穆 青，陳亞淑，謝筆鈞，楊季芳，陳吉?jiǎng)?，孫智達(dá),*

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.浙江萬里學(xué)院生物與環(huán)境學(xué)院，浙江 寧波 315100）

類胡蘿卜素具有獨(dú)特的多支鏈段和共軛雙鍵，是天然色素中最重要的化合物之一。目前自然界發(fā)現(xiàn)的天然類胡蘿卜素已有700多種，在生物圈如植物、動(dòng)物和微生物中都具有廣泛的分布[1]。由于類胡蘿卜素在光化學(xué)反應(yīng)中起到重要的作用，被認(rèn)定是光保護(hù)色素。同時(shí)，類胡蘿卜素也是重要的VA前體，而VA是人體必需的微量營(yíng)養(yǎng)素且不能被人體自身合成，只能靠從外界攝入獲得[2]。因?yàn)轭惡}卜素特殊的富含電子的長(zhǎng)多烯碳鏈結(jié)構(gòu)，其具有淬滅單線態(tài)氧、清除自由基的重要生理活性[3]，在抗氧化、抗癌、預(yù)防白內(nèi)障、保護(hù)視網(wǎng)膜細(xì)胞等方面有較廣闊的應(yīng)用前景，越來越多的被應(yīng)用于食品和藥物[4-6]。此外，一些微生物在特定的條件下能夠合成類異戊二烯化合物作為次級(jí)代謝產(chǎn)物[7-8]，通過微生物生產(chǎn)復(fù)雜的類胡蘿卜素和類異戊二烯醌這種經(jīng)濟(jì)環(huán)保的方式，使其代謝產(chǎn)物在醫(yī)學(xué)和食品化學(xué)領(lǐng)域得到進(jìn)一步研究[9-13]。

細(xì)菌中的類異戊二烯醌類主要是甲基萘醌和泛醌[14]。其中，甲基萘醌又稱VK2，其結(jié)構(gòu)是由一個(gè)2-甲基-1,4-萘醌母環(huán)和母環(huán)C3位置連結(jié)不同數(shù)目的異戊二烯側(cè)鏈組成。VK2屬于凝血類維生素，因其在食品中微量存在，所以又有“鉑金維生素”之稱[15]。研究發(fā)現(xiàn)，VK2不僅有易于被人體吸收利用、生物活性強(qiáng)、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，而且能夠增加骨密度，預(yù)防骨質(zhì)疏松[16]、血管鈣化[17]、肝癌及肝硬化[18]、老年癡呆等。傳統(tǒng)的VK2一般采用化學(xué)法合成，具有產(chǎn)率低、產(chǎn)物活性低、副產(chǎn)物多等許多不足，而活性高的VK2僅能通過微生物發(fā)酵法制得[19-21]。因此，細(xì)菌產(chǎn)生的類異戊二烯醌類化合物具有廣闊的應(yīng)用前景。

根據(jù)本課題組研究成果顯示，在優(yōu)化從北極海洋紅球菌B7740中提取類胡蘿卜素的同時(shí)，發(fā)現(xiàn)并鑒定出其能產(chǎn)生大量的甲基萘醌-8（menaquinone-8，MK-8）[22]。研究表明，植物源的類胡蘿卜素具有優(yōu)異的抗氧化、抗增殖活性，但微生物紅球菌B7740產(chǎn)類胡蘿卜素和類異戊二烯醌的抗氧化活性目前還鮮見報(bào)道。因此，在本研究中，通過抗漂白能力、脂質(zhì)氧化抑制能力和抗生物大分子（DNA、蛋白質(zhì)）過氧化等方法測(cè)定紅球菌產(chǎn)物B7CIQE（含類胡蘿卜素、MK-8）的抗氧化活性。研究結(jié)果將有助于進(jìn)一步探索其對(duì)癌癥、心血管疾病的預(yù)防作用。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

