千春錄，殷建東，王利斌，林 晨，王兢業(yè)，肖麗霞，金昌海，陳學(xué)好，齊曉花,*

（1.揚(yáng)州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225127；2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，江蘇 南京 210095；3.揚(yáng)州大學(xué)園藝與植物保護(hù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225009）

獼猴桃不耐貯藏，常溫下易軟化腐爛[1]。抑制衰老并延長保鮮期是獼猴桃采后研究重點(diǎn)。植物組織正常代謝中會產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS），而抗氧化系統(tǒng)會清除ROS，使其維持于較低含量的動態(tài)平衡。低含量的ROS有信號傳導(dǎo)、刺激代謝等作用，而高含量的ROS能通過氧化作用對植物組織產(chǎn)生損傷，從而導(dǎo)致衰老腐敗；因此保持低水平ROS含量，維持其代謝平衡是抑制果實衰老的首要任務(wù)[2-3]。

獼猴桃是典型的呼吸躍變型果實，低濃度的乙烯就能促進(jìn)果實軟化衰老[4-5]。1-甲基環(huán)丙烯（1-methylcyclopropene，1-MCP）能更緊密地和乙烯作用位點(diǎn)結(jié)合，從而有效抑制乙烯作用。1-MCP的應(yīng)用可抑制果實的呼吸作用和乙烯釋放，提高果實的抗氧化能力，有效抑制果實的衰老并延長保鮮期[5-6]。自發(fā)氣調(diào)（self-developed modified atmosphere，MA）通過氣調(diào)袋內(nèi)果實呼吸作用，降低氣調(diào)袋中O2含量并提高CO2含量，并通過氣調(diào)袋內(nèi)外的氣體交換來維持內(nèi)部相對穩(wěn)定的低O2高CO2平衡[7-8]。獼猴桃果實MA貯藏能有效抑制果實乙烯的產(chǎn)生和呼吸作用，降低代謝水平，提高抗氧化能力，從而抑制衰老進(jìn)程[7-8]。有研究發(fā)現(xiàn)，將1-MCP處理和MA貯藏結(jié)合可有效抑制獼猴桃[9-10]和荔枝[11]低溫下的衰老進(jìn)程，進(jìn)一步延長保鮮期。

低溫貯藏可抑制獼猴桃衰老并延長其保鮮期，而對短期和短途流通的果實，常采用常溫貯藏，但獼猴桃常溫保鮮技術(shù)研究不足。在常溫貯藏過程中，1-MCP處理和MA貯藏結(jié)合對獼猴桃衰老和軟化的作用研究鮮見報道。本實驗以中華獼猴桃為試材，研究1-MCP處理、MA貯藏及兩者結(jié)合對獼猴桃采后常溫下衰老和ROS代謝的影響，旨在為1-MCP和MA技術(shù)在獼猴桃常溫保鮮中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試獼猴桃為中華獼猴桃（Actinidia chinensis），采自江蘇省揚(yáng)州市果園，七成成熟度（硬度為（2.36±0.22）kg/cm2；可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（9.37±0.43）%），挑選大小均勻、成熟度相對一致，無畸形、機(jī)械傷和病蟲害果實為試材。

SmartFreshTM1-MCP 美國AgroFresh公司；低密度聚乙烯自發(fā)氣調(diào)袋（厚40 μm；20 ℃ 1 個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下，O2透氣率為9.2×103mL/（m2·d），CO2透氣率為4.37×104mL/（m2·d）） 濰坊晟春元保鮮科技有限公司；乙二胺四乙酸二鈉、聚乙烯吡咯烷酮、愈創(chuàng)木酚、還原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、還原型輔酶Ⅰ、還原型輔酶Ⅱ、甲硫氨酸、氯化硝基四氮唑藍(lán)、核黃素、2-硫代巴比妥酸、聯(lián)吡啶（均為分析純） 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；脫氫抗壞血酸、二硫代硝基苯甲酸（均為分析純） 上海玉博生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

CheckMate Ⅱ O2、CO2測定儀 丹圣（上海）貿(mào)易有限公司；663-20型氣相色譜儀 日本日立公司；GY-1型果實硬度計 上海玖榮實業(yè)有限公司；BSA-124S分析天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；5417R臺式高速冷凍離心機(jī) Eppendorf中國有限公司；UV-1750紫外-可見分光光度計 島津中國有限公司。

