王紅瑋，于文熙，于永峰，于海平，林思敏

（深圳博美醫(yī)療美容門診部，廣東 深圳，518013）

隨著生活水平的提高，面部年輕化已受到廣大愛美人士的最愛，素顏呈現的自然美，當初大家都在打肉毒素來去除額頭皺紋、魚尾紋，但是注射后，會出現短時間的表情不自然。如今富血小板血漿容已得到歐洲CE認證、ISO、SQS及其他地區(qū)的廣泛醫(yī)學臨床驗證，僅需一次治療就可對整個皮膚結構進行全面修復和重新組合，全面提升肌膚狀態(tài)，延緩衰老，加上其操作步驟相對簡單，因此PRP 美容技術將逐步代替其他美容除皺技術作為新一代美容方式。

我院從2016年4月至2018年2月，治療患者62例，采取血小板激活后，富血小板血漿注射對美膚除皺的效果很好，其中38例為面部年輕化，美膚除皺，效果滿意。25例加在自體脂肪移植中，可以促進自體脂肪細胞的成活，也獲得了滿意的效果，總結如下：

1 資料與方法

1.1 臨床資料

已經檢測比較血小板激活前后自體血漿不同成分的含量：血小板衍生生長因子（PDGF-AB)、表皮生長因子（EGF)、類胰島素生長因子（IGF)及膠原的產量等[1]。（圖1）血小板激活自體血漿準備流程；（圖2）血小板激活自體血漿成分的含量變化；（圖3）前期血小板激活自體血漿注射前后皮膚變化個案

本組62例患者來自我院美容外科，均為女性，年齡35-56歲。其中38例為面部年輕化，美膚除皺。25例加在自體脂肪移植中，使脂肪細胞成活率大大增加[2]。

1.2 方法

1.2.1 術前準備 詢問病史 行血常規(guī)、凝血四項、血糖、術前傳染病五項等檢查，與患者溝通與簽字拍照。1.2.2說明本項目擬采取的方法、技術路線以及工藝流程：

（1）抽取靜脈血5-10ml注入無菌真空抗凝管內(2管),輕輕倒轉試管混合4－5次。如不馬上處理,放置于4度冰箱, 不超過30小時。

（2）離心抗凝管內的血液7分鐘，3000g。

（3）離心后血液分成以下4層[3]：頂層為PPP（少含血小板）;；2層為PRP（濃縮血小板）；3層為MNC；底層為RBC (如圖)，有些樣本不明顯分層，則取上1/3層為PPP；中1/3層為PRP（濃縮血小板）；下1/3層為MNC。

（4）用無菌注射器把2層的PRP抽吸出來,各轉到5ml小管內(2管)。

（5）把5ml小管放置于-20度冰箱內30分鐘(或者干冰上5min)后,取出放在室溫融化。加入血小板活化劑pre-mixed solution：用0.5ml /1ml無菌注射器抽吸出血小板活化劑；每0.1ml的血小板活化劑加入到1mlPRP；輕輕倒轉試管混合3-4次,室溫靜置15分鐘[4]。

（6）離心5ml小管200g,3分鐘；無菌注射器抽吸出的較粘稠液體，此為活化血小板(A-PRP)，底部如有沉淀物，丟棄不用；如不馬上應用;可-20度凍存活化血小板(A-PRP)備用。

圖1 血小板激活自體血漿準備流程

圖2 血小板激活自體血漿成分的含量變化

1.2.3 （A-PRP）注射方法 本組病例22人通過水光槍將A-PRP 皮下注射；16人通過1ml注射器31G針頭將A-PRP皮下注射、25人將A-PRP加入提純后的自體脂肪中并充分混勻[5]。

2 結 果

本組本組病例22人通過水光槍注射皮下3次注射后，19人效果滿意，3人效果不太明顯，16人通過1mm注射器31G針頭注射，13人效果比較滿意，3人治療后出現紅色丘疹，25人注入提純好的自體脂肪中，治療部分為額部、顳部、頰部，頦部。治療兩次后，自體脂肪成活率很高，面部的輪廓改善滿意。提供的成果形式為活化前后的PRP生物成品，并進行臨床實驗。約20-30天后顧客的皺紋將逐漸消失，重拾彈性健康，皮膚平滑緊致的年輕狀態(tài)[6]

2.1 典型病例

2.1.1 患者，女45歲，眼尾皺紋明顯，按上法提取PRP注射，采用點狀注射，每側注射量為1ML,注射一個月后，效果滿意，見圖3。

圖3 典型案例1，左側為術前，右側為術后一個月

2.1.2 患者，女，47歲，由于遺傳及常期上夜班，休息不好的原因，上瞼脂肪缺失比較明顯，會顯得人比較衰老。查體：上瞼皮膚松馳、上瞼脂肪缺失、頦部輕度后傾。手術過程，在右側大腿外側，選擇腫脹液（0.9%生理鹽水500ML、利多卡因5ML、鹽酸腎上腺素0.5ML、碳酸氫鈉6.5ML）局部麻醉,抽取脂肪及腫脹液一起10ML，經離心處理后，提取脂肪顆粒3ML，加入處理好的PRP2ML。進入充分混合后，沿眉骨下緣緩緩注射，一只手注射，一只手找平整度，術后即時效果滿意，觀察術后三個月效果，患者自覺滿意，見圖4。