北極海洋紅球菌（Rhodococcus sp. B7740）凍干菌粉由浙江萬里學(xué)院提供；花生油 山東魯花集團(tuán)有限公司；醋酸鋅、甲醇、二氯甲烷、氫氧化鉀、過硫酸鉀、鐵氰化鉀、2,4-二硝基苯肼（2,4-dinitrophenyl hydrazine，DNPH）、無水硫酸鈉、三氯乙酸、牛血清白蛋白、偶氮二異丁基脒鹽酸鹽、2,2’-偶氮（2-甲基丙基脒）（2,2’-azobis(isobutyronitrile)，ABAP）、磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）（pH 7.4）、瓊脂糖、四氫呋喃、硫酸亞鐵、溴化乙錠、雙氧水、鹽酸、pBR322質(zhì)粒、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（2,6-di-tertbutyl-4-methylphenol，BHT） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；溶菌酶（20 000 U/mg）、β-胡蘿卜素、葉黃素、番茄紅素（lycopene，Lyc）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG） 上海源葉有限公司；甲醇（色譜純） 賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；甲基叔丁基醚（色譜純） 上海阿拉丁生化科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

WH-3微型渦漩混合儀 上海滬西分析儀器有限公司；EL-104電子天平 梅勒特-托利多儀器（上海）有限公司；DK-98-II A型電熱恒溫水浴鍋 天津市泰斯特儀器有限公司；UV-1800紫外-可見分光光度計(jì) 日本Shimadzu公司；5810R臺(tái)式低溫離心機(jī)德國(guó)Eppendorf公司；RE-3000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；DSC204F1型差示掃描量熱（differential scanning calorimetry，DSC）儀 耐馳儀器上海有限公司；Multiskan? GO 全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀 賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；DYY6C型電泳儀 北京市六一儀器廠；0.22 μm有機(jī)濾膜、進(jìn)樣瓶 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.3 方法

1.3.1 類胡蘿卜素及類異戊二烯醌的提取

提取方法參考陳亞淑等[22]所作的描述。北極海洋紅球菌B7740經(jīng)由酶法破壁，甲醇和二氯甲烷混合溶劑提取得到B7CIQE，測(cè)定其提取量，再將提取液經(jīng)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后，充入氮?dú)夥饪诒４妗Ｆ湓?50 nm波長(zhǎng)處有3 個(gè)吸收峰，確定B7CIQE為類胡蘿卜素，其中經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用鑒定出2 種甲基萘醌類類胡蘿卜素，MK-8（H2）和MK-8（H4）。B7CIQE的質(zhì)量（m）根據(jù)公式（1）計(jì)算。

式中：A450nm代表提取液在450 nm波長(zhǎng)處的吸光度；V代表提取液的體積/mL；F代表測(cè)定時(shí)稀釋的倍數(shù)。

1.3.2 β-胡蘿卜素抗漂白能力

本實(shí)驗(yàn)參照Kuzina等[23]的方法。具體步驟如下，β-胡蘿卜素以0.2 mg/mL的質(zhì)量濃度溶解于二氯甲烷中，取該溶液2 mL，與20 μL亞油酸、20 μL吐溫20混合后轉(zhuǎn)移至平底燒瓶中，并于40 ℃負(fù)壓懸蒸10 min。隨后向平底燒瓶中加入100 mL的去離子水。平均取5 mL溶液分裝于試管中，分別加入溶解于二氯甲烷的0.2 mL不同質(zhì)量濃度的B7CIQE和陽性對(duì)照（BHT、Lyc、EGCG）溶液，并設(shè)空白（不加樣品，其余條件相同）對(duì)照，放置于50 ℃水浴，每隔15 min測(cè)一次470 nm波長(zhǎng)處的吸光度，直到β-胡蘿卜素溶液顏色褪去。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，取平均值。β-胡蘿卜素抗氧化抑制率根據(jù)公式（2）計(jì)算。

式中：AA代表氧化抑制率/%；A0代表樣品組初始吸光度；At代表時(shí)間t時(shí)樣品組的吸光度；A00代表空白組初始吸光度；A0

教師A在反思日志中提到了自己反思內(nèi)容的困惑，教師A想要解決這些問題，但是由于各方面原因影響整體解決效果。

t代表空白組時(shí)間t時(shí)的吸光度。

1.3.3 脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性

本實(shí)驗(yàn)采用DSC進(jìn)行脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性的測(cè)定[24]。實(shí)驗(yàn)在氮?dú)猓?0 mL/min）與氧氣（20 mL/min）的條件下進(jìn)行，溫度范圍308.2～573.2 K（35～300 ℃），升溫速率為10.0 K/min。B7CIQE和植物來源類胡蘿卜素用花生油配成58 μg/mL的溶液。將分散好的溶液進(jìn)行壓片，然后進(jìn)行DSC測(cè)定。