1.3 方法

1.3.1 實驗處理

獼猴桃采后2 h內(nèi)運(yùn)抵實驗室，20 ℃預(yù)冷12 h，進(jìn)行不同處理。

本實驗共設(shè)4個處理組：1）對照（CK）組，即獼猴桃置于密封塑料箱（10 L）中，置于溫度30 ℃恒溫箱中12 h；2）1-MCP處理組，根據(jù)前期實驗優(yōu)化結(jié)果[1]進(jìn)行，即獼猴桃置于密封塑料箱（10 L）中，在30 ℃下用1 μL/L的1-MCP熏蒸處理12 h；3）MA貯藏組，即CK組獼猴桃果實在貯藏前用低密度聚乙烯自發(fā)氣調(diào)袋熱封；4）1-MCP和MA結(jié)合處理（1-MCP+MA）組，即1 μL/L 1-MCP熏蒸處理獼猴桃12 h后，熱封于自發(fā)氣調(diào)袋中。每個處理重復(fù)3 次，每次重復(fù)60 個果實。

處理結(jié)束后，所有果實均置于溫度為（20±1）℃、相對濕度為85%的恒溫箱中，其中CK組和1-MCP處理組果實是裸放，而MA貯藏組和1-MCP+MA處理組的果實于自發(fā)氣調(diào)袋中貯藏。貯藏期間每間隔7 d取樣測定果實品質(zhì)和生理指標(biāo)。

1.3.2 指標(biāo)測定

1.3.2.1 袋內(nèi)O2、CO2體積分?jǐn)?shù)的測定

O2、CO2體積分?jǐn)?shù)分別采用O2、CO2測定儀測定。

1.3.2.2 乙烯釋放量和硬度的測定

乙烯釋放量和硬度參考千春錄等[1]的實驗方法測定。

1.3.2.3 可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)和總糖含量的測定

可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)和總糖含量參考付永琦等[12]的實驗方法測定，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。

1.3.2.4 丙二醛含量和超氧陰離子生成速率的測定

丙二醛（malonaldehyde，MDA）含量和超氧陰離子生成速率參考千春錄等[13]的實驗方法測定，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。

1.3.2.5 相關(guān)酶活力的測定

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、過氧化物酶（peroxidase，POD）、抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）、脫氫抗壞血酸還原酶（dehydroascorbate reductase，DHAR）、谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase，GR）活力參考Qian Chunlu等[14]的實驗方法測定。

1.3.2.6 抗壞血酸和谷胱甘肽含量的測定

抗壞血酸（ascorbate，ASC）和谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量參考Qian Chunlu等[14]的實驗方法測定，結(jié)果以鮮質(zhì)量計。

1.4 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析，差異顯著性分析采用Tukey多重比較法。

2 結(jié)果與分析

2.1 貯藏過程中自發(fā)氣調(diào)袋內(nèi)氣體成分變化

圖1 獼猴桃貯藏過程中自發(fā)氣調(diào)袋中氣體體積分?jǐn)?shù)的變化Fig. 1 Changes in gas composition of self-developed modified atmosphere during storage of kiwifruits

由圖1可知，獼猴桃MA常溫貯藏1 d后，氣調(diào)袋內(nèi)O2體積分?jǐn)?shù)急劇下降而CO2體積分?jǐn)?shù)急劇上升，到貯藏3 d后基本維持平衡狀態(tài)，O2體積分?jǐn)?shù)為8.4%～9.8%，CO2體積分?jǐn)?shù)為8.2%～9.5%，O2和CO2的體積比處于0.8～1.1之間。1-MCP+MA處理組貯藏3 d后，袋內(nèi)氣體成分也基本穩(wěn)定，O2體積分?jǐn)?shù)為10.8%～11.5%，CO2體積分?jǐn)?shù)為7.8%～8.9%，O2和CO2的體積比處于1.2～1.4。該現(xiàn)象說明獼猴桃MA貯藏能顯著降低氣調(diào)袋中O2體積分?jǐn)?shù)，提高CO2體積分?jǐn)?shù)，而1-MCP處理后MA貯藏的果實由于呼吸強(qiáng)度降低可在氣調(diào)袋中保持相對較高的O2體積分?jǐn)?shù)和較低的CO2體積分?jǐn)?shù)。

2.2 不同處理對獼猴桃貯藏過程中乙烯釋放量的影響

圖2 不同處理對獼猴桃貯藏過程中乙烯釋放量的影響Fig. 2 Effects of different treatments on ethylene production of kiwifruits during storage

