舌下含服特異性免疫治療對變應性鼻炎患兒IL-10和IL-13表達水平的影響

呂淵，葉棟，章菊琴，張秀強

變應性鼻炎（AR）兒童的患病率在逐年升高，如不及早干預，會愈加嚴重乃至轉變?yōu)檫^敏性哮喘。當前，舌下含服特異性免疫治療（SLIT）逐漸成為AR的重要治療方式[1]。目前特異性免疫治療的療效評估主要通過主觀指標，缺少客觀指標。嗜酸性粒細胞、sIgG4及sIgE等表達水平與免疫治療療效之間關系的研究已有諸多文獻報道[2-4]，而與過敏反應密切相關的細胞因子與免疫治療療效之間關系的研究卻極少。有研究發(fā)現(xiàn)，IL-4、TGF-、IL-10、IL-13及 IFN-等細胞因子與免疫治療機制密切相關[5-7]。本研究采用標準化的粉塵螨滴劑治療AR患兒84例，完成治療療程后對AR患兒進行療效評估，觀察治療前后血清中IL-10和 IL-13表達水平的變化?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集 2014年 2月至2015年4月寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院收治的AR兒童84例，均符合2015年AR診斷和治療指南中的診療標準[1]?；純涸谥委熐斑M行過敏原檢測試驗，檢測結果要求粉塵螨陽性（皮膚點刺需要2＋以上，或血檢特異性IgE水平在2級或2級以上），臨床癥狀病史與過敏原塵螨存在著密切的相關性。排除：（1）合并未控制的哮喘（哮喘處于急性發(fā)作期）；（2）合并有鼻竇炎、鼻息肉和鼻中隔偏曲；（3）患有自身免疫學疾病、精神類疾病、惡性腫瘤、心血管疾病及肺結核活動期。按治療方法不同分為SLIT組和對照組，各42例。SLIT組男20例，女22例；年齡6～14歲，平均（9.0±0.5）歲。對照組男21例，女21例；年齡6～13歲，平均（8.0±0.5）歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學意義。

1.2 方法 SLIT組采用標準化粉塵螨滴劑（浙江我武生物科技有限公司，S20060012，暢迪）對過敏患兒進行2年的治療，粉塵螨滴劑共有5個規(guī)格，粉塵螨滴劑1號（1 g/ml）、粉塵螨滴劑2號（10 g/ml）、粉塵螨滴劑 3 號（100 g/ml）、粉塵螨滴劑4號（333 g/ml）及粉塵螨滴劑5號（1 000 g/ml）。整個SLIT治療分為兩個治療階段，即遞增階段和維持階段。遞增階段：第1周使用1號，第2周使用2號，第3周使用3號，每周的1～ 7 d，分別使用 1滴、2滴、3滴、4滴、6滴、8滴和10滴。維持階段（第4周開始）：使用4號維持治療，每天1次，每次3滴，后面的治療一直使用4號維持，如果個別患兒耐受良好，可以根據(jù)個體化的原則嘗試使用5號（每天1次，每次2滴）。前3周需要配合對癥藥物，如抗組胺類藥物和鼻用激素類藥物，后3周如果癥狀加重也需要配合對癥藥物。治療過程如果出現(xiàn)不耐受的情況，需要進行個體化減量。對照組單純使用對癥藥物如組胺類和鼻用激素類藥物治療。整個治療過程獲得院倫理委員會的批準，且簽訂知情同意書（與患兒監(jiān)護人）。

1.3 觀察指標 根據(jù)就診隨訪記錄進行鼻部癥狀改善和對癥藥物使用的打分，分別于治療前、治療6個月、1年和2年時進行評估。鼻炎癥狀評分標準根據(jù)文獻[8]對噴嚏、流涕、鼻塞和鼻癢分別進行評估，并進行打分，4者的分數(shù)之和為總鼻部癥狀評分（TNSS）。對癥用藥評分標準根據(jù)文獻[9]，口服孟魯司特鈉為1分，口服氯雷他定記為1分，使用丙酸氟替卡松鼻噴霧劑為2分，所有相加為用藥評分（TMS）。