1.3.4 類胡蘿卜素對(duì)蛋白質(zhì)氧化的抑制作用

本實(shí)驗(yàn)參照Cao[25]、Tian[26]等的方法。具體步驟如下，將100 μL類胡蘿卜素（分散在四氫呋喃中的不同濃度B7CIQE和植物來源類胡蘿卜素）與500 μL牛血清白蛋白（1 mg/mL）、200 μL FeSO4（5 mmol/L）、200 μL H2O2（80 mmol/L）在37 ℃下孵育0.5 h。反應(yīng)結(jié)束后加入100 μL過氧化氫酶（0.5 mg/mL、3 000 U）終止反應(yīng)。之后加入3 mL DNPH溶液，并在室溫下于暗室孵育1 h，且每10 min進(jìn)行一次渦漩。反應(yīng)結(jié)束后加入800 μL 10%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同）的三氯乙酸溶液來沉淀蛋白質(zhì)，并將溶液在12 000 r/min、4 ℃條件下離心15 min。沉淀用體積比1∶1的乙醇和乙酸乙酯洗滌3 次，最后將沉淀物充分溶解在1 mL的鹽酸胍中。溶液的吸光度在370 nm波長(zhǎng)處測(cè)定。蛋白質(zhì)氧化抑制率根據(jù)公式（3）計(jì)算。式中：A對(duì)照代表對(duì)照組的吸光度；A空白代表空白組的吸光度；A樣品代表樣品組的吸光度。

1.3.5 DNA鏈斷裂保護(hù)實(shí)驗(yàn)

本實(shí)驗(yàn)參照J(rèn)ung等[27]的方法。取10 μL pBR322（10 ng/μL）與10 μL 2,2-偶氮二（2-甲基丙基咪）二鹽酸鹽（2,2’-azobis-2-methyl-propanimidamide,dihydrochloride，AAPH）（10 mmol/L）溶解在PBS中，在37 ℃條件下孵育1 h。取5 μL B7CIQE與植物來源的類胡蘿卜素在二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）中進(jìn)行孵育。孵育結(jié)束后，取9 μL混合液，加入1 μL 10 倍十二烷基硫酸鈉DNA上樣液，然后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。各泳道加樣情況為：泳道1只添加pBR322溶液；泳道2添加pBR322和AAPH溶液；泳道3～8全部添加pBR322和AAPH溶液，并分別添加50～100 μg/mL B7CIQE溶液；泳道9～17全部添加pBR322和AAPH溶液，并分別添加50、75、100 μg/mL番茄紅素、β-胡蘿卜素、葉黃素溶液。凝膠最后用溴化乙錠染色，并在透射條件下進(jìn)行觀察。

1.3.6 細(xì)胞培養(yǎng)

人肝癌細(xì)胞HepG2培養(yǎng)所用完全培養(yǎng)基為90%高糖培養(yǎng)基、10%的小牛血清、約1%的青霉素-鏈霉素，人口腔癌細(xì)胞KB所用完全培養(yǎng)基為90%高糖培養(yǎng)基、10%的胎牛血清、約1%的青霉素-鏈霉素。樣品和陽性對(duì)照全部溶解在含有0.1% DMSO的培養(yǎng)基中。

1.3.7 細(xì)胞內(nèi)抗氧化實(shí)驗(yàn)