乙烯能促進(jìn)果實衰老，乙烯釋放高峰出現(xiàn)是呼吸躍變型果實采后完熟的標(biāo)志[5]。獼猴桃在呼吸躍變前會有乙烯釋放高峰出現(xiàn)，而后進(jìn)入后熟階段[4]。由圖2可知，CK組獼猴桃采后貯藏過程中乙烯釋放量增加，在14 d左右出現(xiàn)乙烯釋放高峰，而后釋放量減少。與CK組相比，MA貯藏能顯著降低獼猴桃果實乙烯釋放高峰值（P＜0.05），但并不能推遲乙烯峰出現(xiàn)；而1-MCP處理效果更佳，還能延遲乙烯峰出現(xiàn)時間至21 d，1-MCP+MA處理組果實的乙烯高峰于21 d出現(xiàn)，且峰值最小。該現(xiàn)象說明1-MCP處理和MA貯藏都能顯著延緩果實衰老，其中1-MCP處理效果優(yōu)于MA，1-MCP處理和MA貯藏可互增抑制衰老的效果。

2.3 不同處理對獼猴桃貯藏過程中硬度的影響

圖3 不同處理對獼猴桃貯藏過程中硬度的影響Fig. 3 Effects of different treatments on firmness of kiwifruits during storage

獼猴桃采后易軟化，果實硬度是其重要品質(zhì)指標(biāo)[1]。由圖3可知，獼猴桃采后迅速軟化，1-MCP、MA及1-MCP+MA處理都能保持果實硬度，在貯藏21 d時，分別是CK組果實的10.88、7.20、11.55 倍。1-MCP+MA處理組果實在貯藏后期硬度最高，但與1-MCP單獨(dú)處理組差異不顯著（P＞0.05）。該現(xiàn)象說明1-MCP處理和MA貯藏都能抑制果實軟化，其中1-MCP效果更佳，但兩者結(jié)合處理并不能進(jìn)一步顯著改善果實硬度，其效果與1-MCP單獨(dú)處理相當(dāng)。

2.4 不同處理對獼猴桃貯藏過程中可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)和總糖含量的影響

圖4 不同處理對獼猴桃貯藏過程中可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)（A）和總糖含量（B）的影響Fig. 4 Effects of different treatments on titratable acid (A) and total sugar (B) content of kiwifruits during storage

糖和酸含量是果實重要的品質(zhì)指標(biāo)[15-16]。由圖4A可知，CK組獼猴桃可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)在貯藏前期快速下降，14 d達(dá)到最低，而后上升。MA貯藏和1-MCP處理都可抑制果實可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降，其中1-MCP處理組果實在貯藏前21 d可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，在貯藏后期1-MCP+MA處理組果實的可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)更高。CK組和MA處理組果實在貯藏后期有可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)上升現(xiàn)象，而1-MCP和1-MCP+MA處理組果實呈持續(xù)下降趨勢。由圖4B可知，CK組獼猴桃總糖含量在貯藏期間呈持續(xù)上升趨勢，MA貯藏和1-MCP處理都抑制總糖含量上升，其中1-MCP處理組果實總糖含量較低，1-MCP+MA處理并不能進(jìn)一步降低獼猴桃總糖含量。

2.5 不同處理對獼猴桃貯藏過程中MDA含量和超氧陰離子生成速率的影響

圖5 不同處理對獼猴桃貯藏過程中MDA含量（A）和超氧陰離子生成速率（B）的影響Fig. 5 Effects of different treatments on MDA content (A) and production rate (B) of kiwifruits during storage

MDA是膜脂過氧化產(chǎn)物，其含量是判斷果實衰老程度的重要指標(biāo)[13]。ROS具有強(qiáng)氧化作用，可啟動膜脂過氧化，從而破壞細(xì)胞膜系統(tǒng)完整性。超氧陰離子是ROS的一種，其生成速率可反映組織遭受氧化脅迫的程度[13-14]。由圖5可知，CK組獼猴桃采后MDA含量和超氧陰離子生成速率變化趨勢相似，在貯藏期都呈增加趨勢，在貯藏的前14 d顯著上升，而后變化并不顯著。1-MCP處理和MA貯藏都能抑制MDA含量和超氧陰離子生成速率上升，其中1-MCP處理效果更佳，1-MCP+MA處理在貯藏前期并不能進(jìn)一步降低MDA含量和超氧陰離子生成速率，但在貯藏后期表現(xiàn)稍明顯。該現(xiàn)象說明1-MCP處理和MA貯藏都能抑制膜脂氧化進(jìn)程，其中1-MCP處理效果更好，而兩者結(jié)合處理在一定程度上抑制膜脂氧化能力最強(qiáng)。