1.4 ELISA檢測細胞因子表達水平應用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中 IL-10和IL-13的表達水平，分別于治療前、治療6個月、治療1年和治療2年后檢測。試劑盒均購自南京森貝伽生物科技有限公司，使用美國寶特ELX-808酶標儀完成。

1.5 統(tǒng)計方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，采用t檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組TNSS評分比較 SLIT組及對照組治療1年、2年時與治療前TNSS評分差異均有統(tǒng)計學意義（t≥2.19，均P＜0.05），兩組治療1年、2年時TNSS評分差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組TMS評分比較 SLIT組及對照組治療1年、2年時與治療前TMS評分差異均有統(tǒng)計學意義（t≥5.30，均P＜0.05），兩組治療1年、2年時TMS評分差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。見表2。

2.3 細胞因子表達水平的變化 與治療前相比，治療1年后，SLIT組的IL-10水平顯著上升，IL-13水平顯著下降（t≥6.32，均P＜0.05）。兩組治療1年后IL-10及IL-13差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。見表3。

2.4 相關性分析 治療前及治療2年后IL-10水平與TNSS評分均呈負相關（r=－ 0.26、－ 0.47，均 P＜ 0.05），IL-13水平與TNSS評分均呈正相關（r=0.64、0.72，均P＜0.05）；而治療1年后IL-10及IL-13水平與TNSS評分不存在相關性（均P＞0.05）。

3 討論

SLIT的療效已在大量的臨床試驗和Meta分析中得到證實[10]。目前，國內(nèi)外主要通過主觀癥狀評分進行脫敏療效的評估，即TNSS評分、TMS評分、VAS評分和生活質(zhì)量評估等?？陀^指標在臨床上的應用極少，主要是由于目前臨床上通過實驗室客觀指標來評估脫敏療效還處于實驗室研究階段，除了有報道sIgG4、IgE等抗體分子及炎性細胞（如嗜酸性粒細胞）的表達水平變化與免疫治療療效之間可能存在關系外，對于細胞因子水平與免疫療效之間可能存在的關系研究較少。Th2細胞通過產(chǎn)生細胞因子IL-4、IL-5及IL-13在變態(tài)反應疾病中發(fā)揮重要作用[11]。而IL-13參與IgE介導的過敏反應的調(diào)節(jié)，與IgM/G到IgE的轉換密切相關。在外周血單核細胞中可以檢測出產(chǎn)生IL-13的免疫細胞花粉季節(jié)過敏性疾病后患者體內(nèi)的IL-13表達水平會增加[12]。同時研究發(fā)現(xiàn)在過敏鼻炎患者的鼻黏膜和支氣管肺泡灌洗液中可檢測到IL-13的存在[13]。IL-10由T調(diào)節(jié)細胞產(chǎn)生，具有免疫抑制的作用，能夠抑制炎性反應的發(fā)生，體內(nèi)IL-10表達的下調(diào)，會導致人體的過敏性疾病產(chǎn)生[14]。Marek 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過屋塵螨變應原活性蛋白特異性免疫治療后，屋塵螨過敏患者外周血單核細胞中 IL-10的表達水平增加。

表1 兩組TNSS評分比較 分

表2 兩組TMS評分比較 分

表3 兩組治療前后血清IL-10及IL-13水平的比較 ng/L

本研究結果顯示，免疫治療1年，IL-10的水平較治療前有明顯上調(diào)，且和TNSS評分呈負相關；這表明IL-10可能參與了免疫調(diào)節(jié)機制及抑制過敏性炎癥的作用。IL-13的表達水平在免疫治療2年后，表達水平降低，且與TNSS評分呈正相關；這說明在IL-13參與的IgE介導的過敏反應調(diào)節(jié)中，免疫治療可能對IL-13的表達水平產(chǎn)生了影響。

綜上所述，舌下免疫治療對AR患兒有效。此外，本研究證實IL-10及IL-13表達水平與療效改善情況存在一定的相關性，但仍需要大量的臨床數(shù)據(jù)及更長期的隨訪評估支持。

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