紅球菌所產(chǎn)B7CIQE的細(xì)胞內(nèi)抗氧化實(shí)驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)[28]所作描述，并略作一些調(diào)整。取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞，用培養(yǎng)其所用的完全培養(yǎng)基稀釋至6×105個(gè)/mL，每孔100 μL，轉(zhuǎn)移至96 孔板；經(jīng)過37 ℃、5% CO2、24 h培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁以后，去掉培養(yǎng)基，并用100 μL的PBS洗每孔的細(xì)胞。接下來每孔加入不同質(zhì)量濃度的樣品處理液和對(duì)照組，其中均含有25 μmol/L的2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽，同樣培養(yǎng)條件，繼續(xù)培養(yǎng)1 h，吸去全部液體，用100 μL的PBS分為清洗或者不清洗2 種處理方式，加入100 μL的含600 μmol/L ABAP的PBS以及對(duì)照組100 μL空白PBS，隨后將96 孔板放入熒光酶標(biāo)儀，對(duì)其在37 ℃下進(jìn)行掃描，測(cè)定條件為激發(fā)波長(zhǎng)538 nm，發(fā)射波長(zhǎng)485 nm，每5 min測(cè)試一次，持續(xù)1 h。細(xì)胞抗氧化活性根據(jù)公式（4）計(jì)算?？寡趸钚詮?qiáng)弱通過半最大效應(yīng)濃度（half maximal effective concentration，EC50）進(jìn)行比較。

式中：∫SA表示不同質(zhì)量濃度的樣品處理液時(shí)間-光密度曲線下的積分面積；∫CA表示時(shí)間-對(duì)照光密度曲線下的積分面積。

1.3.8 細(xì)胞毒性與抗癌細(xì)胞增殖活性測(cè)定

該實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[29-30]并略微調(diào)整。人口腔癌細(xì)胞KB和人肝癌細(xì)胞HepG2分別用完全培養(yǎng)基稀釋至0.6×105個(gè)/mL和 1×105個(gè)/mL，每孔100 μL，轉(zhuǎn)移至96 孔板。經(jīng)過37 ℃、5% CO2、12 h培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁以后，去掉上層培養(yǎng)基，每孔加入100 μL不同質(zhì)量濃度的樣品處理液，對(duì)照組為完全培養(yǎng)基。同樣培養(yǎng)條件下，繼續(xù)培養(yǎng)24 h，使用PBS清洗每孔，使用噻唑藍(lán)法測(cè)其剩余活細(xì)胞數(shù)量，計(jì)算得其細(xì)胞毒性。光密度在490 nm波長(zhǎng)處測(cè)定，每組做5 個(gè)復(fù)孔，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用SPSS軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和方差分析，并用Origin 8軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗漂白能力

圖1 β-胡蘿卜素氧化抑制率Fig. 1 Inhibition rates of β-carotene by B7CIQE and positive controls

從圖1可以看出，B7CIQE的抗漂白能力在實(shí)驗(yàn)的4 種抗氧化劑中最強(qiáng)，相同質(zhì)量濃度30 μg/mL下，抗氧化能力的順序?yàn)锽7CIQE（70.20%）＞BHT（66.70%）＞EGCG（17.80%）＞番茄紅素（1.90%）。在2、5、12、15、30 μg/mL的不同質(zhì)量濃度條件下，B7CIQE抗漂白能力隨著質(zhì)量濃度的增大而增強(qiáng)。在30 μg/mL時(shí)，B7CIQE抗漂白能力要遠(yuǎn)高于天然的β-胡蘿卜素。這可能是由于B7CIQE是由稀有的類胡蘿卜素和甲基萘醌組成，不飽和雙鍵含量較高，所以在抗氧化性上優(yōu)于普通類胡蘿卜素和多酚類物質(zhì)。

2.2 抗脂質(zhì)氧化能力

DSC是一種常用于評(píng)價(jià)抗氧化劑抗油脂氧化的方法，油脂開始氧化溫度越高，說明抗氧化劑的抗氧化能力越強(qiáng)。從圖2可以看出，添加了B7CIQE的花生油開始氧化的溫度為175 ℃，后面依次為β-胡蘿卜素（165 ℃）、葉黃素（162 ℃）和番茄紅素（160 ℃）。從組成結(jié)構(gòu)上推斷，B7CIQE具有較多數(shù)目的不飽和雙鍵，且其中萘醌母核具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性，所以相比其他3 種類胡蘿卜素具有最強(qiáng)的抗脂質(zhì)氧化能力。