2.6 不同處理對獼猴桃貯藏過程中相關(guān)酶活力的影響

圖6 不同處理對獼猴桃貯藏過程中SOD（A）、CAT（B）、POD（C）、APX（D）、DHAR（E）和GR（F）活力的影響Fig. 6 Effects of different treatments on SOD (A), CAT (B), POD (C),APX (D), DHAR (E) and GR (F) activity of kiwifruits during storage

果實衰老過程中氧化脅迫上升，一方面會加快膜脂氧化等衰老進(jìn)程，另一方面會激活抗氧化系統(tǒng)[2-3]。抗氧化系統(tǒng)包括多種抗氧化酶和抗氧化物質(zhì)，其中SOD能直接清除超氧陰離子生成O2和H2O2，而CAT和POD能清除H2O2，另外APX能夠通過氧化ASC生成脫氫抗壞血酸，將H2O2還原清除，而DHAR能通過氧化GSH獲取還原力，將脫氫抗壞血酸還原為ASC（此過程為ASC再生），同時GR可將氧化態(tài)谷胱甘肽還原為GSH，該循環(huán)是抗氧化系統(tǒng)中的抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)[14]。

由圖6A可知，CK組獼猴桃SOD活力在獼猴桃貯藏前7 d急劇下降，在7～14 d稍上升，而后活力下降。1-MCP處理和MA貯藏都能保持較高SOD活力，且14 d時活力出現(xiàn)明顯的峰值，MA貯藏組獼猴桃果實有最高的SOD活力峰值，分別是CK、1-MCP、1-MCP+MA處理組果實的1.85、1.19 倍和1.30 倍。在貯藏后期各處理組果實SOD活力都呈上升趨勢，其中兩者結(jié)合處理組果實SOD活力顯著高于其他處理組（P＜0.05）。

由圖6B可知，CK組獼猴桃CAT活力貯藏初期急劇下降，而后呈現(xiàn)上升趨勢。各處理組果實CAT活力顯著高于CK組（P＜0.05），其中1-MCP+MA處理組果實最高。

由圖6C可知，CK組獼猴桃果實POD活力在采后急劇下降，在7～14 d內(nèi)上升，而后降低，且在21 d下降至最低水平。1-MCP處理和MA貯藏都能抑制貯藏前期POD活力下降，其中1-MCP處理能在貯藏前期保持較高的POD活力，而MA貯藏組果實在貯藏后期POD活力較高。1-MCP+MA處理組果實的POD活力最高，在貯藏前期呈上升趨勢，7～14 d內(nèi)下降，14 d后開始上升，21 d時上升至最高值，而后下降至與單一處理組果實相當(dāng)?shù)乃健?/p>

由圖6D可知，CK組獼猴桃在貯藏初期APX活力急劇下降，7 d后變化并不明顯，只在7～14 d稍上升。1-MCP處理和MA貯藏都能抑制獼猴桃貯藏期APX活力下降，而1-MCP+MA處理組果實APX活力在貯藏初期上升而后下降，保持較高活力，并于貯藏末期APX活力上升。

由圖6E可知，CK組獼猴桃果實DHAR活力在貯藏初期上升，而后呈現(xiàn)下降趨勢。1-MCP處理和MA貯藏都能提高7 d時獼猴桃DHAR活力峰值，其中1-MCP+MA處理組果實DHAR活力顯著高于其他處理組果實（P＜0.05），分別是CK、1-MCP、MA組果實的1.19、1.14 倍和1.12 倍，同時也能保持貯藏后期較高DHAR活力。

由圖6F可知，CK組獼猴桃GR活力在貯藏前期下降，在7～14 d活力上升，而后下降。MA貯藏組果實GR活力變化趨勢和CK組相似，只是14 d時GR活力高峰值顯著低于CK組，且在21～28 d內(nèi)GR活力略有回升。1-MCP處理組果實GR活力在貯藏期呈下降趨勢，而在21～28 d時大幅上升。1-MCP+MA處理組果實GR活力變化和MA處理組果實相似，只是各時期1-MCP+MA處理組果實GR活力顯著高于其他處理組果實（P＜0.05）。

以上結(jié)果說明，貯藏前期獼猴桃果實直接抗氧化能力下降，14 d時抗氧化系統(tǒng)被激活，1-MCP處理和MA貯藏都能抑制貯藏前期果實抗氧化能力下降，且在貯藏后期保持較高的抗氧化能力，而1-MCP+MA處理組果實在貯藏期的抗氧化能力最強(qiáng)。

