陰道菌群與CIN、宮頸癌伴HPV感染相關(guān)性的研究

韓華 陳聞月

宮頸癌是婦科常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，發(fā)病率占女性生殖道惡性腫瘤的首位，且近年來(lái)發(fā)病呈年輕化趨勢(shì)，已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宮頸病變過(guò)程中的癌前病變，發(fā)病率也呈逐年上升。目前研究證實(shí)高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是CIN及宮頸癌發(fā)生的必要因素[1]。但并不是所有HPV感染的CIN患者均會(huì)發(fā)生癌變。而陰道菌群作為維護(hù)陰道微環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，其在HPV持續(xù)感染過(guò)程中是否扮演一定的角色一直被人們所關(guān)注。然而，目前并不清楚到底哪些陰道細(xì)菌與CIN及宮頸癌有關(guān)。有研究認(rèn)為滴蟲(chóng)、念珠菌等病原菌自身及其分解產(chǎn)物可通過(guò)破壞陰道上皮、降低宮頸分泌液的黏稠度及免疫球蛋白水平而促進(jìn)宮頸癌變的發(fā)生，同時(shí)也證實(shí)HPV感染與陰道菌群失調(diào)密切相關(guān)[2-3]。但也有研究表明上述病原菌與CIN及宮頸癌的發(fā)生并無(wú)相關(guān)性[4]。鑒于此，本研究擬進(jìn)一步探索陰道菌群與CIN、宮頸癌伴HPV感染的相關(guān)性。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選擇2016年1月至2017年2月在本院就

診體檢發(fā)現(xiàn)的不同宮頸病變的患者153例作為研究對(duì)象，其中CIN 123例，宮頸癌30例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）CIN及宮頸癌均經(jīng)病理學(xué)確診，年齡20～65歲；（2）既往有性生活史；（3）無(wú)其他腫瘤及免疫性疾病等病史；（4）無(wú)糖尿病、冠心病等慢性病病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）月經(jīng)期、妊娠期及哺乳期婦女；（2）既往3d內(nèi)曾有性生活史、婦科檢査、陰道沖洗或陰道內(nèi)用藥者；（3）在本院或外院已經(jīng)全身或局部治療的患者，所有指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果不齊全的患者。根據(jù)HPV DNA檢測(cè)結(jié)果將其分為HPV陽(yáng)性組和HPV陰性組兩組。其中HPV陽(yáng)性組120例（包括CINⅠ級(jí)30例、CINⅡ級(jí)30例、CINⅢ級(jí)30例，宮頸癌30例），平均年齡（46.3±7.2）歲；孕 1～2次者 97例，孕次＞3次者23例。HPV陰性組33例（包括CINⅠ級(jí)14例、CINⅡ級(jí)10例、CINⅢ級(jí)9例），平均年齡（45.6±6.8）歲；孕1～2次者25例，孕次＞3次者8例。兩組患者年齡、孕次比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

1.2 方法 在初診時(shí)取陰道分泌物、宮頸分泌物及脫落細(xì)胞、宮頸組織標(biāo)本，采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測(cè)HPV DNA，懸滴濕片法檢測(cè)滴蟲(chóng)，革蘭染色檢測(cè)念珠菌、淋球菌、乳酸桿菌。采用培養(yǎng)法進(jìn)行支原體屬及衣原體屬鑒定，培養(yǎng)基為珠海迪爾生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者陰道菌群構(gòu)成情況比較 HPV陽(yáng)性組乳酸桿菌陰性率、念珠菌及衣原體感染率均高于HPV陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。HPV陰性組未檢測(cè)出滴蟲(chóng)及淋球菌，而HPV陽(yáng)性組兩者感染率分別為7.5%和1.7%。兩組滴蟲(chóng)、淋球菌及支原體感染率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者陰道菌群構(gòu)成情況比較[例（%）]

2.2 HPV陽(yáng)性組HPV感染情況 HPV單一感染率隨宮頸病變的嚴(yán)重程度呈上升趨勢(shì)，而多重感染率呈下降趨勢(shì)（均P＜0.05）。同時(shí)，HPV感染亞型中以HPV16型占比最高，且隨宮頸病變的嚴(yán)重程度感染率呈上升趨勢(shì)（P＜0.05），見(jiàn)表 2。