3 討 論

圖4 左側為手術前，中間為手術后即刻，右側為術后一個月

本研究主要觀察了血小板激活后富血小板血漿注射對美膚除皺的效果。富血小板血漿是通過密度梯度離心法從全血中分離出來的自體材料，含有大量血小板的無活性物質，但是，當活化因子活化血小板時，所述血小板會釋放生長因子，促進傷口的愈合[7]。本研究主要技術手段為抽取靜脈血注入無菌真空抗凝管內進行離心，并取第2層的富血小板血漿（platelet Rich plasma, PRP）作為研究對象。取一部分的PRP分別加入血小板活化劑，以探討血小板活化前后對皺紋的影響。技術指標主要包括檢測活化前后血漿內生長因子的活性和注射后患者的皮膚狀況[8]。

富血小板血漿（PRP)是通過密度梯度離心法從全血中分離出來的自體材料（autologous material)特征，是相對于少量的血漿濃縮含有大量血小板的無活性物質，并且含有高濃度的白細胞。通過血管中含有的物質活化富血小板血漿（PRP)中的血小板，然后釋放生長因子（growth factor)和各種活性物質（active substance)。當活化因子活化血小板時，所述血小板由于其α顆粒（alpha granules)的脫顆粒作用（degranulation)而釋放生長因子（growth factor)[9]。所述因子在傷口愈合（wound healing)初期扮演著重要角色。在此，釋放的生長因子（growth factor)包括血小板衍生生長因子（PDGF-AB)、轉化生長因子-bl(TGF-bl)、血管內皮生長因子（VEGF)、表皮生長因子（EGF)、類胰島素生長因子（IGF)等。而且，在體外條件下，富血小板血漿（PRP)釋放細胞因子等，由此合成成纖維細胞的DNA[10]。這增加了膠原的產量，從而促使形成膠原結構。我們通過比較添加血小板激活劑后富血小板血漿注射對除皺的效果。還有，把PRP加入自體脂肪移植手術中，增加自體脂肪細胞的成活率，也收到了滿意的效果。

重點解決的技術關鍵問題為PRP的提取和活化，提取活化過程將在標準無菌百級實驗室進行，由生物技術專業(yè)人員采用專有技術對PRP的提取和活化操作。技術指標主要包括檢測活化前后血漿內生長因子的活性和注射后患者的皮膚狀況。

參 考 文 獻

[1]袁霆, 張長青, 李四波,等. 自體富血小板血漿與難愈合傷口的修復[J]. 中華整形外科雜志, 2006, 22(5)：391-393.

[2]黎洪棉, 柳大烈, 吳濤,等. 早期應用富血小板血漿凝膠對自體脂肪組織移植存活率的影響[J]. 中國組織工程研究,2011, 15(31)：5751-5755.

[3]李秋濤. 自體高濃度血小板血漿(PRP)面頸部皮膚抗衰老臨床觀察[J]. 中華醫(yī)學實踐雜志, 2011.

[4]程飚, 劉宏偉, 唐建兵,等. 自體富血小板血漿促進美容外科傷口愈合的臨床觀察[J]. 中國輸血雜志, 2011,24(4)：282-284.

[5]王悅, 朱喆, 成榮杰,等. 富血小板血漿對人真皮細胞增殖及PDGF、TGF-β和VEGF表達的影響[J]. 實用口腔醫(yī)學雜志,2012, 28(1)：64-69.

[6]Man D, Plosker H, Winland-Brown J E. The use of autologous platelet-rich plasma (platelet gel)and autologous platelet-poor plasma (fibrin glue)in cosmetic surgery.[J]. Plastic & Reconstructive Surgery, 2001, 107(1)：239-0.

[7]Eppley B L, Woodell J E, Higgins J. Platelet quantification and growth factor analysis from platelet-rich plasma： implications for wound healing[J]. Plastic & Reconstructive Surgery, 2004,114(6)：1502-1508.

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[9]Eppley B L, Pietrzak W S, Blanton M. Platelet-rich plasma： a review of biology and applications in plastic surgery[J]. Plastic & Reconstructive Surgery,2006, 118(6)：147e.

[10]Kanno T, Takahashi T, Tsujisawa T, et al. Plateletrich plasma enhances human osteoblast-like cell proliferation and differentiation[J]. J Oral Maxillofac Surg, 2005, 63(3)：362-369.