2.7 不同處理對獼猴桃貯藏過程中ASC和GSH含量的影響

由圖7A可知，CK組獼猴桃ASC含量在貯藏前期呈下降趨勢，在14 d時達(dá)到最低，而后在14～21 d上升，且21 d時ASC含量是14 d時的1.74 倍。與CK相比，1-MCP處理和MA貯藏都能抑制獼猴桃ASC含量在貯藏前期下降和貯藏后期上升的趨勢，在14 d前各處理組果實ASC含量高于CK組，其中1-MCP處理組果實ASC含量顯著高于MA貯藏組果實（P＜0.05），而1-MCP+MA處理組果實ASC含量最高；14 d以后CK和1-MCP處理組果實ASC含量上升，而MA和1-MCP+MA處理組果實ASC含量持續(xù)下降至21 d后才開始上升，其中1-MCP處理組果實上升幅度最大，到28 d其ASC含量分別是MA貯藏果實和1-MCP+MA處理組果實的1.66、1.08 倍。

圖7 不同處理對獼猴桃貯藏過程中ASC（A）和GSH（B）含量的影響Fig. 7 Effects of different treatments on ASC (A) and GSH (B) content of kiwifruits during storage

由圖7B可知，CK組獼猴桃GSH含量在貯藏前期上升，14 d上升至最高值后下降。1-MCP處理組在貯藏前期、MA處理在整個貯藏期都降低果實GSH含量，14 d前MA貯藏組果實GSH含量顯著高于1-MCP處理組果實（P＜0.05），14 d后1-MCP處理組果實GSH含量急劇上升，且在21 d后其含量顯著高于MA貯藏組果實（P＜0.05）。1-MCP+MA處理組果實GSH含量在整個貯藏期最低，28 d時其GSH含量分別是1-MCP處理組和MA貯藏組果實的91.56%和97.81%。

以上結(jié)果說明，獼猴桃在常溫貯藏過程中ASC和GSH含量變化趨勢相反，1-MCP處理和MA貯藏都能提高果實ASC含量，但降低GSH含量，1-MCP+MA處理組果實的ASC含量最高，而GSH含量最低。因為ASC是APX的底物，且具有直接抗氧化能力，所以各處理均能提高果實的抗氧化能力，其中結(jié)合處理效果最好。

3 討 論

果實軟化是獼猴桃衰老的標(biāo)志，一般認(rèn)為果實硬度低于1 kg/cm2時，獼猴桃喪失商品價值[17]。本實驗結(jié)果表明CK組獼猴桃在常溫貯藏14 d后失去商品價值，MA貯藏可延長至21 d，1-MCP處理及1-MCP+MA處理組果實可貯藏28 d。1-MCP能更有效地保持果實硬度，抑制可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降和總糖含量上升，可能與1-MCP能更加有效抑制乙烯生成，阻止呼吸躍變效應(yīng)，從而延緩衰老有關(guān)。

MA貯藏能降低果實貯藏環(huán)境O2含量并提高CO2含量[7-8]，本實驗中，貯藏環(huán)境的氣體濃度穩(wěn)定后，獼猴桃MA貯藏環(huán)境的O2和CO2體積比處于0.8～1.1，明顯小于低溫自發(fā)氣調(diào)的空氣成分比值[17]，該現(xiàn)象由獼猴桃常溫貯藏時呼吸作用比較旺盛所致。1-MCP處理能明顯降低獼猴桃呼吸強(qiáng)度，所以1-MCP+MA貯藏時環(huán)境O2比例提高，該現(xiàn)象表明結(jié)合處理可能可進(jìn)一步抑制呼吸作用和乙烯釋放量，延緩果實采后代謝和衰老。

果實采后ROS積累會導(dǎo)致氧化脅迫上升[18]。CK組獼猴桃采后常溫貯藏過程中，超氧陰離子生成速率上升說明果實組織遭受氧化脅迫上升，從而導(dǎo)致MDA含量上升。相比MA貯藏，1-MCP處理能更有效抑制氧化脅迫上升和膜脂氧化進(jìn)程，而兩者結(jié)合處理效果最好，該現(xiàn)象與硬度品質(zhì)指標(biāo)表現(xiàn)一致。