表2 HPV陽(yáng)性組HPV感染情況[例（%）]

2.3 HPV陽(yáng)性組陰道菌群構(gòu)成情況 乳酸桿菌陰性率、衣原體感染率隨著宮頸病變的嚴(yán)重程度均呈上升趨勢(shì)（均P＜0.05）。不同宮頸病變組滴蟲(chóng)、淋球菌、念珠菌及支原體感染率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表 3。

表3 HPV陽(yáng)性組陰道菌群構(gòu)成情況[例（%）]

3 討論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，其病理生理進(jìn)程是由癌前病變逐漸演化成癌癥的過(guò)程。其中，CIN是其主要的癌前病變表現(xiàn)。據(jù)既往大量研究證實(shí)，HPV感染是CIN及宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素[1,5]。然而，由于女性陰道微環(huán)境具有自我清潔感染的能力，并不是只要感染HPV就會(huì)進(jìn)展成癌癥，僅約5%～10%的患者會(huì)存在持續(xù)的HPV感染，最終成為罹患宮頸癌的高危人群[6]。陰道菌群是維護(hù)女性陰道微環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，其間不同種類及數(shù)量的微生物與陰道局部環(huán)境及機(jī)體相互制約、互相協(xié)調(diào)，共同抵制外來(lái)微生物的侵犯、黏附及繁殖。而一旦上述平衡被破壞，則會(huì)增加宿主感染HPV的風(fēng)險(xiǎn)。因此，進(jìn)一步研究陰道菌群與CIN、宮頸癌伴HPV感染的相關(guān)性可能會(huì)為臨床防治宮頸癌提供更多的理論依據(jù)。

本研究顯示HPV陽(yáng)性組乳酸桿菌陰性率顯著高于HPV陰性組，且乳酸桿菌陰性率隨著宮頸病變的嚴(yán)重程度呈上升趨勢(shì)。眾所周知，正常情況下女性陰道局部?jī)?yōu)勢(shì)菌群為乳酸桿菌。其一方面定植于陰道黏膜上皮而對(duì)其他微生物形成空間占位效應(yīng)，同時(shí)可分泌大量細(xì)胞外多聚糖、細(xì)胞壁肽聚糖，形成生物被膜，從而達(dá)到保護(hù)機(jī)體免遭病原體入侵的作用；另一方面，其不僅可直接刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)分泌多種免疫因子以增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答效率，而且可通過(guò)乳酸、H2O2、細(xì)菌素、生物表面活性物質(zhì)及細(xì)菌素樣物質(zhì)等多種代謝產(chǎn)物直接抑制外來(lái)致病菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到維持陰道局部穩(wěn)態(tài)的作用[7-8]。研究也證實(shí)乳酸桿菌能顯著抑制宮頸癌小鼠瘤體的生長(zhǎng)[9]。本研究顯示HPV陽(yáng)性組念珠菌及衣原體感染率也顯著高于HPV陰性組，且感染率隨著宮頸病變的嚴(yán)重程度呈上升趨勢(shì)；但兩組滴蟲(chóng)及淋球菌感染率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。然而，既往有研究認(rèn)為滴蟲(chóng)的感染能大大增加HPV感染和宮頸癌發(fā)生率[10]，與本研究結(jié)果完全不同。分析導(dǎo)致這一差異的原因可能是滴蟲(chóng)與宮頸病變發(fā)生無(wú)關(guān)，也可能與人種差異有關(guān)。新近一項(xiàng)回顧性研究發(fā)現(xiàn)成年女性陰道毛滴蟲(chóng)的感染率仍高達(dá)7.37%，其可延長(zhǎng)HPV感染的持續(xù)時(shí)間，與職業(yè)、衛(wèi)生知識(shí)和潔陰習(xí)慣等密切相關(guān)[11]。這提示，盡管目前對(duì)于HPV感染與滴蟲(chóng)感染的相關(guān)性存在爭(zhēng)議，但仍需重視。

綜上所述，HPV感染可導(dǎo)致陰道局部乳酸桿菌減少，其正常生理作用喪失，從而使得陰道局部微生物平衡破壞，菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂，后者又進(jìn)一步增加機(jī)體易感染HPV的風(fēng)險(xiǎn)，形成惡性循環(huán)，最終促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生。

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