圖2 B7CIQE與植物源類胡蘿卜素抗脂質(zhì)氧化的DSC熱流曲線Fig. 2 Non-isothermal DSC thermograms for peanut oils added with B7CIQE, lycopene, lutein or β-carotene

2.3 抑制蛋白氧化的能力

圖3 蛋白質(zhì)體外氧化抑制率Fig. 3 Inhibitory effect in vitro of antioxidants on protein oxidation

為了分析B7CIQE對(duì)于蛋白質(zhì)氧化抑制的效應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)測(cè)定了添加B7CIQE和植物源性類胡蘿卜素的牛血清白蛋白的氧化損傷。圖3表明，蛋白質(zhì)的氧化抑制率呈現(xiàn)出一致的質(zhì)量濃度依賴性。在10 μg/mL的質(zhì)量濃度下，B7CIQE對(duì)蛋白質(zhì)氧化的抑制率（25.75%）比類胡蘿卜素（24.97%）、葉黃素（17.94%）、番茄紅素（10.40%）略高。隨著質(zhì)量濃度的增加，B7CIQE的抑制率逐漸增加。在50 μg/mL的質(zhì)量濃度下，與類胡蘿卜素（48.44%）、葉黃素（48.64%）、番茄紅素（44.80%）的抑制率相比，B7CIQE表現(xiàn)出最大的抑制率（57.20%）。

2.4 對(duì)DNA解鏈的保護(hù)作用

圖4 DNA鏈氧化斷裂圖Fig. 4 Agarose gel electrophoretogram showing the protection of B7CIQE against DNA damage

ABAP能造成超螺旋DNA解鏈甚至破碎。為了研究B7CIQE對(duì)于ABAP所致的DNA損傷的緩解效應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)使用pBR322的DNA。在瓊脂糖凝膠中，超螺旋DNA的移動(dòng)速率大于碎片化DNA。如圖4所示，上面亮帶表示解鏈或者破碎的DNA，下面暗帶表示超螺旋或者沒有受損的DNA。比較條帶1和2，ABAP孵化1 h后的超螺旋DNA完全解鏈或者破碎。條帶3～8顯示B7CIQE對(duì)于DNA損傷的抑制率有質(zhì)量濃度依賴性。然而條帶9～17顯示，無論是50 μg/mL的低質(zhì)量濃度，還是100 μg/mL的高質(zhì)量濃度，植物內(nèi)源物都不能防止DNA損傷。在本實(shí)驗(yàn)中，B7CIQE顯示出對(duì)于DNA損傷保護(hù)的能力，為B7CIQE生物活性的研究提供參考。

2.5 細(xì)胞內(nèi)抗氧化能力

鑒于單獨(dú)的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果受到細(xì)胞內(nèi)部生化特性以及生物利用率等問題的影響，本實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞內(nèi)抗氧化的方法對(duì)紅球菌B7740所產(chǎn)B7CIQE的抗氧化活性進(jìn)行測(cè)定。所得結(jié)果由EC50表示。為了探明B7CIQE與細(xì)胞膜的相互作用及細(xì)胞的攝入量，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了清洗和未清洗2 組。如圖5所示：未清洗時(shí)，EC50順序?yàn)锽7CIQE（96.14 μg/mL）＜番茄紅素（155.98 μg/mL）＜葉黃素（186.47 μg/mL）＜β-胡蘿卜素（199.81 μg/mL）；清洗時(shí)，EC50順序?yàn)锽7CIQE（182.86 μg/mL）＜β-胡蘿卜素（260.25 μg/mL）＜葉黃素（287.57 μg/mL）＜番茄紅素（295.09 μg/mL）。B7CIQE與常見高等植物來源類胡蘿卜素相比，其EC50均較小。該結(jié)果顯示，B7CIQE因含有甲基萘醌類稀有類胡蘿卜素，具有比高等植物來源類胡蘿卜素更高的細(xì)胞膜滲透性，所以B7CIQE在細(xì)胞中具有較高的攝入量以及抗氧化活性。

圖5 B7CIQE與植物源類胡蘿卜素細(xì)胞內(nèi)抗氧化EC50Fig. 5 Cellular antioxidant activity of B7CIQE and plant-derived carotenoids

