范小潔

【摘 要】目的：探討母乳及新生兒尿液、血液人巨細(xì)胞病毒DNA檢測在新生兒HCMV感染中的應(yīng)用效果。方法：選取2018年6月-2018年8月在我院接受治療及門診隨訪的新生兒69例，采用PCR熒光定量技術(shù)對其母乳、尿液以及血液中的HCMA含量進(jìn)行檢測。結(jié)果：新生嬰兒母乳陽性率為33.33%，兩者具有顯著差異（P<0.05）。結(jié)論：母乳及新生兒尿液、血液中的人巨細(xì)胞病毒DNA檢測在診斷及預(yù)防新生兒HCMV感染中，取得了比較好的效果，值得在臨床上被進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】巨細(xì)胞病毒；母乳；新生兒尿液；新生兒血液

【中圖分類號】R725 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）20-00-02

作為一種雙鏈DNA病毒，HCMV在人群中的感染率非常高，在我國的感染率已高達(dá)90%以上，其感染沒有任何表現(xiàn)，屬于潛伏感染。作為一種重要的病原微生物，孕期病毒活化及產(chǎn)后母乳排毒，HCMV可以引起患兒圍生期感染，通過胎盤及母乳等傳遞給胎兒及新生兒，最終導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、發(fā)育不良、先天畸形以及后天感染等。我院在對母乳及新生兒尿液、血液人巨細(xì)胞病毒DNA檢測在診斷及預(yù)防新生兒HCMV感染中，使用PCR熒光定量技術(shù)對其含量進(jìn)行檢測，取得了令人滿意的效果，現(xiàn)進(jìn)行如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月-2018年8月在我院接受治療及門診隨訪的新生兒69例。男性患兒26例，女性患兒43例；年齡范圍為5天-8周，平均年齡為30天。所有患兒家屬均知情并同意本研究，一般資料具有可比性（P>0.05），同時經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 采集標(biāo)本 因尿液易于收集，且無創(chuàng)，早產(chǎn)兒及疑似HCMV感染的新生兒2周內(nèi)采集3mL新鮮尿液，同時抽取一定量的靜脈血。用自我擠壓的方法采集2到8周日齡的母乳4-6ml置于干燥的無菌管中，即刻送去檢驗(yàn)[1]。

1.2.2 處理標(biāo)本 取1.5ml尿液置于無菌管中，進(jìn)行離心至少10分鐘，保留底部沉淀物；將乳汁進(jìn)行充分混勻，取1.5ml置于無菌管中，進(jìn)行至少5分鐘的離心，保留底部沉淀物；采用EDTA進(jìn)行抗凝血1.5ml，加入淋巴細(xì)胞使其白細(xì)胞分離出來。分別用試劑盒提取三種標(biāo)本的DNA模板，加入事先準(zhǔn)備好的反應(yīng)體系中的反應(yīng)管內(nèi)[2]。

1.2.3 儀器與試劑 選用美國Perkin Elmer公司7300的全自動熒光定量分析儀；試劑是由中山大學(xué)提供的HCMV核酸定量檢測檢測試劑盒。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察并比較母乳及新生兒尿液、血液中的HCMA的含量及陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用軟件SPSS17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)的分析，其中計數(shù)進(jìn)行（%）檢驗(yàn)，計量進(jìn)行t檢測（）檢驗(yàn)， P<0.05提示有顯著差異。

2 結(jié)果

通過為期2個月的檢查結(jié)果來看，共檢測了69例新生嬰兒。陽性23例，陽性率為33.33%，10*3有8例，10*4有12例，其中有2例發(fā)展為10*5；10*5有3例；將母乳進(jìn)行巴氏消毒后喂養(yǎng)，隨診嬰兒尿液CMVDNA，其中1例達(dá)10*4，其余均為陰性， P<0.05兩者具有顯著差異，具體見表1。

3 討論

近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們的生活水平也在不斷的提高，各種疾病的發(fā)生率也在逐年的增高。人巨細(xì)胞病毒感染作為一種最常見的先天性病毒感染，是導(dǎo)致非遺傳性神經(jīng)性耳聾最常見的原因之一，也是神經(jīng)發(fā)育不良預(yù)后的主要原因，其發(fā)育不良預(yù)后包括腦癱、智力低下、視力損害以及癲癇等。由于孕期的原發(fā)性感染、潛伏感染以及在孕期活化和分娩后的感染，使得總感染率相對較高，且臨床癥狀多樣，容易產(chǎn)生漏診和誤診的現(xiàn)象[3]。人巨細(xì)胞病毒感染后，幾乎能夠侵犯身體內(nèi)的所有器官，成為導(dǎo)致新生兒先天畸形、發(fā)育遲緩的一個最主要的因素。采用PCR熒光定量技術(shù)，能夠在感染早期檢測出來，及時采取措施進(jìn)行有效的治療[4]。

通過研究發(fā)現(xiàn)，新生嬰兒母乳陽性率為33.33%，兩者具有顯著差異（P<0.05）。采用PCR熒光定量技術(shù)對母乳、血液以及尿液中的人巨細(xì)胞病毒DNA進(jìn)行檢測，降低了醫(yī)生的誤診率，維護(hù)了患兒的生命健康，降低了該病毒的感染率。我國的孕產(chǎn)婦血清中的CMV陽性率高，分娩后可經(jīng)乳汁排出CMV病毒，病毒載量高峰期位于分娩后的2-8周，其中4-6周為最高峰，所以采用檢測母乳的CMVDNA來進(jìn)行定量分析。當(dāng)母乳的CMVDNA為10*3時，要定期監(jiān)測；當(dāng)母乳的CMVDNA為10*5時，具有致病性；如果患兒為早產(chǎn)兒，其免疫力相對較差，母乳的CMVDNA為10*4時，即有致病性。在急性感染期間，人巨細(xì)胞病毒最容易侵襲的是腎臟的上皮細(xì)胞，尤其是針對嬰幼兒。當(dāng)HCMV病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞以后，可以跟隨血液到達(dá)全身各個器官。如果在患兒的尿液中檢測到較高濃度的人巨細(xì)胞病毒，說明其正處于活躍期，且在體內(nèi)進(jìn)行大量復(fù)制。

在母乳排毒高峰期對母乳進(jìn)行檢測，陽性者通過簡單的巴氏消毒處理便可以對CMV的傳播進(jìn)行有效的預(yù)防。

綜上所述，采用PCR熒光定量技術(shù)對母乳、血液以及尿液中的人巨細(xì)胞病毒DNA進(jìn)行檢測，提高了人巨細(xì)胞病毒感染的診斷率，減輕了患兒的痛苦，降低了該病毒感染的死亡率，維護(hù)了患兒的生命健康，同時也可以起到提前預(yù)防的作用，值得在臨床上被進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。

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