93例女性生殖道感染念珠菌菌種分布及藥敏結(jié)果分析

李前輝 李 鶴 林 濤 唐朝貴 姜玉章 江 明

·論著·

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93例女性生殖道感染念珠菌菌種分布及藥敏結(jié)果分析

李前輝1李 鶴2林 濤1唐朝貴1姜玉章1江 明2

目的明確93例女性生殖道念珠菌感染菌種分布及藥敏。方法收集93例女性生殖道感染患者分泌物，采用Sabouraud瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行菌落培養(yǎng)，血清芽管試驗(yàn)及CHROMagar顯色培養(yǎng)基進(jìn)行菌株的篩選，DL-96 FUNGUS念珠菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行念珠菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果菌種構(gòu)成分布依次為白念珠菌81株(87.10%)，光滑念珠菌8株(8.60%)，都柏林念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各1株(1.08%)。白念珠菌對兩性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率為100.00%，其它依次為伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)和伊曲康唑(62.96%)。光滑念珠菌對兩性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率為100.00%，其它依次為伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)和伊曲康唑(25.00%)。結(jié)論女性生殖道感染的念珠菌主要菌種是白念珠菌，敏感率最高的藥物為兩性霉素B和5-氟胞嘧啶。

女性生殖道； 念珠菌； 藥物敏感試驗(yàn)

女性生殖道感染念珠菌是引起婦科炎癥常見的原因之一，可導(dǎo)致外陰陰道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)。很多VVC經(jīng)治療后仍容易復(fù)發(fā)，給病人帶來困擾和負(fù)擔(dān)。本研究通過對江蘇淮安及周邊地區(qū)女性患者生殖道感染念珠菌標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)鑒定及體外藥物敏感試驗(yàn)，揭示本地區(qū)致病菌種的分布特征和藥敏特點(diǎn)，為臨床診療及合理用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 93例標(biāo)本來源于南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院2012年6月至2017年3月皮膚科和婦科初診患者。患者年齡18～80歲，平均30.5歲。患者在就診前未接受過抗真菌藥物治療、未合并其它生殖道疾病?；颊呔哂型怅庰W、白帶增多、呈豆腐渣樣等典型臨床癥狀。以無菌棉拭子經(jīng)窺陰器進(jìn)入陰道，取陰道后穹隆分泌物進(jìn)行常規(guī)鏡檢，鏡檢見真菌者進(jìn)一步做真菌培養(yǎng)。

1.2 培養(yǎng)基與試劑 Sabouraud瓊脂培養(yǎng)基購自杭州濱河微生物試劑有限公司，CHROMagar顯色培養(yǎng)基購自鄭州博賽生物科技有限公司，DL-96 FUNGUS念珠菌鑒定與藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)購自珠海迪爾生物工程有限公司。

1.3 菌種培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn)

1.3.1 標(biāo)本接種 將采集的標(biāo)本分區(qū)劃線接種于Sabouraud瓊脂培養(yǎng)基，放置于35℃真菌培養(yǎng)箱孵育24～72 h，菌落白色、奶油樣，軟而光滑、有光澤。

1.3.2 血清芽管實(shí)驗(yàn) 挑取少許菌落混懸在0.2～0.5 mL的健康人血清中，37℃孵育2～4 h，每小時觀察1次，取1滴菌懸液置載玻片上，鏡下見芽管者為白念珠菌。

1.3.3 菌落篩選 將菌落劃線接種于CHROMagar顯色培養(yǎng)基，25℃～30℃培養(yǎng)48～72 h，觀察結(jié)果。白念珠菌為綠色菌落；光滑念珠菌為紫色菌落；熱帶念珠菌為藍(lán)灰色、鐵藍(lán)色菌落；克柔念珠菌為粉紅色菌落；白色至淡粉色為其它種類的念珠菌。

1.3.4 菌種鑒定及藥敏試驗(yàn) 從培養(yǎng)基上挑取菌落制成濁度為1麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?，利用DL-96 FUNGUS念珠菌鑒定與藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)，24 h后讀取結(jié)果。

1.3.5 質(zhì)控菌株 ATCC 90029(白念珠菌)、ATCC 15126(光滑念珠菌)、ATCC 13803(熱帶念珠菌)、ATCC 6258(克柔念珠菌)。

2 結(jié)果

2.1 念珠菌的菌種分布特征 念珠菌的菌種培養(yǎng)鑒定特點(diǎn)，見表1。

表1 念珠菌的菌種培養(yǎng)鑒定特點(diǎn)

在93例女性患者生殖道感染念珠菌標(biāo)本中，病原學(xué)鑒定顯示：菌種構(gòu)成主要為白念珠菌(81株)，其次為光滑念珠菌(8株)，都柏林念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各有1株。菌種的構(gòu)成比，見表2。

表2 93株念珠菌的菌種分布特征

2.2 念珠菌的體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果 白念珠菌的體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示：敏感率最高的藥物為兩性霉素B和5-氟胞嘧啶(兩者均達(dá)100.00%)，其它依次為伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)、伊曲康唑(62.96%)。見表3。

光滑念珠菌的體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示：敏感率最高的藥物為兩性霉素B和5-氟胞嘧啶(兩者均達(dá)100.00%)，其它依次為伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)、伊曲康唑(25.00%)。見表4。

表3 81株白念珠菌的體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果 例(%)

表4 8株光滑念珠菌的體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果 例(%)