2.6 細(xì)胞毒性與抗增殖活性

如圖6所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用EC50表示，較低的EC50表示其較高的抗增殖能力。B7CIQE與常見植物來源類胡蘿卜素都表現(xiàn)了抗增殖活性與質(zhì)量濃度的相關(guān)性。人肝癌細(xì)胞HepG2抗增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葉黃素具有最低的EC50（20.86 μg/mL），其次為β-胡蘿卜素（124.88 μg/mL）、B7CIQE（126.34 μg/mL）、番茄紅素（139.24 μg/mL）。人口腔癌細(xì)胞KB抗增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，B7CIQE具有最強(qiáng)的抗KB細(xì)胞增殖活性，其EC50最低（25.14 μg/mL），其次為葉黃素（64.29 μg/mL）、番茄紅素（69.87 μg/mL）、β-胡蘿卜素（149.16 μg/mL）。在實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度下，B7CIQE對(duì)HepG2和KB細(xì)胞均未有明顯的細(xì)胞毒性（HepG2細(xì)胞的半抑制濃度（half maximal inhibitory concentration，IC50）為（311.92±36.01）μg/mL，KB細(xì)胞的IC50為（163.95±17.34）μg/mL），表明B7CIQE抑制HepG2和KB細(xì)胞增殖活性不是由其細(xì)胞毒性引起。

圖6 B7CIQE與植物源類胡蘿卜素抗HepG2與KB細(xì)胞增殖能力Fig. 6 Antiprolitferative activities of B7CIQE and plant-derived carotenoids against HepG2 human liver cancer and KB human oral cancer cells

自由基主要通過損傷脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA以及改變細(xì)胞間信號(hào)通路等作用對(duì)機(jī)體造成損害。脂質(zhì)與蛋白質(zhì)氧化與許多疾病相關(guān)，如糖尿病、子癇、慢性腎功能衰竭、自身免疫性疾病等。DNA是氧化應(yīng)激的模態(tài)損傷靶點(diǎn)，最終導(dǎo)致癌癥的發(fā)生。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷了B7CIQE的抗氧化活性。在氧化反應(yīng)特別是生物大分子的氧化反應(yīng)中，B7CIQE顯示出了優(yōu)良的抗氧化活性。除此之外，B7CIQE在細(xì)胞內(nèi)的抗氧化活性以及細(xì)胞利用率都較高，對(duì)于HepG2和KB細(xì)胞都表現(xiàn)了良好的抗增殖活性。

3 結(jié) 論

β-胡蘿卜素漂白實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，B7CIQE具有抗漂白能力，且隨著質(zhì)量濃度的增大其抗漂白能力逐漸增強(qiáng)，在30 μg/mL時(shí)，B7CIQE抗漂白能力要遠(yuǎn)大于天然的β-胡蘿卜素。脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，B7CIQE相比β-胡蘿卜素、葉黃素和番茄紅素具有最強(qiáng)的抗脂質(zhì)氧化能力。對(duì)蛋白質(zhì)氧化的抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與β-胡蘿卜素、葉黃素、番茄紅素相比，B7CIQE對(duì)蛋白質(zhì)氧化有很強(qiáng)的抑制作用，且隨著質(zhì)量濃度增加抑制作用增大。DNA鏈斷裂保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，B7CIQE對(duì)DNA損傷具有保護(hù)的作用。細(xì)胞內(nèi)抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，B7CIQE在細(xì)胞中具有較高的攝入量以及抗氧化活性，與常見高等植物來源類胡蘿卜素相比，其EC50均較小。細(xì)胞毒性與抗增殖活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，B7CIQE與常見植物來源類胡蘿卜素對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2和人口腔癌細(xì)胞KB都表現(xiàn)了抗增殖活性與質(zhì)量濃度的相關(guān)性，且B7CIQE具有最強(qiáng)的抗KB細(xì)胞增殖活性。

綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，北極海洋紅球菌B7740所產(chǎn)B7CIQE與常見高等植物來源類胡蘿卜素相比，具有較高的抗氧化活性和抗增殖活性。同時(shí)，紅球菌B7740所產(chǎn)B7CIQE的分離純化、工業(yè)化生產(chǎn)、應(yīng)用等也需要深入研究。

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