獼猴桃貯藏前期抗氧化能力下降[18-19]，植物ROS積累會激活其體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)[2-3]。SOD作為氧化脅迫的第一防線[20]，在獼猴桃貯藏前期活力急劇降低，這可導(dǎo)致ROS大量積累，而貯藏14 d時果實出現(xiàn)SOD活力峰值，表明抗氧化系統(tǒng)激活，這和前期研究結(jié)果[18,21]相似。各處理都能保持較高的果實SOD活力，其中只有1-MCP+MA處理能持續(xù)提高其活力。CAT、POD和APX是能直接清除H2O2的酶，1-MCP處理和MA貯藏都能提高貯藏期獼猴桃果實CAT、POD和APX活力，其中貯藏前中期1-MCP效果較好，貯藏后期MA貯藏效果更佳，該現(xiàn)象和前期研究結(jié)果[18,22]類似。1-MCP+MA處理組果實CAT、POD和APX活力最高，說明這兩種處理能互相促進(jìn)直接清除H2O2的能力。

DHAR和GR在ASC-GSH循環(huán)中是ASC和GSH的再生酶，高活性的DHAR和GR能促進(jìn)ROS清除，所以是植物對逆境的一種適應(yīng)性反應(yīng)[14,23]。貯藏初期CK組獼猴桃DHAR活力上升，ASC再生速率加快，該現(xiàn)象可抑制貯藏初期ASC含量的降低，但獼猴桃并不能保持高強(qiáng)度的ASC再生，在貯藏7 d后DHAR活力下降，該結(jié)果和前期研究結(jié)果[18]類似。1-MCP處理和MA貯藏都能增加貯藏7 d時獼猴桃DHAR活力，而1-MCP+MA處理組果實在貯藏7 d時DHAR活力顯著高于其他處理組果實，說明結(jié)合處理能更有效提高ASC再生能力。GSH能促進(jìn)ASC再生，貯藏前期CK組獼猴桃GR活力呈下降趨勢，該現(xiàn)象可導(dǎo)致ASC和GSH再生受阻而含量下降，而在貯藏7～14 d內(nèi)GR活力上升，可能是氧化脅迫上升導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)。1-MCP和MA都不能明顯提高獼猴桃果實GR活力，但1-MCP+MA處理能在貯藏各時間有效提高果實GR活力，說明結(jié)合1-MCP處理和MA貯藏能更有效促進(jìn)ASC和GSH再生，從而減輕氧化脅迫。

ASC和GSH是植物體內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，除參與ASC-GSH循環(huán)外，還參與多種代謝途徑[3,24]。各處理組獼猴桃在貯藏前期ASC含量下降，在貯藏后期果實軟化后上升，該現(xiàn)象與前期研究結(jié)果[1,21]類似。1-MCP處理和MA貯藏都能提高獼猴桃ASC含量，其中1-MCP處理效果更好，1-MCP+MA處理組果實的ASC含量最高；說明組合1-MCP處理和MA貯藏能降低ASC降解，保持果實抗氧化活性。CK果實GSH含量在貯藏前期上升，14 d后下降。1-MCP處理和MA貯藏都降低獼猴桃GSH含量，其中1-MCP+MA處理組果實最低。GSH和ASC含量變化趨勢相反，該現(xiàn)象可能由ASC再生消耗GSH所致[1]。

獼猴桃采后衰老過程中會出現(xiàn)乙烯高峰和呼吸躍變，1-MCP處理[25-26]和MA貯藏[27-28]都能抑制乙烯產(chǎn)生。本實驗中獼猴桃呼吸躍變出現(xiàn)在14 d左右，1-MCP處理相比MA貯藏能更有效抑制并延后乙烯產(chǎn)生，該現(xiàn)象與前期實驗結(jié)果相似[21]。1-MCP處理后進(jìn)行MA貯藏可進(jìn)一步抑制乙烯產(chǎn)生，可能是由于結(jié)合處理不僅能有效抑制呼吸作用和乙烯釋放，也能通過低氧的貯藏環(huán)境延緩代謝，減少失水，從而進(jìn)一步延緩果實衰老。14 d左右呼吸躍變期間CK組獼猴桃硬度和可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)急劇下降，同時總糖含量上升，出現(xiàn)后熟現(xiàn)象[29]，同時SOD、POD、APX、GR活力和GSH含量增加；這可能是由于各種代謝加劇，ROS含量增加，最終激活抗氧化系統(tǒng)[30]。CK組獼猴桃并不能長期保持高水平的抗氧化能力，14 d后SOD、POD和APX活力在呼吸躍變后就下降，從而致使ROS后期積累，導(dǎo)致最終衰老。1-MCP處理和MA貯藏都通過抑制乙烯產(chǎn)生，降低了呼吸躍變對抗氧化系統(tǒng)的影響，特別是1-MCP+MA貯藏組的果實，貯藏期間表現(xiàn)出較高的SOD、POD、APX活力，抗氧化能力明顯提高，從而延緩膜脂氧化和衰老進(jìn)程。

