子水平的穩(wěn)定，從而維持細(xì)胞免疫功能平衡。

[1]WOUTERS M C,KOMDEUR F L,WORKEL H H,Treatment regimen,surgicaloutcome,and t-celldifferentiation influence prognostic benefit of tumor-infiltrating lymphocytes in high-grade serous ovarian cancer[J].Clin Cancer Res,2016,22(3):714-724.

[2]XU Y,SUN Y,CHEN H,et al.Effects of two different anesthetic methods on cellular immunity of patients after liver cancerresection[J].J Biol Regul Homeost Agents,2016,30(4):1099-1106.

[3]朱韻甜,陳亦蛟,周大春,等.不同麻醉及鎮(zhèn)痛方法對(duì)肺癌根治術(shù)患者細(xì)胞免疫功能的影響[J].浙江醫(yī)學(xué),2014,36(20):1674-1676.

[4]SUN H Z,SONG Y L,WANG X Y.Effects of different anesthetic methods on cellular immune and neuroendocrine functions in patients with hepatocellular carcinoma before and after surgery[J].J Clin Lab Anal,2016,30(6):1175-1182.

[5]WANG X T,LV M,GUO H Y.Effects of epidural block combined with general anesthesia on antitumor characteristics of T helper cells in hepatocellular carcinoma patients[J].J Biol Regul Homeost Agents,2016,30(1):67-77.

[6]龔小芳.全麻復(fù)合硬膜外麻醉對(duì)肺癌根治術(shù)患者細(xì)胞免疫功能的影響[J].實(shí)用癌癥雜志,2015,30(2):211-213.

[7]ZHAO J,MO H.The impact of different anesthesia methods on stress reaction and immune function of the patients with gastric cancer during peri-operative period[J].J Med Assoc Thai,2015,98(6):568-573.

[8]趙運(yùn)龍.全身麻醉復(fù)合硬膜外麻醉對(duì)腹腔鏡膽囊切除術(shù)患者術(shù)后免疫功能、應(yīng)激狀態(tài)及凝血功能的影響[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2017,23(5):676-679.

[9]GUAN C,LI J,XU P,et al.Composite primary breast diffuse large B-cell lymphoma and T lymphoblastic leukemia/lymphoma:report of a case and review of literature[J].Int J Clin Exp Pathol,2015,8(8):9629-9637.

[10]KAKINOKI Y,HASHIGUCHI J,ISHIO T,et al.CD20-positive primary gastric T-cell lymphoma poorly responding to initial treatment with rituximab plus CHOP,and a literature review[J].Int J Hematol,2015,102(6):702-708.

[11]YAMASHITA T,KASAHARA K,EMOTO T,et al.Intestinal immunity and gut microbiota as therapeutic targets for preventing atherosclerotic cardiovascular diseases[J].Circ J,2015,79(9):1882-1890.

[12]YANG X,SUN B,WANG H,et al.Increased serum IL-10 in lupus patients promotes apoptosis of T cell subsets via the caspase-8 pathway initiated by Fas signaling[J].J Biomed Res,2015,29(3):232-240.

[13]XIAO Z,NI Y,YIN G,et al.Mantle cell lymphoma concurrent with T-large granular lymphocytic leukemia:report of a case andreview of literature[J].Int J Clin Exp Pathol,2015,8(3):3365-3369.

[14]李春霞,楊慧,李春陽(yáng),等.不同麻醉方法對(duì)宮頸癌手術(shù)患者免疫功能的影響[J].實(shí)用癌癥雜志,2015,30(9):1398-1400.

[15]BALLESTEROS-TATO A.Beyond regulatory T cells:the potential role for IL-2 to deplete T-follicular helper cells and treat autoimmune diseases[J].Immunotherapy,2014,6(11):1207-1220.[16]ROSENBERG S A.IL-2:the first effective immunotherapy for human cancer[J].J Immunol,2014,192(12):5451-5458.

Effects of different anesthesia methods on perioperative T lymphocyte subsets and IL-2 level in ovarian cancer patients

Bi-ming Wang,Xiang Zheng
(Department of Anesthesiology,Linhai First People's Hospital,Linhai,Zhejiang 317000,China)

Objective To investigate the effectofdifferentanesthesia methodson perioperative T lymphocyte subsets and IL-2 level in ovarian cancer patients.Methods A total of 160 patients with ovarian cancer who underwent radical surgery in our hospital from January 2013 to December 2016 were selected as the subjects and divided into general anesthesia group and epidural anesthesia group according to the random number method,each group had 80 cases.The levels of peripheral blood T lymphocyte subsets and IL-2 were measured in the two groups.Results There was no significant difference in age,body weight,operation time,intraoperative blood loss or infusion volume between the general anesthesia group and the epidural anesthesia group(P＞0.05).The levels of CD3+,CD4+and CD4+/CD8+were different at different time points(P＜0.05).The levels of CD3+,CD4+and CD4+/CD8+in the general anesthesia group were lower than those in the epidural anesthesia group (P＜0.05).The change trends of CD3+,CD4+and CD4+/CD8+in the general anesthesia group and the epidural anesthesia group were different(P＜0.05).There were differences in the IL-2 levels at different time points(P＜0.05).The level of IL-2 in the general anesthesia group was lower than that in the epidural anesthesia group (P＜0.05).There was significant difference in the change of IL-2 between the general anesthesia group and the epidural anesthesia group (P＜0.05).Conclusions Epidural anesthesia has less inhibitory effect on perioperative cellular immune function in patients with ovarian cancer radical surgery.

general anesthesia;epidural anesthesia;ovarian cancer;cellular immunity

R737.31

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.26.018

1005-8982（2017）26-0087-05

2017-01-21

（童穎丹 編輯）