3 討論

白念珠菌是人體最重要的機(jī)會致病真菌之一[1]，在口腔、呼吸道、腸道、女性陰道均有分布，一般數(shù)量較少，不引起疾病，但是當(dāng)機(jī)體免疫力降低時，則會大量繁殖而引起疾病。

有研究表明念珠菌感染已成為陰道感染的第二大病因，僅次于細(xì)菌性陰道炎[2]。女性在青春期以后雌激素水平增高，局部皮膚溫暖潮濕，微生態(tài)環(huán)境發(fā)生改變，更適合念珠菌生長[3]，特別是妊娠期女性由于體內(nèi)雌激素迅速增加而使陰道黏膜充血、水腫、通透性增強(qiáng)，陰道環(huán)境糖原水平較高，同時宮頸腺體分泌明顯增加，導(dǎo)致陰道分泌物明顯增多，這些都有利于念珠菌生長繁殖而引起VVC。妊娠期VVC檢出率為10.0%～44.3%[4]。

有報道顯示VVC占門診陰道炎的30%[5]，有10%的患者為重復(fù)感染[6]。近年來由于性傳播疾病的逐漸增多，加之廣譜抗菌藥物的濫用，生殖器念珠菌病(包括女性外陰陰道念珠菌病和男性包皮龜頭炎)的發(fā)病率上升，并且隨著抗真菌藥物的頻繁使用，耐藥現(xiàn)象亦日益嚴(yán)重[7,8]，給治療帶來困難。

兩性霉素B和5-氟胞嘧啶抗真菌活性較高，但由于這兩種藥物都具有較大不良反應(yīng)，包括腎毒性大和肝功能損傷等，臨床使用應(yīng)謹(jǐn)慎，一般不作首選用藥。伏立康唑?yàn)樾乱淮蝾惪拐婢?，通過競爭性抑制細(xì)胞色素P450依賴的14α-脫甲基酶而阻斷細(xì)胞膜麥角固醇的生物合成，導(dǎo)致細(xì)胞膜的構(gòu)成和功能障礙，從而抑制真菌的生長和繁殖。

本研究對93例女性患者生殖道感染念珠菌標(biāo)本進(jìn)行了菌種培養(yǎng)與鑒定，結(jié)果顯示：江蘇淮安及周邊地區(qū)女性患者的致病菌種主要是白念珠菌(占87.10%)，其次為光滑念珠菌(占8.60%)，其它菌種則少見。此項(xiàng)結(jié)果與國內(nèi)外相關(guān)報道均一致[9-12]。同時本研究還對主要致病菌種進(jìn)行了體外藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明：對白念珠菌敏感率最高的藥物為兩性霉素B和5-氟胞嘧啶，其它依次為伏立康唑、氟康唑及伊曲康唑；對光滑念珠菌敏感率最高的藥物也是兩性霉素B和5-氟胞嘧啶，其它依次是伏立康唑、氟康唑，而伊曲康唑?qū)饣钪榫饔幂^差。由于臨床上致病菌種主要是白念珠菌，因此臨床治療抗真菌藥物可優(yōu)先選用伏立康唑、氟康唑。

及時了解本地區(qū)致病菌種的分布特征及其藥敏特點(diǎn)，合理規(guī)范使用相關(guān)抗菌藥物，既有利于減輕患者負(fù)擔(dān)，又有利于醫(yī)療資源優(yōu)化配置。

本次研究僅收集到8株光滑念珠菌，樣本量尚少，且抗真菌藥物的種類亦偏少，其體外藥敏試驗(yàn)分析還有待進(jìn)一步補(bǔ)充。

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AnalysisofstraindistributionanddrugsensitivitytestofCandidain93femalepatientswithgenitaltractinfection

LIQianhui1,LIHe2,LINTao1,TANGChaogui1,JIANGYuzhang1,JIANGMing2.

1DepartmentofClinicalLaboratory,Huai'anFirstPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Huai'an223300,China; 2DepartmentofDermatology,Huai'anFirstPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Huai'an223300,China

LIHe,E-mail:hellomrlqh@163.com

Objective: To determine characteristics of the strain distribution and drug sensitivity test ofCandidain 93 female patients with genital tract infection.MethodsThe genital tract secretion specimens were collected from 93 female patients. TheCandidaisolates were cultured in Sabouraud dextrose agar. The types ofCandidaisolates were identified by CHRO Magar medium, germ tube test with serum and DL-96 FUNGUS System. The drug sensitivity ofCandidaisolates was detected by DL-96 FUNGUS System.ResultsOut of 91 specimens, 81 strains (87.10%) were identified asCandidaalbicans, 8 (8.60%) asCandidaglabrata, one (1.08%) asCandidadublinstrain, one (1.08%) asCandidatropicalis, one (1.08%) asCandidakruseiand one (1.08%) asCandidakefyrstrain. The drug sensitivity test ofCandidaalbicansshowed that the sensitivity rates of amphotericin B and 5-flucytosine were 100.00%, followed by voriconazole (93.83%), fluconazol (85.19%) and itraconazole (62.96%). The drug sensitivity test ofCandidaglabratashowed that the sensitivity rates of amphotericin B and 5-flucytosine were 100.00%, followed by voriconazole (87.50%), fluconazol (62.50%) and itraconazole (25.00%).ConclusionThe mostCandidaspecies in female genital tract infection isCandidaalbicans. The most sensitive drugs were amphotericin B and 5-flucytosine.

female genital tract;Candidaspecies; drug sensitivity test

1南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇淮安，223300 2南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院皮膚科，江蘇淮安，223300

李鶴，E-mail：hellomrlqh@163.com

(收稿：2017-08-02 修回：2017-09-25)