綜上所述，獼猴桃常溫下快速軟化衰老，1-MCP處理和MA貯藏都能抑制常溫貯藏獼猴桃乙烯釋放，提高SOD、CAT、POD、APX、DHAR活力，抑制ASC降解，從而保持較高的抗氧化性，抑制超氧陰離子生成速率升高及MDA積累，進(jìn)而延緩軟化和衰老進(jìn)程。1-MCP處理獼猴桃果實貯藏效果優(yōu)于MA貯藏，而1-MCP處理后進(jìn)行MA貯藏的保鮮方式能達(dá)到更好的貯藏效果。

[1] 千春錄, 陶蓓佩, 陳方霞, 等. 1-MCP對獼猴桃果實品質(zhì)和細(xì)胞氧化還原水平的影響[J]. 保鮮與加工, 2012, 12(2): 9-13.

[2] FOYER C H, NOCTOR G. Oxidant and antioxidant signalling in plants: a re-evaluation of the concept of oxidative stress in a physiological context[J]. Plant, Cell and Environment, 2005, 28(8):1056-1071. DOI:10.1111/j.1365-3040.2005.01327.x.

[3] FOYER C H, NOCTOR G. Ascorbate and glutathione: the heart of the redox hub[J]. Plant Physiology, 2011, 155(1): 2-18. DOI:10.1104/pp.110.167569.

[4] ATKINSON R G, GUNASEELAN K, WANG M Y, et al. Dissecting the role of climacteric ethylene in kiwifruit (Actinidia chinensis)ripening using a 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase knockdown line[J]. Journal of Experimental Botany, 2011, 62(11):3821-3835. DOI:10.1093/jxb/err063.

[5] SISLER E C, SEREK M. Inhibitors of ethylene responses in plants at the receptor level: recent developments[J]. Physiologia Plantarum,1997, 100(3): 577-582.

[6] MURAKAMI S, SUZUKI M, HATTORI N, et al. Influence of harvesting time and precooling treatment on 1-methylcyclopropene efficacy in ‘Rainbow Red’ kiwifruit (Actinidia chinensis)[J].Horticultural Research (Japan), 2016, 15(1): 73-79.

[7] WANG C T, WANG C T, CAO Y P, et al. Effect of modified atmosphere packaging (MAP) with low and superatmospheric oxygen on the quality and antioxidant enzyme system of golden needle mushrooms (Flammulina velutipes) during postharvest storage[J].European Food Research and Technology, 2011, 232(5): 851-860.DOI:10.1007/s00217-011-1453-5.

[8] MCDONALD B, HARMAN J E. Controlled-atmosphere storage of kiwifruit: I. effect on fruit firmness and storage life[J]. Scientia Horticulture, 1982, 17(2): 113-123.

[9] MWORIA E G, YOSHIKAWA T, SALIKON N, et al. Effect of MA storage and 1-MCP on storability and quality of ‘Sanuki Gold’kiwifruit harvested at two diあerent maturity stages[J]. Journal of the Japanese Society for Horticultural Science, 2011, 80(3): 372-377.

[10] VIEIRA M J, ARGENTA L C, DO AMARANTE C V T, et al.Postharvest quality of ‘Hayward’ kiwifruit treated with 1-MCP and stored under diあerent atmosphere[J]. Revista Brasileira Fruticultura,2012, 34(2): 400-408.

[11] DE REUCK K, SIVAKUMAR D, KORSTEN L. Integrated application of 1-methylcyclopropene and modified atmosphere packaging to improve quality retention of litchi cultivars during storage[J].Postharvest Biology and Technology, 2009, 52: 71-77. DOI:10.1016/j.postharvbio.2008.09.013.

[12] 付永琦, 陳明, 劉康, 等. 1-MCP二次處理對獼猴桃果實采后生理生化及貯藏效果的影響[J]. 果樹學(xué)報, 2007, 24(1): 43-48.

[13] 千春錄, 何志平, 林菊, 等. 熱處理對黃花梨冷藏品質(zhì)和活性氧代謝的影響[J]. 食品科學(xué), 2013, 34(2): 303-306.

[14] QIAN Chunlu, HE Zhiping, ZHAO Yuying, et al. Maturity-dependent chilling tolerance regulated by the antioxidative capacity in postharvest cucumber (Cucumis sativus L.) fruits[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2013, 93: 626-633. DOI:10.1002/jsfa.5858.

[15] PRASANNA V, PRABHA T N, THARANATHAN R N. Fruit ripening phenomena: an overview[J]. Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 2007, 47(1): 1-19. DOI:10.1080/10408390600976841.

[16] LI H J, ZHU Y Q, LUO F Y, et al. Use of controlled atmospheres to maintain postharvest quality and improve storage stability of a novel red-fleshed kiwifruit (Actinidiachinensis planch. var. rufopulpa [C. F.Liang et R. H. Huang] C. F. Liang et A. R. Ferguson)[J]. Journal of Food Processing and Preservation, 2015, 39(6): 907-914. DOI:10.1111/jfpp.12303.

[17] 馬書尚, 周瑗月. 秦美獼猴桃自發(fā)氣調(diào)貯藏技術(shù)研究初報[J]. 中國果樹, 1994, 11(3): 22-23.

[18] XIA Y X, CHEN T, QIN G Z, et al. Synergistic action of antioxidative systems contributes to the alleviation of senescence in kiwifruit[J].Postharvest Biology and Technology, 2016, 111: 15-24. DOI:10.1016/j.postharvbio.2015.07.026.

[19] MINAS I S, TANOU G, BELGHAZI M, et al. Physiological and proteomic approaches to address the active role of ozone in kiwifruit post-harvest ripening[J]. Journal of Experimental Botany, 2012, 63(7):2449-2464. DOI:10.1093/jxb/err418.

[20] ZHU S H, SUN L N, ZHOU J. Effects of different nitric oxide application on quality of kiwifruit during 20 ℃ storage[J].International Journal of Food Science and Technology, 2010, 45(2):245-251. DOI:10.1111/j.1365-2621.2009.02127.x.

[21] 樊秀彩, 張繼澍. 1-甲基環(huán)丙烯對采后獼猴桃果實生理效應(yīng)的影響[J].園藝學(xué)報, 2001, 28(5): 399-402.

[22] 唐燕, 杜光源, 馬書尚, 等. 1-MCP對室溫貯藏下不同成熟度獼猴桃的生理效應(yīng)[J]. 西北植物學(xué)報, 2010, 30(3): 564-568.

[23] 吳錦程, 陳建琴, 梁杰, 等. 外源一氧化氮對低溫脅迫下枇杷葉片AsA-GSH循環(huán)的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報, 2009, 20(6): 1395-1400.

[24] POTTERS G, DE GARA L, ASARD H, et al. Ascorbate and glutathione: guardians of the cell cycle, partners in crime?[J]. Plant Physiology and Biochemistry, 2002, 40(6): 537-548. DOI:10.1016/S0981-9428(02)01414-6.

[25] BLANKENSHIP S M, DOLE J M. 1-Methylcyclopropene: a review[J]. Postharvest Biology and Technology, 2003, 28(1): 1-25.DOI:10.1016/S0925-5214(02)00246-6.

[26] MAO L C, WANG G Z, QUE F. Application of 1-methylcyclopropene prior to cutting reduces wound response and maintains quality in cut kiwifruit[J]. Journal of Food Engineering, 2007, 78(1): 361-365.DOI:10.1016/j.jfoodeng.2005.10.004.

[27] DOMíNGUEZ I, LAFUENTE M T, HERNáNDEZ-MUNOZ P, et al.Influence of modified atmosphere and ethylene levels on quality attributes of fresh tomatoes (Lycopersicon esculentum Mill.)[J]. Food Chemistry, 2016, 209: 211-219. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.04.049.

[28] HUANG Z H, GUO L F, WANG H, et al. Energy status of kiwifruit stored under diあerent temperatures or exposed to long-term anaerobic conditions or pure oxygen[J]. Postharvest Biology and Technology,2014, 98: 56-64. DOI:10.1016/j.postharvbio.2014.07.008.

[29] WANG C Y, BUTA J G. Maintaining quality of fresh-cut kiwifruit with volatile compounds[J]. Postharvest Biology and Technology, 2003,28(1): 181-186. DOI:10.1016/S0925-5214(02)00125-4.

[30] SONG L L, GAO H Y, CHEN H J, et al. Eあect of short-term anoxic treatment on antioxidant ability and membrane integrity of postharvest kiwifruit during storage[J]. Food Chemistry, 2009, 114(4): 1216-1221.DOI:10.1016/j.foodchem.2008.10.080.